Folyékony étrenden tartott patkányok parotid mirigyének morfológiai változásai

Folyékony étrenden tartott patkányok parotid mirigyének morfológiai változásai

Soraya Coelho Leal I; Orlando Ayrton de Toledo II; Ana Cristina Barreto Bezerra II

I. Morfológiai terület, Orvostudományi Kar, UnB, Brasília, DF, Brazília
II. Fogorvostudományi Kar, Egészségtudományi Kar, UnB, Brazília, Brazília

A vizsgálat célja a folyékony étrenden tartott patkányok fültőmirigyében bekövetkezett morfológiai változások elemzése volt a szilárd étrendhez képest. Harminchat állatot véletlenszerűen két csoportra osztottak. A kontrollcsoport szilárd étrendet, a kísérleti csoport pedig folyékony étrendet kapott. Az állatokat 8, 15 és 30 nap után leöltük. A mirigyeket előkészítették paraffinba történő felvételre, és fénymikroszkóppal elemezték. Az eredmények statisztikailag szignifikáns csökkenést mutattak a kísérleti csoportba tartozó állatok fültőmirigy-tömegében a kontroll csoporthoz képest 15. és 30. napon. A legerősebb morfológiai változás a citoplazma vakuolusainak jelenléte volt a folyékony étrenden tartott állatok fültőmirigyében. A glikoproteinek és a mukopoliszacharidok speciális festési technikái nem tudták azonosítani a kísérleti állatoknál megfigyelt vakuolák belsejében található anyagokat. Arra a következtetésre jutunk, hogy a folyékony étrend 15 és 30 nap elteltével a parotid mirigy atrófiáját okozta.

Kulcsszavak: fültőmirigy, nyálmirigy, étrend, fénymikroszkópia.

Esse trabalho teve por objetivo analisar as alterações morfológicas das glândulas parótidas de ratos submetidos a uma dieta líquida. Trinta e seis animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos. O grupo controle recebeu dieta sólida, e o grupo kísérleti recebeu dieta líquida. Os animais foram sacrificados 8, 15 és 30 dias após o início da experimentação. As glândulas foram incluídas em parafina e analisadas no microscópio de luz. Os resultados mostraram uma redução estatisticamente reikšmingi no peso das glândulas parótidas dos animais do groupo experimental quando Compareado aos dos animais do grupo controle nos períodos de 15 and 30 dias. A alteração morfológica mais importante foi a evidenciação de vacúolos no citoplasma das glândulas parótidas dos animais alimentados com dieta líquida. Os vacúolos citoplasmáticos reagiram negativamente às técnicas de coloração específicas para glicoproteínas e mucopolissacarídeos (PAS e alpesi kék). Concluiu-se que a dieta líquida causou atrofia das glândulas parótidas nos períodos experimentais de 15 e 30 dias.

BEVEZETÉS

A nyálmirigy szekréciója gazdag folyadékokban, ionokban és fehérjékben, amelyek fontosak a száj egészsége és a fogak integritása szempontjából. Az áramlási sebesség erősen véd a fogszuvasodás ellen, és csökkent nyáltermeléssel rendelkező személyeket kell azonosítani, hogy a kezelési és megelőzési programokat úgy módosítsák, hogy csökkentsék a fogszuvasodás kockázatát (1 A hipo-nyál áramlását vagy a xerostomia-t mutató betegek általában magas caries aktivitást mutatnak, ha egyéb epidemiológiai változók fennmaradnak (2,3).

A nyál jelentős hatást gyakorol a lepedék iniciálására, érlelésére és anyagcseréjére. A fogszuvasodás folyamata során a nyál többféleképpen is beavatkozik. Stimulálva növelheti a zománc demineralizációs és remineralizációs folyamatával kapcsolatos védőionok, például kalcium, foszfát és fluorid mennyiségét. A nyál antimikrobiális anyagokat is termel, például immunglobulinokat, lizozimot, laktoferrint és nyálperoxidázt, amelyek azonnali hatást gyakorolhatnak az orális baktériumokra, amelyek zavarják a metabo lismüket, savat termelnek és aktiválják a szaporodást, vagy közvetlenül megölik őket (4-6). Más szavakkal, a nyál szerepe a fogak integritásának fenntartásában a mechanikai tisztítás és a szénhidrát-eltávolítás, a zománc poszt-eruptív érlelésének, az ionos környezet szabályozásának a lepedékfolyadékban való visszatükröződése, a remineralizáló potenciál és a sav diffúziójának korlátozása érdekében.

