Tojások kosárba helyezése, 1. lépés: Helyezze vissza a tojásokat - petesejt-felvétel (OPU) eljárás

Emlékezhet arra, hogy volt szerencsém elutazni Dél-Afrikába, hogy együtt edzőmmel, Dr. Morné de la Rey-vel egy petesejt-felvételnek (OPU) nevezett eljáráson edzjek. Nemrég a Rhino Rescue Center néhány nőstényénél elvégeztük ezt az eljárást Dr. de la Rey-vel, hogy kipróbálhassuk in vitro tenyésztési rendszerünket és remélhetőleg orrszarvú embriókat állíthassunk elő.

Nagyon sok tervezés folyik egy ilyen eljárás során. Első és legfontosabb az állat biztonsága. Ez az eljárás valóban érzéstelenítést igényel, amelyet állatorvosi szolgálataink nagyon szorosan figyelnek. De szeretnék egy kicsit beszélni az OPU eljárás technikai szempontjairól és arról, hogyan jutunk petesejtekhez (petesejtekhez) az embriók in vitro előállításához.

Miután az orrszarvú kényelmesen alszik, egy szondát helyeznek el, amely megkezdi a petesejtek gyűjtését. A szonda egy speciálisan tervezett berendezés, amely egy ultrahang-jelátalakítót (specifikusan mikrokonvex) és a tűket tartalmaz, amelyek kiterjednek a petesejtek „felszedésére”. Az ultrahang által létrehozott látómező igazodik a tű által megtett úthoz, ezért ezt az eljárást „ultrahangvezérelt”. Tudjuk, hogy a tű az ultrahang látómezején keresztül halad, ezért megtartja a olyan fontos a petefészek és a tüsző, amelyet szívni szeretnénk. Felidézheti korábbi bejegyzéseiből, hogy a tüsző a petefészkén található szerkezet, amely a petesejtet helyezi el. Tehát elméletileg az ultrahang minden látható tüszőjében van petesejt.

Ezután időt töltünk azzal, hogy a tüsző teljes tartalmát, és remélhetőleg a benne lévő ooctye-t visszanyerjük. Ehhez kettős lumen tűt használunk (alapvetően egy tűt a tűn belül). A külső tű egy öblítőközeg forrásához van csatlakoztatva, míg a belső tű egy gyűjtőedényhez, amely szintén egy negatív nyomást létrehozó szívóegységhez van csatlakoztatva. A külső tű a folyadékot a tüszőbe nyomja, a belső tű a folyadékot szívja ki. Amikor a tű egy tüszőben van, az aspirációs szivattyút bekapcsolják a folyadék kiszívására; egyidejűleg a folyadékot a tüszőbe tolják, turbulencia keletkezik. Ez a turbulencia remélhetőleg elmozdítja a petesejtet, és lehetővé teszi, hogy a többi folyadékkal kiszívja. A legmenőbb az, hogy mindez látható az ultrahang képernyőn. Miután a tüszőt kellően átöblítették és egy utolsó ideig leszívták, és nem hagy folyadékot a tüszőben, a tűt behúzzák és egy másik tüszőhöz igazítják, és a folyamatot megismételik.

Ez a folyamat annyi tüszőn fejeződik be, ahány biztonságosan hozzáférhető mindkét petefészken. Az összes kiszívott folyadék most a gyűjtőedényben van - remélhetőleg benne vannak a petesejtek is! Ennek a komplex eljárásnak számos szempontja van: először az állat biztonsága, de a petesejtek életképessége is. A tüszőbe öblített közeget, valamint a tüszőről eltávolított folyadékot tartó gyűjtőedényt felmelegítjük. A tüsző öblítéséhez használt táptalaj a petesejtek táplálására szolgál, a gyűjtőedény üveg, így a petesejtek nem tapadnak a falakhoz, és a nyomást, amellyel felszívjuk a folyadékot, gondosan beállítjuk, hogy a petesejtek ne sérüljenek, amikor a a gyűjtőedény.

Az eljárás befejezése után a gyűjtőedényt azonnal a laborba szállítják, ahol a folyadékban keresik a petéket, hogy tenyészthessék őket, és remélhetőleg embrióvá válhassanak megtermékenyítés után. Ez is lenyűgöző folyamat, és ezt meghagyom Carly Youngnak, hogy meséljen róla. Azt mondom, hogy az eljárás sikeres volt! A petesejteket kinyertük mind a négy állatból, amelyet felszívtunk - még az óriási 13-at is az RRC Livia nőstényektől!

Nagyon izgatottak vagyunk, amikor látjuk, hogy ez az eljárás biztonságosan visszanyeri a petesejteket ezektől a nőstényektől, és alig várjuk, hogy ez mit tehet lehetővé.

Az alábbi videó: Ez a videó a petefészek ultrahang képét mutatja az OPU eljárás során, ebben az esetben a ló. A nagy sötét karikák tüszők, mindegyik tartalmaz egy tojást. Mivel az ultrahang-jelátalakító és a tű egybe vannak állítva, amikor a tüszők az ultrahang „látómezőjében” helyezkednek el, a tűnek megjósolható útja van. Ebben a videóban a tüsző az ultrahang képernyő bal felső sarkában helyezkedik el. A tű ekkor bejut a bal felső sarokba és szúrja a tüszőt, a tüsző azonnal összeomlik, a tartalma felszívódik - és remélhetőleg a petesejt!

Megjegyzés: a videó tájolása helyes, az ultrahang egység az oldalán van, hogy elősegítse a tüsző és a tű vizuális beállítását.