A különböző Artemisia fajokhoz hasonló allergia következménye az erősen keresztreaktív Art v 1-szerű molekulák következménye

A vizsgált Artemisia fajok elterjedése világszerte. A térképek a Globális Biodiverzitás Információs Eszköz hálózaton (http://data.gbif.org) keresztül elérhető eseményrekordokon alapulnak. Az A. californica és az A. tridentata elterjedésére vonatkozó adatok Észak-Amerikára korlátozódtak.

Az Artemisia spp. Fehérje összetétele és IgE reaktivitása pollenkivonatok. (a) A fehérjekivonatokat (8 ug/sáv) denaturáló gélelektroforézissel választottuk el; (b) Az ArtEmisia-kivonatokkal szembeni IgE-reaktivitást ELISA-ban értékelték mugwort pollenallergiás betegek szérumaival (n = 11). A dobozok az interkvartilis tartományokat jelzik, a medián egy folytonos vonal, a bajusz pedig az 5. és a 95. percentilis. A statisztikai elemzéshez Tukey post hoc tesztjét használó egyirányú ANOVA-t használtak. ABS, A. absinthium; ANN, A. annua; CAL, A. californica; FRI, A. frigida; LUD, A. ludoviciana; TRI, A. tridentata; VUL, A. vulgaris.

A tisztított természetes defenzin – prolin-kapcsolt fehérjék (DPLP) minőségének értékelése. A tisztított fehérjéket denaturáló gélelektroforézissel (balra) és immunblot-analízissel figyeltük monoklonális anti-Art v 1 antitest alkalmazásával [44] (jobbra).

A DPLP-k szekvencia igazítása. Az Art v 1.0101-től eltérő aminosavakat szürke dobozokban ábrázolják. A defenzin-szerű domén aláhúzott szekvenciái megfelelnek a tömegspektrometriával azonosított peptideknek. Az Art v 1.0101 szekvenciájában található maradékokat, amelyekről korábban más izoformákban különböztek [20], félkövéren, a T-sejtet és az IgE-kötő epitópokat zölden [26], illetve narancssárgával [22] jelöltük. A defenzin-szerű és a prolinban gazdag domén közötti átmeneti régiót szaggatott vonallal ábrázolják.

IgISA reaktivitás a tisztított allergének iránt ELISA-ban vizsgálva mugwort pollenallergiás betegek szérumait használva (n = 11). A medián folytonos vonalként jelenik meg, és a bajusz az interkvartilis tartományt képviseli. A statisztikai értékelést Friedman-teszt alkalmazásával, majd egy post hoc Dunn-féle többszörös összehasonlító teszttel végeztük.

Mediátor felszabadulási vizsgálat. Az anti-humán IgE nagy affinitású receptorral (RBL-2H3) transzfektált patkány bazofil leukémia (RBL) sejteket négy mugwort allergiás beteg szérumával (P1 - P4) érzékenyítettük. A sejteket növekvő koncentrációjú tisztított allergénekkel stimuláltuk, és a β-hexosaminidáz felszabadulását megmértük, és a Triton X-100 teljes felszabadulásának százalékában fejeztük ki.

Az Art v 125–36-specifikus TCR kereszt-reakcióba lép az APC-ken bemutatott tisztított DPLP fehérjékkel. A HLA-DR1 + mesterséges APC-ket 2 órán át tisztított DPLP-vel inkubáltuk, és az Art v 125–34 peptideket TCRtg Jurkat sejtekkel 6 órán keresztül együtt tenyésztettük, mielőtt a luciferáz aktivitást meghatároztuk. Az adatok két egymástól függetlenül végzett kísérlet reprezentatív tenyészeteinek átlagértékeit mutatják.

IgE keresztgátlás ImmunoCAP ISAC allergének ellen különböző Artemisia fajok alkalmazásával. Az egy ponton elérhető legmagasabb gátlási vizsgálatokat (SPHIA) mugwort pollenallergiás betegek szérumkészletének felhasználásával végezték.