Ezek a védő tulajdonságok összefüggenek a nyál áramlásával. Ezért a nyálmirigyek integritásának és aktivitásának bármilyen megváltoztatása megváltoztathatja a nyál áramlását és összetételét. Az étrendben számos tényezőt kell figyelembe venni, például annak állagát, ízét és állagát (7–9). Edgar és Jenkins (10) szerint a csökkentett vagy fokozott patkányok masztikálását igénylő étrendek nyálmirigyeik sorvadásához vagy hipertrófiájához vezetnek. Johnson és Sreebny (11) megfigyelték, hogy amikor a patkányokat kemény állattal etették, a fültőmirigyek súlya, enzimatikus tartalma és fehérjeszintézise megnőtt. Másrészt Scott és mtsai. (12) elemezte a folyékony táplálék okozta változásokat patkány parotid mirigyekben, és arra a következtetésre jutott, hogy a mirigy súlya folyékony étrendben lévő patkányokban körülbelül 35% -kal csökkent a kontroll állatokhoz képest.

Az irodalomban korlátozott számú emberen végzett tanulmány található. A táplálkozás és az étrend hatásait az áramlás szekréciója és a nyál összetétele szempontjából kell értékelni. Mindazonáltal az embereken tapasztalt eredmények jelentősen hasonlóak az állatkísérletek eredményeihez. Ezért az állatmodell ismerete hasznos a sejtmirigy elváltozásainak, valamint a nyál összetételére gyakorolt ​​hatásuk megértéséhez (13).

Ennek a vizsgálatnak az volt a célja, hogy elemezze a folyékony étrenden tartott patkányok fültőmirigyében bekövetkezett morfológiai változásokat.

ANYAG ÉS MÓDSZEREK

Harminchat 90 napos hím Wistar patkányt, átlagsúlyuk 210 g (a Brasiliai Egyetem Laboratóriumi Állatközpontja) véletlenszerűen két csoportra osztottak. A kontroll csoportot szilárd étrenddel (Purina) és vízzel etettük ad libitum. A kísérleti csoportba tartozó állatokat folyékony táplálékkal és vízzel etették ad libitum. A folyékony étrendet naponta készítettük egy rész szilárd chow (20 g) és 5 rész desztillált víz (100 ml) összekeverésével. Az elegyet 3 percig keverjük, és felajánljuk az állatoknak (14).

8, 15 és 30 nap elteltével a kontroll és a kísérleti patkányokat éter túladagolással lemértük és megöltük. Mindkét oldalról a fültőmirigyet gondosan épen felboncoltuk és lemértük. A szövettani vizsgálatokhoz a mirigyeket 10% -os pufferolt formalinba helyeztük, és hagyományos módszerekkel dolgoztuk fel paraffinba ágyazás céljából. Hat mikrométeres metszeteket kaptunk, és hematoxilinnal és eozinnal (H&E), periodikus sav-Schiff-rel (PAS) és Alcian kék-vel festettük a fénymikroszkópos értékelés céljából. A statisztikai szignifikanciát a hallgató értékelte t-teszt.

Mindkét csoport állatai ugyanabban a tartományban híztak és egészségesnek tűntek a kísérleti időszak alatt.

A fültőmirigyek súlyát a három kísérleti periódusban az 1. táblázatban közöljük. A kísérleti állatok mirigy tömegének csökkenése a kontroll állatokhoz képest 8., 15. és 30. napon történt. Ennek ellenére ez a különbség nem volt statisztikailag szignifikáns a 8 napos időszakban.

folyékony

A kísérleti időszakokban a kontrollcsoport felépítése általában a parotid mirigy normálisnak mondható. A H&E-vel festett metszeteken pirozussejtek mutattak ki serozusos acinokat, amelyek egy kis központi lumenet és egy gömb alakú, bazális magot vettek körül (1. ábra).

A folyékony táplálékkal rendelkező patkányok parotid mirigyeinek szövettani megjelenése nagyon hasonló volt a kontroll csoport parotid mirigyéhez. A mirigy parenchyma, a sejtek közötti terek és a mag nem szenvedtek fontos változásokat. A serous acinus azonban enyhe atrófiát mutatott, és néhány acináris sejtet degranuláltak. A nyálcsatornákat normálisnak tekintették. A kísérleti csoportból származó parotid mirigyek sejtcitoplazmájában a vakuolák a kísérlet minden szakaszában láthatók voltak. Ezek a vakuolák gyakoribbak voltak a 15. és 30. napon (2-4. Ábra). PAS-t alkalmaztunk a glikoproteinek azonosítására, az Alcian blue-t pedig a vakuolákon belüli mukopoliszacharidok azonosítására; azonban a vakuolok tartalma mindkét technikára negatívan reagált (5. és 6. ábra).

