A Boophilus microplusszal (Acari: Ixodidae) fertőzött szarvasmarháknál a doramektin egyszeri alkalmazásának terápiás és tartós hatékonysága öntött vagy injekció formájában

John E. George, Ronald B. Davey, A Doramectin egyszeri alkalmazásának terápiás és tartós hatékonysága Boophilus microplusszal (Acari: Ixodidae) fertőzött szarvasmarhák öntött vagy injekció formájában történő alkalmazásával, Journal of Medical Entomology, 41. évfolyam, Issue 2004. május 1., 402–407. Oldal, https://doi.org/10.1603/0022-2585-41.3.402

Absztrakt

Ennek a vizsgálatnak az volt a célja, hogy értékelje a B. microplus-fertőzött szarvasmarhák egyszeri kezelésének terápiás és tartós hatékonyságát önthető készítményben vagy doramektin szubkután injekciójában, olyan kísérleti tervezéssel, amely lehetővé teszi nemcsak az összhatás meghatározását. valamint a terápiás hatékonyság becslése a három parazita szakasz mindegyikével szemben. Ez a megközelítés megkönnyíti a kezelések hasznosságának kritikai értékelését az importált szarvasmarhák kullancsainak behurcolásával szembeni védelem és a szarvasmarhák kivitelre bocsátásának és kezelésének stratégiájának megalapozása érdekében. A kísérleti eredmények azt is megmutatják, hogy a két doramektin készítmény milyen hasznossággal bír a szarvasmarhák kezelésére a kullancskitörések felszámolására a karantén zónában vagy a szomszédos kullancsmentes területen, valamint az APHIS, VS szarvasmarha-láz kullancsirtási programjának (CFTEP) egyéb vonatkozásai.

Anyagok és metódusok

A vizsgálatot az Egyesült Államok Mezőgazdasági Minisztériumában, Agrárkutatási Szolgálatban, Szarvasmarha-láz kullancs kutató laboratóriumában végezték, Mission, TX. A kutatás két különálló vizsgálatból állt, amelyek mindegyike két különböző készítmény terápiás és tartós hatékonyságának becslését szolgáltatta: injektálható és önthető doramectin készítmény. Felnőtt, nimfa és lárva B. microplus fertőzött szarvasmarhákra alkalmaztuk őket a kezelés idején.

A vizsgálatokat külön végeztük. Naiv szarvasmarhákat alkalmaztak minden kísérletben a korábban kullancsokkal fertőzött szarvasmarhák alkalmazásából eredő torzítás megelőzésére vagy csökkentésére. Minden kísérlet minden szarvasmarháját külön-külön, oszlopokban tartottuk egy nyitott oldalú istállóban, 3,3–3,3 m-es istállókban, amelyeket 1,7 m magas salaktömb-falak választottak el. Mindegyik vizsgálatot környezeti körülmények között végezték, azzal a különbséggel, hogy az istálló teteje miatt közvetlen napfény vagy csapadék nem érte el a szarvasmarhákat.

A doramectin két készítménye, a Dectomax Pour-on (Doramectin 0,5% Pour-on) és a Dectomax Injectable (Doramectin 1% Injekciós Solution) a Pfizer Animal Health, Newark, NJ bejegyzett termékei. Az Egyesült Államokban a két terméket különféle belső és külső paraziták ellen használják, kivéve a kullancsokat. Az önthető készítmény 5 mg/ml (0,5%) (AI) tartalmat tartalmazott, és a kezelést fertőzött szarvasmarhákra alkalmaztuk 1 ml/10 kg állat testtömegben, amely a címkézett regisztrált kezelési dózis volt. A ráöntésre alkalmazott kezelési módszer abból állt, hogy az endektocid megfelelő térfogatát mérőhengerbe mértük, és az anyagot egyenletesen vittük fel minden borjú hátának középvonala mentén a marmagasságtól a farokfejig. Az injektálható doramektint szubkután 200 μg/kg (1 ml/50 kg) adagolási sebességgel adták be.

