Határok a farmakológiában

Etnofarmakológia

Szerkesztette

Cheorl-Ho Kim

Biológiai Tudományok Tanszék, Tudományos Főiskola, Sungkyunkwan Egyetem, Dél-Korea

Felülvizsgálta

William Chi-Shing Tai

Hongkongi Műszaki Egyetem, Hongkong

Yung Hyun Choi

Dong-Eui Egyetem, Dél-Korea

Dong-Sung Lee

Chosun Egyetem, Dél-Korea

A szerkesztő és a lektorok kapcsolatai a legfrissebbek a Loop kutatási profiljukban, és nem feltétlenül tükrözik a felülvizsgálat idején fennálló helyzetüket.

Cikk letöltése
- PDF letöltése
- ReadCube
- EPUB
- XML (NLM)
- Kiegészítő
  Anyag
Exportálás
- EndNote
- Referencia menedzser
- Egyszerű TEXT fájl
- BibTex

OSZD MEG

Eredeti kutatás CIKK

1 Klinikai Orvostudományi Osztály, Koreai Keleti Orvostudományi Intézet, Daejeon, Dél-Korea
2 Keleti Neuropszichiátriai Osztály, Koreai Orvostudományi Főiskola, Daejeon Egyetem, Daejeon, Dél-Korea
3 Biokonvergencia-elemzési részleg, Koreai Alaptudományi Intézet, Daejeon, Dél-Korea
4 K-herb Research Center, Koreai Keleti Orvostudományi Intézet, Daejeon, Dél-Korea
5 Molekuláris Orvostudományi Laboratórium, Koreai Orvostudományi Főiskola, Daejeon Egyetem, Daejeon, Dél-Korea

Bevezetés

A depresszió egy olyan érzelmi rendellenesség, amely különböző tünetekkel társul, például alvászavarokkal, étkezési rendellenességekkel és szorongással (Organization, 2009). A súlyos depressziós rendellenesség (MDD) a depressziós hangulat legalább 2 hétig tartó fennmaradása, vagy az öröm vagy az érdeklődés elvesztése olyan tevékenységek iránt, amelyeket általában élvezetesnek találnak (Kessler et al., 2003). Az MDD élettartama világszerte körülbelül 15–25%, és az Egészségügyi Világszervezet (WHO) betegségterhelési rangsorában a legmagasabb rangú betegségek közé tartozik (Greenberg et al., 2003; Simon, 2003).

Mód

A BTS előkészítése

A BTS standardizálásához gallussavat, genipozidot, albiflorint, paeoniflorint, liquiritin-apiosidot, liquiritint, nodakenint, benzoesavat, baicalint, wogonozidot és glicirrizint használtunk markerként és számszerűsítettünk. A BTS-ben lévő 11 marker vegyület kvantitatív és kvalitatív elemzését optimalizált HPLC-PDA módszerrel végeztük. A BTS egyes komponenseit úgy határoztuk meg, hogy retenciós idejüket és UV-spektrumukat összehasonlítottuk az egyes referencia standardokéval. A 11 marker vegyület retenciós idejét és mennyiségét a BTS-ben az 1. kiegészítő ábra mutatja.

Állatkísérletek

Hét hetes hím C57BL/6 egereket vásároltunk a Daehan Biolink Co.-tól (Chungbuk, Korea). Az állatkísérleteket a Nemzeti Egészségügyi Intézetek (NIH) laboratóriumi állatok gondozására és felhasználására vonatkozó útmutatójának megfelelően hajtották végre, és a Koreai Keleti Orvostudományi Intézet intézményi állatgondozási és felhasználási bizottsága jóváhagyta (írásos jóváhagyási szám: 17-049). Az egereket polipropilén ketrecekben helyeztük el, normál körülmények között, 12 órás világos/sötét ciklusban, 24 ± 0,5 ° C és 55 ± 5% páratartalom mellett, standard táplálékkal és vízzel. A depresszió kiváltása érdekében az egereket 1 hétig akklimatizálták, mielőtt intraperitoneális (IP) rezerpin injekciókat kaptak (0,5 mg/kg 0,1% dimetil-szulfoxidot és 0,3% Tween-80-at tartalmazó PBS-ben) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA). USA) naponta egyszer, 10 napig. A kontroll egereket 0,1% dimetil-szulfoxidot és 0,3% Tween-80-at tartalmazó rezonidinmentes PBS-sel injektáltuk. A rezerpin indukálta egereket véletlenszerűen öt csoportra osztottuk (n = 6 csoportonként), és orálisan PBS-sel (csak rezerpin-csoport), 20 mg/kg fluoxetinnel (FXT) (Sigma-Aldrich) vagy 100, 300 vagy 500 mg/kg BTS. A kontroll egereknek orális PBS dózisokat adtunk be. A kísérleti sémákat, beleértve a reserpin indukcióját és beadási ütemezését, az 1A.