Az eredmények azt mutatták, hogy a fültőmirigy súlya csökkent, amikor a patkányokat folyékony táplálékkal etették minden időszakban; ez a különbség azonban csak 15. és 30. napon volt statisztikailag szignifikáns. Bár a 8. napon a fültőmirigy súlya csökkent a kezelt csoportban, a csökkenés statisztikailag nem volt szignifikáns. Ez a standard deviációs számokkal magyarázható, amelyekben magasabb SD (± 130,16) látható a kontrollcsoportnál, amelyet egy olyan mirigy okoz, amely súlyának váratlan növekedését mutatta (1. táblázat).

A folyékony étrenddel táplált állati mirigyek sorvadását számos különféle vizsgálatban figyelték meg (15–19). Az irodalomban konszenzus létezik a nyálmirigyek méretének és súlyának csökkenésével kapcsolatban, ha a funkció csökken, ha megszűnik az ápolás szükségessége.

Általánosságban elmondható, hogy morfológiai elváltozásokat nem tapasztaltunk, amikor a kezelt csoport mellkasának mirigyeit mikroszkóppal vizsgáltuk. Az egyetlen fontos változás a vakuolusok jelenlétéhez kapcsolódott az acináris sejtek citoplazmájában, nagyobbak a 15. és 30. napon (1. táblázat).

Hand és Ho (17) lipidek jelenlétéről számolnak be atrófiás acináris sejtekben. Ezt a hipotézist azonban nem sikerült megerősíteni ebben a tanulmányban, mert a szövet rögzítésére alkalmazott módszer nem volt megfelelő a lipid vizsgálatokhoz.

Más vizsgálatok beszámoltak a folyékony táplálékkal etetett patkányok nyálmirigyeinek szövettani változásairól, az acináris és a csatorna sejtek méretének csökkenésével (16,18,19). A jelen kísérlet eredményei nem erősítették meg ezeket a változásokat, bár az acináris sejtek látszólag enyhe atrófiát mutattak a kontroll csoporthoz képest. Mindazonáltal ezek a megállapítások nem tekinthetők meggyőzőnek, mivel morfometriai vizsgálatot nem végeztek.

Megállapítható, hogy a folyékony étrenden tartott patkányok fültőmirigy-tömege kisebb volt, mint a kemény chow-val etetett patkányok súlya. Ez a különbség statisztikailag szignifikáns volt a 15. és 30. napon. A kezelt csoportból származó acinar sejtek citoplazmája markáns vakuolizációt mutatott, nagyobb volt a 15. és 30. napon, és a glikoproteinek és mukopoliszacharidok specifikus festési technikái nem voltak képesek azonosítani ezeket a szerves vegyületeket a vakuolokban.

Annak ellenére, hogy a jelen kutatás nem értékelte a nyál és a fogszuvasodás kapcsolatát, a nyál fontossága a fogszuvasodás folyamatában jól ismert (5). Muñiz és mtsai (20) arról számoltak be, hogy a jelentős rágódást igénylő ételek nagyobb nyálfolyási sebességet indukálhatnak helyi reflex révén. Így a megnövekedett nyál áramlási sebesség, a nyál és következésképpen a fog plakk pH-jának és a nyál összetevőinek növekedése fő tényező lehet a fogszuvasodás megelőzésében.

Ezért nagyon fontos megérteni azokat a lehetséges mechanizmusokat, amelyek módosíthatják a nyálmirigyek működését és aktivitását. Van néhány kérdés, amelyre nem kaptak választ, és egyesületeket meg kell tenni. A hosszú ideig folyékony étrenden tartott gyermekek szenvedhetnek-e bármilyen változást a nyálmirigyükben? Ha igen, befolyásolhatja-e ez a változás a nyál áramlási sebességét és összetételét?