A terápiás hatékonyság értékelése

A két készítmény és az állatok kezelésére alkalmazott módszerek közötti különbségektől eltekintve, az öntéssel és az injekcióval végzett kísérletek során alkalmazott összes eljárás megegyezett. Minden kísérletben nyolc herefordi üszőborját használtak, mindegyikük ~ 200 kg súlyú volt. Az egyes vizsgálatok borjait véletlenszerűen két egyenlő csoportba osztottuk, amelyek csoportonként négy borjút tartalmaztak. Minden vizsgálatban az egyes készítmények terápiás hatékonyságának becslése három különálló lárvafertőzésen alapult, amelyeket minden borjúnál elvégeztek a kezelés megkezdése előtt. A szarvasmarhákon mindkét fertőzést mindkét kísérlet során 17x60 mm-es (2-dram) héjas injekciós üveget tartalmazó, kb. 5000 lárvát tartalmazó, 2–4 hetes öreg borjúcimkék alkalmazásával végeztük el az egyes borjak elülső vállterületét. Az injekciós üveg rögzítése után eltávolítottuk a pamutdugót, amely a lárvákat az üveg belsejében tartotta, hogy a lárvák szabadon mozoghassanak a borjú testén. Mindkét kísérletben minden borjút 18 nappal a kezelés megkezdése előtt megfertőztek, és a kezdeti kezelés előtt 11 és 4 nappal további két ~ 5000 lárva fertőzés történt. Ez a fertőzési minta lehetővé tette az endectocidok felnőtt, nimfa és lárva kullancsok elleni hatékonyságának értékelését a kezelés megkezdésekor.

Az egyes vizsgálatokban felhasznált nyolc borjút a kezelés napján külön-külön lemértük, így kiszámítható volt az egyes állatok megfelelő vizsgálati anyagmennyisége, és mindegyik borjút a megfelelő doramektin-készítménnyel kezeltük a korábban leírt módon. . A két vizsgálat mindegyikében az első borjak csoportját az egyik formulával kezeltük. Minden kísérletben a szarvasmarhák második csoportja kezeletlen kontrollcsoportként maradt.

Így az IF értéke egy meghatározott számú nőstény szaporodási potenciáljának becslése, amelyek adott mennyiségű tojást raknak ki meghatározott keltetési sebességgel. A biológiai adatokat (nőstény és tojástömeg) arra is felhasználták, hogy jelezzék, hogy az endektocid kezelések mérhető szubletális hatást gyakoroltak-e a kezelés után az újratermelésig túlélő nőstények méretére és termékenységére.

A tartós hatékonyság értékelése

A doramectin önthető és injektálható készítmények tartós hatékonyságának becslése a kezelt és kezeletlen szarvasmarhák kullancsfertőzések sorozatán alapult, amelyeket rendszeres időközönként 1 hét múlva kezdtek a kezelések beadása után. A fertőzési eljárások megegyeztek a fent leírtakkal. A lárvákat (~ 5000) mindegyik borjúra helyeztük a kezelés után 1 héttel, és a kezelés utáni negyedik héten át hetente folytattuk. A kezelés után 27–33 nappal elszakadt nőstényeket az 1 hét kezelés utáni fertőzésből származónak minősítették; azokat a nőstényeket, akik a kezelés után 34–40 nappal elszakadtak, a második heti kezelés utáni fertőzésből származónak minősítették; azokat a nőstényeket, akik a kezelés után 41–47 napig leváltak, a kezelés utáni harmadik fertőzésből származónak minősítették; és azokat a nőstényeket, akik a kezelés után 48–54 nappal elszakadtak, a negyedik heti kezelés utáni fertőzésből származónak minősítették.

A jelentésben leírt kutatások során a nyomozók betartották az USDA – ARS Állatvédelmi Bizottság által jóváhagyott protokollt. A protokoll a Knipling-Bushlandi Állattenyésztési Rovarok Laboratóriumában található, Kutatási Egység, USDA-ARS, Kerrville, TX.