1.ábra A BTS hatása a reserpin által kiváltott depresszió fejlődésére és depresszióval kapcsolatos viselkedésére egerekben. Az egereknek orálisan, vivőanyagot (PBS), BTS-t (100, 300 vagy 500 mg/kg) vagy fluoxetint (FXT, 20 mg/kg) adtak a megadott időtartamra, napi alapon. (A) Reserpin kezelés és orális beadási ütemtervek a viselkedési kísérletekhez. (B) Testtömeg és (C) a táplálékfelvételt a megjelölt napokon mértük. (D) Mozgásképtelenség ideje a kényszerúszási tesztben (FST) és (E) - a farok felfüggesztésének vizsgálata (TST) és (F) teljes utazási távolság a nyílt terepi tesztben (OFT), a 11. napon mérve. Az adatok átlag ± SD értékek (n = 6, egyirányú ANOVA: # p ## p ### p 5/ml) BTS-sel előkezeltek és FXT-t 1 órán át, majd 24 órán át LPS-sel (100 ng/ml) stimuláltuk. A nitrogén-oxid (NO) szintjét a tenyészet felülúszójában NO detektáló készlet segítségével határoztuk meg (iNtRON Biotechnology, Seongnam, Korea), a gyártó utasításainak megfelelően.

Enzimhez kapcsolt immunszorbens assay (ELISA)

Az egér vért heparinnal bevont csövekbe gyűjtöttük, altatásban, Zoletil (25 mg/kg, Zoletil 50; Virbac, Cedex, Franciaország) alkalmazásával. A plazmagyűjtéshez a mintákat 10 percig 3000 fordulat/perc sebességgel, 4 ° C-on centrifugáltuk, és a felülúszót gondosan új csőbe helyeztük. A plazmát használat előtt -80 ° C-on tároltuk. Az egér kortikoszteron (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA) plazmaszintjét ELISA készletek alkalmazásával határoztuk meg a gyártó protokolljai szerint.

A BV2 sejteket (2x105/ml) 1 órán át BTS-sel vagy FXT-vel előkezeltük, majd 16 órán át LPS-sel (100 ng/ml) stimuláltuk. A tenyészet felülúszójában az IL-6, IL-1β, TNF-α és IL-10 szintjét a kereskedelemben kapható ELISA készlet segítségével határoztuk meg (R&D systems, Minneapolis, MN, USA), a gyártó protokolljainak megfelelően.

Valós idejű PCR

A teljes RNS-t TRIzol-reagenssel (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) izoláltuk, és a cDNS-szintézist a PrimeScript ™ RT reagenskészlet (TaKaRa, Shiga, Japán) alkalmazásával hajtottuk végre. A mRNS szintje Il1b, Il6, Tnfa, Nos2, Cox2, Hmox1, és glicerinaldehid-3-foszfát-dehidrogenáz (Gapdh) mennyiségét 7500 valós idejű PCR rendszerrel (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) és Power SYBR® Green PCR Master Mix (Applied Biosystems) alkalmazásával számszerűsítettük (Park és mtsai, 2015). Az alapozó szekvenciákat az 1. táblázat tartalmazza.

Asztal 1 A valós idejű PCR primerek szekvenciája.

Western Blotting

Statisztikai analízis

9. ábra A HO-1 közvetíti a BTS hatását a pro-gyulladásos citokinek NO-termelésére és mRNS-expressziójára a BV2 sejtekben. (A) A BV2 sejteket 1 órán át BTS-sel előkezeltük SnPP (10 μM) jelenlétében vagy hiányában, majd 24 órán át LPS-sel (100 ng/ml) stimuláltuk. A sejttenyészet felülúszójának NO-szintjét NO-detektáló készlettel mértük. (B – F) A BV2 sejteket 1 órán át BTS-sel előkezeltük SnPP (10 μM) jelenlétében vagy hiányában, majd 6 órán át LPS-sel (100 ng/ml) stimuláltuk. Szintjei (B) Nos2, (C) Cox2, (D) Il6, (E) Il1b, és (F) Tnfa Az mRNS-eket valós idejű PCR-rel határoztuk meg. Gapdh töltésellenőrzésként használtuk. Az adatok a három párhuzamos meghatározás átlagának ± SD-jét mutatják (egyirányú ANOVA: ### p †† p ††† p Kulcsszavak: reserpin, depresszió, Bangpungtongsung-san, antidepresszáns, neuroinflammáció, neuroprotekció, BV2, microglia

Idézet: Park B-K, Kim NS, Kim YR, Yang C, Jung IC, Jang I-S, Seo C-S, Choi JJ és Lee MY (2020) A Bangpungtongsung-San antidepresszáns és neuroinflammatorikus hatásai. Elülső. Pharmacol. 11: 958. doi: 10.3389/fphar.2020.00958

Beérkezett: 2019. április 10 .; Elfogadva: 2020. június 11 .;
Megjelent: 2020. július 10.

Cheorl-Ho Kim, Sungkyunkwan Egyetem, Dél-Korea

William Chi-Shing Tai, Hongkongi Műszaki Egyetem, Hongkong
Yung Hyun Choi, Dong-Eui Egyetem, Dél-Korea
Dong-Sung Lee, Chosun Egyetem, Dél-Korea