A kurkumin védőhatása a kemoterápia okozta bélműködési zavarokra

Qinghua Yao

1 Onkológiai Tanszék, a Zhejiang Tradicionális Kínai Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Xiaozheng Ye

1 Onkológiai Tanszék, a Zhejiang Tradicionális Kínai Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Lu Wang

2 Hagyományos kínai orvoslás tanszék, Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Jianzhong Gu

1 Onkológiai Tanszék, a Zhejiang Tradicionális Kínai Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Ting Fu

2 Hagyományos kínai orvoslás tanszék, Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Yun Wang

2 Hagyományos kínai orvoslás tanszék, Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Yuebiao Lai

2 Hagyományos kínai orvoslás tanszék, Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Yuqi Wang

2 Hagyományos kínai orvoslás tanszék, Zhejiang Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Xian Wang

3 Orvosi Onkológiai Osztály, Klinikai Tudományok Intézete, Sir Runrun Shaw Kórház, Orvostudományi Kar, Zhejiang Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Hongchuan Jin

3 Orvosi Onkológiai Osztály, Klinikai Tudományok Intézete, Sir Runrun Shaw Kórház, Orvostudományi Kar, Zhejiang Egyetem, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Yong Guo

1 Onkológiai Tanszék, a Zhejiang Tradicionális Kínai Orvostudományi Egyetem első kapcsolt kórháza, Hangcsou, Zhejiang tartomány, Kína

Absztrakt

Bevezetés

A rákellenes kezelések fejlesztésének gyors előrehaladása ellenére a kemoterápia továbbra is az egyik legfontosabb megközelítés sok, ha nem az összes emberi rák kezelésében [1]. A kemoterápia a fő adjuváns terápia műtét után vagy előtt, valamint az előrehaladott rosszindulatú daganatok elsődleges terápiája. A mellékhatások jelentik a fő klinikai aggodalmat és a dózist korlátozó tényezőt, amely befolyásolja a kemoterápia klinikai hatékonyságát. Közülük a mieloszuppresszió és az emésztési zavarok a leggyakoribb mellékhatások, amelyek végül befolyásolják a további klinikai kezelést. A közelmúltban a mieloszuppresszió sikeresen megelőzhető vagy kezelhető olyan rekombináns myostimuláló faktorok előállításával, mint a GM-CSF (granulocita-makrofág kolóniastimuláló faktor) vagy a G-CSF (granulocita kolóniastimuláló faktor) és a magas hatékonyságú antibiotikumok megelőző alkalmazása. Az emésztési diszfunkció azonban továbbra is a fő kihívás az onkológusok számára a kemoterápiát végző rákos betegek kemoterápiájának hatékonyságának és életminőségének javításában [2].

Magas forgalmának köszönhetően a gyomor-bél traktus hámja kemoterápia okozta károsodásokra hajlamos, ami a bélnyálkahártya gát (IMB) tönkremeneteléhez és az azt követő klinikai megnyilvánulásokhoz vezet, mint enyhe láz, hányinger, hasmenés, hányás és étvágytalanság [3- 6]. Ezért olyan szerek vagy megközelítések, amelyek képesek fenntartani az IMB működését és strukturális integritását, megakadályozzák vagy enyhítik a kemoterápia okozta bélműködési zavarokat [7]. A közelmúltban a kemoterápia és a hagyományos kínai gyógyszerek (TCM) vagy a természetes termékek kombinációi a közelmúltban jelentek meg a rákterápia új módszereként, támaszkodva a TCM képességére, hogy kevés mellékhatással kiváltsa a sejthalált [8-10]. Ezenkívül a TCM-eknek érdekes farmakológiai hatásokkal és terápiás előnyökkel rendelkeznek a bélműködési zavarok kezelésében. A Curcuma Longa növény rizómáitól elkülönítve a kurkumin a gyömbér fő aktív összetevője, és számos biológiai hatással bírtak, mint például gyulladáscsökkentő, antioxidáns, szabad gyökök eltávolító és rákellenes [11,12]. Ebben a tanulmányban értékeltük a kurkumin védőhatását az 5-fluorouracil (5-FU) által indukált bélműködési zavarokra és IMB sérülésekre patkányokban.

Anyagok és metódusok

Reagensek

A kurkumint és az 5-fluorouracilt (5-FU) a Dawen Bio-Technology-tól (Hangzhou, Kína), illetve a Jinyao Bio-Technology-tól (Tianjin, Kína) vásárolták. Az ELISA vizsgálati készleteket a Huamei Bio-Technology-tól (Wuhan, Kína) vásároltuk. Az összes primert Huada Gene szintetizálta (Peking, Kína).