Eredmények

Doramectin önthető kezelés

A kezelt állatokból kinyert borjúra vetített nőstények átlagos száma szignifikánsan alacsonyabb volt (F = 12,6; df = 1, 7; P 1. táblázat). A ráöntéses kezelés eredményeként a terápiás kontroll mértéke 88,6% volt. A kezelt borjakból elakadt nőstény átlagos súlya 73% -kal volt alacsonyabb, mint a kezeletlen borjakból származó elzáródott nőstényeké. A nők átlagos súlyának különbsége statisztikailag szignifikáns volt (F = 288,7; df = 7, 174; P 2. táblázat). A kezelt borjakból kinyert nőstények tojástömegének átlagos tömege lényegesen kisebb volt (F = 129,2; df = 7, 174; P 1. táblázat

Átlagos ± SD kullancsszám borjúnként és a B. microplus IF-jének százalékos kontrollja kezeletlen szarvasmarhákon, szarvasmarhákon, amelyeket egyszeri doramektin alkalmazásával kezeltek 0,5% AI mellett, vagy szarvasmarhákat, akiket egyszeri szubkután doramektin injekcióval kezeltek 200 μg-nál. AI/testtömeg kg

Kezeletlen szarvasmarhákból, szarvasmarhákból, amelyeket egyszeri adagolással kezelt doramektinnel kezeltek 0,5% AI mellett, vagy szarvasmarhákból, akiket egyszeri szubkután doramektin injekcióval kezeltek 200 μg AI mellett, átlagos ± SD nőstény és tojástömeg. kg testtömeg

A ráöntés statisztikailag szignifikáns hatást mutatott a kezelt és kezeletlen nőstények kullancsainak IF-jére (F = 9,97; df = 5, 23; P 3. táblázat).

Az IF átlagos ± SD és a visszanyert B. microplus nőstények százalékos kontrollja, amelyek a kezelések beadásának időpontjában különböző parazita stádiumokban voltak kezeletlen szarvasmarhákon, szarvasmarhákon, amelyeket doramektin egyszeri öntött alkalmazásával kezeltek 0,5% AI mellett, vagy szarvasmarhákkal doramektin egyetlen szubkután injekciójával 200 μg AI/testtömeg-kg-on

Az öntött kezelés tartós hatékonysága 1 héttel a kezelés után 0% volt. A kezelt és kezeletlen borjakból gyűjtött kullancsok IF-értéke közötti különbségek a gazdákon 7 nappal a kezelés után elhelyezett lárvafertőzés szempontjából nem voltak statisztikailag szignifikánsak (F = 0,242; df = 1, 7; P = 0,64).

Doramektin injekciós kezelés

A doramectin injekciót kapott csoportban borjúnként összegyűjtött elkötött nőstények átlagos száma 84,4% -kal volt kevesebb, statisztikailag szignifikáns különbség (F = 9,29; df = 1, 7; P 1. táblázat). A kezelt és nem kezelt csoportokból elzárt nő átlagos súlya közötti különbség statisztikailag szignifikáns volt (F = 277,0; df = 7, 136; P 2. táblázat).

Statisztikailag szignifikáns hatása volt (F = 17,1; df = 5, 23; P 0,07) a kullancscsoportok IF-jére egy másik parazita stádiumban, amikor a borjakat beadták, és a kezelések között nem volt szignifikáns kölcsönhatás. és parazita stádium (P> 0,08; 3. táblázat).

A tartós hatékonyság becslései az IF átlagos értékeinek összehasonlításából, a kezelés után 1 hét múlva heti négy lárvafertőzésből származó adatok alapján (4. táblázat) azt mutatták, hogy a heti fertőzések közötti százalékos kontrollkülönbségek statisztikailag szignifikánsak (F = 10,9; df = 3,15; P 0,05), de a negyedik fertőzés százalékos kontrollértéke szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a másik három (P 4. táblázat

A kezeletlen és kezelt szarvasmarháknak a kezeletlen és kezelt szarvasmarháknak a lárvafertőzésektől való újratermelésig túlélő B. százalékos kontroll százalékos átlagos ± SD értéke heti intervallumban, doramektin egyetlen szubkután injekciója után, 200 μg AI/testtömeg-kg