1. Leone CW, Oppenheim FG. A nyál fizikai és kémiai vonatkozásai, mint az embereknél jelentkező fogszuvasodás kockázatának mutatói. J Dent Edu 2001; 65: 1054-1062. [Linkek]

2. Guggenheimer J, Moore PA. Xerostomia: etiológia, felismerés és kezelés. J Am. Dent Assoc 2003; 134: 61-69. [Linkek]

3. Lingstrom P, Moyninhan P. Táplálkozás, nyál és száj egészsége. Nutrition 2003; 19: 567-569. [Linkek]

4. Birkhed D, Heintze V. A nyál szekréciójának sebessége, pufferkapacitása és pH-ja. In: Humán nyál: Klinikai kémia és mikrobiológia. Tenuovo JO. Ed. Vol. I. Boca Raton: CRC Press; 1989. 26. o. [Linkek]

5. Lagerlof F, Oliveby A. caries-védő faktorok a nyálban. Adv Dent Res 1994., 8: 229-238. [Linkek]

6. Amerongen NAV, Veerman ECI. Nyál - a szájüreg védője. Szájbetegségek 2002; 8: 12-22. [Linkek]

7. Johnson DA. Efeitos da dieta e da nutrção sobre a composição da nyál. In: Cariologia para a Década de 90. Bowen WH, Tabak LA. Eds. Trad. Oppido T, São Paulo: Santos; 1995. p. 367-381. [Linkek]

8. Lenander-Lumikari M, Loimaranta V. Nyál és fogszuvasodás. Adv Dent Res 2000; 14: 40-47. [Linkek]

9. Sweeny EA. A nyál áramlása és összetétele a fogszuvasodás vonatkozásában. Módszerek és problémák ennek a kapcsolatnak a tanulmányozásában. In: Eljárások és fogszuvasodás. Kleinberg I., Ellison SA, Mandel ID. Eds. New York: Információkeresés; 1979. 183. o. [Linkek]

10. Edgar WM, Jenkins GN. Fokozhatja-e az ember nyálműködését a fokozott rágódás? J Dent Res 198; 60 (B): 1172. [Linkek]

11. Johnson DA, Sreebny LM. A fokozott rágódás hatása a patkány parotid mirigy szekréciós folyamatára. Archs Oral Biol 1973; 18: 1555-1558. [Linkek]

12. Scott J, Berry MR, Gunn DL, Woods K. A folyékony étrend hatása a patkány parotid struktúrájának kezdeti és tartós, stimulált parotid nyálelválasztására. Archs Oral Biol 199; 36: 855-857. [Linkek]

13. Turner RJ, Sugiya H. Nyálmirigyek és nyál. Szájbetegség 2002; 8: 3–11. [Linkek]

14. Johnson DA. A folyékony étrend hatása a patkány parotid nyál fehérje összetételére. J Nutr 1982; 112: 175-181. [Linkek]

15. Hall HD, Scheneyr CA. A nyálmirigy sorvadása patkányokban folyékony étrend hatására. Proc Soc Exp. Biol. Med., 1964; 117: 789-793. [Linkek]

16. Hall HD, Scheneyr CA. A metrecal okozta változásokat az emberi nyálban. Proc Soc Exp. Biol. Med., 196, 124: 532-536. [Linkek]

17. Hand AR, Ho B. Patkány parotid acinar sejtek folyadék-diéta által kiváltott változásai, amelyeket elektronmikroszkóppal és enzim citokémiával vizsgáltak. Archs Oral Biol 198; 26: 369-380. [Linkek]

18. Sreebny LM, Johnson DA. Az élelmiszer-konzisztencia és a csökkent táplálékfogyasztás hatása patkány parotisban és hasnyálmirigyben. Am J Physiol 1971; 215: 3879-3884. [Linkek]

19. Johnson DA, Sreebny LM. Az ételkonzisztencia és az éhezés hatása a patkány parotid mirigy napi ciklusára. Archs Oral Biol 1971; 16: 177-185. [Linkek]

20. Muñiz BR, Maresca BM, Tumilasci OR, Perec J. Egy kísérleti étrend hatása a fültő nyálára és a fogplakk pH-jára intézményesített gyermekeknél. Archs Oral Biol 198; 28: 575-581. [Linkek]

Levelezés a
Dra. Soraya Coelho Leal
Área de Morfologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Brasília, Campus Universitário
Asa Norte
Brasília, DF, Brasil
Tel .: + 55-61-307-2256
E-mail: [email protected]

Elfogadva 2002. augusztus 5-én

A napló minden tartalmát, kivéve, ha másként jelezzük, a Creative Commons Nevezési Licenc alapján licenceljük