Állatok és kísérleti tervezés

Hatvan egészséges, körülbelül 200 g tömegű Wistar patkányt vásároltunk a Laboratóriumi Állatközpontból (Zhejiang Kínai Orvostudományi Egyetem, Hangzhou, Kína), és véletlenszerűen 3 csoportra osztottuk őket: kontrollcsoport, 5-FU és 5-FU + kurkumin csoport. A különböző csoportokba tartozó állatok kezelését az 1. ábra mutatja. A patkányok tömegét a kezelés előtt és után feljegyeztük. Vérmintákat vettünk a 2., 4. és 6. napon. Az állatkísérlet befejezése után szöveteket gyűjtöttünk.

okozta

A kísérlet megtervezése. Az 5-FU-t vagy a normál sóoldatot (N.S.) intraperitoneálisan (i.p.) adtuk az 1. naptól a 6. napig, a kurkumint (Cur.) Intragasztrikusan adtuk be (pl.).

ELISA (enzimhez kapcsolt immunszorbens vizsgálat)

Az endotoxin, a D-aminosav-oxidáz (DAO) és a D-laktát szérumszintjét ELISA-val mértük. Az összes vérmintát 3000 fordulat/perc sebességgel 10 percig centrifugáltuk, és a felülúszót -80 ° C-os hűtőszekrényben tároltuk. Az ELISA-t a gyártó protokollja szerint végeztük.

Szövetmorfológiai elemzés

Körülbelül 3 cm ileum mintákat kaptunk csak 3 cm-rel az ileoceacum felett. Az összes szövetet 10% semleges formalinban rögzítettük és paraffinba ágyazottuk, majd metszettük és hematoxilin-eozinnal festettük. A bélnyálkahártya hisztomorfológiai változásait fénymikroszkóppal értékeltük. Az ultrastrukturális morfológiai elemzéshez mindkét csoport három patkányából származó ileumtöredékeket 2,5% -os glutáraldehiddel rögzítettük és transzmissziós elektronmikroszkóppal vizsgáltuk.

Immunhisztokémiai festés

A Bax, Bcl-2 és Caspase-3 expresszióját immunhisztokémiai (IHC) festéssel határoztuk meg a korábban leírtak szerint [13]. Röviden, az antigén visszanyerését követően a metszeteket normál kecskeszérummal (Dako, Glostrup, Dánia) blokkoltuk, majd primer antitestekkel inkubáltuk egy éjszakán át 4 ° C-on. Az antigén-antitest komplex kimutatását kecske anti-nyúl szekunder antitest és a Streptavidin-HRP Systems kit (Dako) segítségével végeztük.

Eredmények

A kurkumin hatása az 5-FU-val kezelt patkányok viselkedési változásaira

A 3. napon (1. ábra) az 5-FU és az 5-FU + kurkumin csoportban lévő patkányok feleslegesek voltak, lassan mozogtak és folyékony székletet mutattak be nekik. Egy nappal a kurkumin kezelése után (4. nap) az 5-FU + kurkumin csoportba tartozó patkányoknál kevesebb volt a hasmenés, jobb volt a szellem és az étvágy, míg az 5-FU csoportban a patkányok nem változtak. A 6. napon az 5-FU csoport patkányai még mindig súlyos hasmenést mutattak, míg más csoportok patkányai egyáltalán nem voltak tünetek.

A kiindulási értéknél nem volt szignifikáns különbség a különböző csoportokból származó patkányok tömegében (az adatokat nem mutatjuk be). A 3. napon a kontroll, az 5-FU és az 5-FU + Cur csoportban a patkányok tömege 178,0 ± 2,6 g, 175,4 ± 6,4 g és 175,8 ± 3,5 g volt (2A. Ábra). Az 5-FU-val kezelt patkányok súlya szignifikánsan csökkent (kontroll vs 5-FU, p 0,05). A 6. napon a patkányok súlya három csoportban 180,3 ± 2,1 g, 165,2 ± 2,3 g és 173,0 ± 6,5 g volt (2B. Ábra). Az 5-FU csoportban a patkányok súlya még mindig szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a kontroll csoportban levő patkányok súlya (Kontroll vs 5-FU, p 0,05).