Vita

A 88,6% -os terápiás kontroll, amely a doramektin önthető készítményével végzett egyetlen kezelés eredményeként jött létre, összehasonlítva Davey és George (2002) által az eprinomektinnel (87,7%), az ivermektinnel (84,7) alkalmazott öntött kezelések szintjével. és a moxidektin (78,7%). A szubkután injekció lényegesen magasabb szintű kontrollt eredményezett, mint a ráöntés, terápiás hatékonysága 99,8% volt. Gonzales és mtsai. (1993) kiszámította a szubkután injekciós kezelés hatékonyságát, összehasonlítva az elakadt nőstény B. microplus átlagos számát, amely naponta levált a kezelt és kezeletlen borjakról, ahelyett, hogy a termékenységet és a termékenységet is figyelembe vette volna a számítás során, de összehasonlítható szintről számoltak be terápiás hatékonysága> 99%. A két kezelés során kinyert kullancsok női tömege és tojástömege azt jelzi, hogy a szubkután injekció hatásának intenzitása különbözik a ráöntött alkalmazástól. Az injekciós kezelés során alkalmazott nők súlya 55% -kal kisebb volt, mint a ráöntéskor kezelt nőké. Az injekciós kezelés során kapott tojástömeg átlagos tömege 71% -kal kisebb volt, mint a ráönthető készítménnyel kezelt borjak tojástömege.

A két doramektin-készítmény hatékonyságának összehasonlító farmakokinetikájára vonatkozó adatok hiányában nincs alap arra a következtetésre, hogy az injekcióval kezelt borjak szérumában a doramektin magasabb koncentrációja volt felelős ennek nagyobb hatékonyságáért. kezelés, de valószínű. A kezelések beadásának időzítése mindkét vizsgálatban a 18. napon történt, miután az első kullancsfertőzés a gazdákra került. A kezelés 2 nappal azelőtt történt, hogy bármely nőstény befejezte volna az emésztési folyamatot, és levált, és időt biztosított a hatóanyag felszívódására a borjak vérébe és nyirokába, valamint a gyógyszer befogadására az első elhatalmasodott nőstény kullancsok leválasztási végső folyamata során. Mindkét kezelés hasonló hatást gyakorolt azokra a kullancsokra, amelyek a kezelés idején a különböző parazita életszakaszokban voltak, mivel mind a ráöntéses, mind az injekciós kezeléseknél nem volt statisztikailag szignifikáns különbség a kullancsok IF vagy százalékos kontrollértékeiben, amelyek felnőttek, nimfák vagy lárvák voltak a kezelés napján.

A két kezelési módszer tartós hatékonysága jelentősen eltér. Az öntözött doramektinnel történő kezelés után 1 héttel borjakra helyezett lárvákból kifejlődött lerakódott nőstények IF kontrolljának mértéke nulla volt. A szubkután injekció tartós hatékonysága 100-82,1% (átlag, 93,7%) között volt azoknál az elzárkózott nőknél, akik három heti kezelés utáni lárvafertőzésből alakultak ki, és a negyedik kezelés utáni fertőzésnél még mindig 44% -on voltak. Tekintettel a doramektin magas akaricid aktivitásának szintjére, amelyet a 99% -nál nagyobb terápiás hatékonyság és az injekciós kezelés észlelhető tartós hatékonysága jelez, nyilvánvaló, hogy a kullancsok számára halálos kimenetelű gyógyszer koncentrációja a gazdaszervezet vérében viszonylag hosszú idő. Míg a doramektin kezdeti mennyisége felszívódik a véráramba, és elérhető a bőrön és a szőrön azoknak az állatoknak a bőrén és szőrén, amelyeket a ráöntött, kitágult daganatokkal kezelnek, akkor a dózis küszöbénél a dózis küszöbéhez szükséges a kullancsok többségének ellenőrzéséhez A kezelés időpontjában a gyógyszer mennyisége az 1 hét utáni kezelés utáni lárvafertőzés bekövetkezte előtti szint alá esett.

Köszönetnyilvánítás

A szerzők köszönetet mondanak L. D. Krskának, M. G. Mosesnek és H. Bazannak a technikai segítségért az e vizsgálatokhoz kapcsolódó kullancsadatok összegyűjtésében és táblázatos elkészítésében. A szerzők köszönetet mondanak A. Penának, H. Vasqueznek, K. Krskának és M. Eulernek is az ebben a tanulmányban használt borjak fenntartásában és gondozásában nyújtott segítségért.

Ez a cikk csak a kutatási eredményekről számol be. A szabadalmazott termék megemlítése nem jelenti az USDA jóváhagyását vagy ajánlását a használatára vonatkozóan.