A lótuszlevél forró vízkivonatának anti-elhízása és hipolipidémiás hatása taurin-kiegészítéssel magas zsírtartalmú étrenddel ellátott patkányokban

Huan Du

1 Élelmiszer- és táplálkozási tanszék, Inhaon Egyetem, Incheon, Korea

Jeong-Soon You

1 Élelmiszer- és táplálkozási tanszék, Inhaon Egyetem, Incheon, Korea

Xu Zhao

1 Élelmiszer- és táplálkozási tanszék, Inhaon Egyetem, Incheon, Korea

Ji-Yeon Park

1 Élelmiszer- és táplálkozási tanszék, Inhaon Egyetem, Incheon, Korea

Sung-Hoon Kim

2 Kémiai Tanszék, Konkuk Egyetem, Szöul, Korea

Kyung-Ja Chang

1 Élelmiszer- és táplálkozási tanszék, Inhaon Egyetem, Incheon, Korea

Kiegészítés

Konferencia

Társított adatok

Absztrakt

Háttér

A lótusz (Nelumbo nucifera) levelét elhízás kezelésére használták. Ennek a vizsgálatnak a célja a lótuszlevél forró vízkivonat taurin-kiegészítéssel történő elhízás és hipolipidémiás hatásainak vizsgálata magas zsírtartalmú étrend okozta elhízott patkányokban.

Mód

Négy hetes hím Sprague-Dawley patkányt véletlenszerűen négy csoportba osztottunk, mindegyik csoportban 8 patkánnyal, 6 héten keresztül (normál étrend, N csoport; magas zsírtartalmú étrend, HF csoport; magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró víz kivonat), HFL csoport; magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró víz kivonat + taurin, HFLT csoport). A lótuszlevél forró vizes kivonatot orálisan adtuk a HFL és HFLT csoportoknak, és ugyanannyi desztillált vizet adtunk orálisan (400 mg/kg/nap) az N és a HF csoportoknak. A taurint táplálékvízben történő feloldással (3% w/v) egészítették ki.

Eredmények

Az epididymális és a retroperitoneális zsírszövetek testtömeg-növekedése és relatív súlya szignifikánsan alacsonyabb volt az N, HFL és HFLT csoportokban a HF csoporthoz képest. A HFL és HFLT csoportok alacsonyabb koncentrációjú összkoleszterin-, triglicerid- és alacsony sűrűségű lipoprotein-koleszterint tartalmaznak a szérumban. A HFLT csoport nagyobb arányban mutatta a nagy sűrűségű lipoprotein koleszterin/összes koleszterin arányát a HFL csoporthoz képest. A HFLT csoport jobb vér lipidprofilokat mutatott a HFL csoporthoz képest.

Következtetések

A taurin-kiegészítésű lótuszlevél forró vizes kivonat elhízást és hipolipidémiás hatást mutatott a magas zsírtartalmú étrend okozta elhízott patkányokban, ami hatékonyabb volt, mint a lótuszlevél forró víz kivonata önmagában.

Háttér

Nemrégiben beszámoltak arról, hogy a magas zsírtartalmú étrend felelős az elhízás magas globális előfordulásáért [1,2]. Köztudott, hogy az elhízás számos krónikus betegséggel jár emberben és laboratóriumi állatokban is, például cukorbetegség, szív- és érrendszeri megbetegedések, emésztőrendszeri betegségek, légzőszervi megbetegedések és különféle rákos megbetegedések [3-5]. A magas zsírbevitel által kiváltott elhízás általában hiperlipidémiával jár [6], amely abnormálisan magas lipidkoncentrációként jelentkezik a vérben. Általában ez a kórosan magas lipidkoncentráció a vérben a vér összes koleszterinszintjének (TC) és/vagy trigliceridjének (TG) emelkedett szintjét jelenti [7]. Bár a hiperlipidémia önmagában nem okoz tüneteket, ezek a kórosan magas vérzsírszintek különféle szív- és érrendszeri betegségekhez (CVD), például érelmeszesedéshez és szívkoszorúér betegséghez (CHD) vezethetnek [8], amelyek együttesen a halál egyik leggyakoribb oka modern társadalom [9].

A szent lótusz néven ismert Nelumbo nucifera számos gyógyászati alkalmazást kínál a hagyományos kultúrákban. Korábbi tanulmányok azt mutatták, hogy különféle farmakológiailag aktív anyagokat különítettek el a lótusz különböző részeitől, elsősorban alkaloidokat, flavonoidokat, triterpenoidokat, polifenolokat, szteroidokat és glikozidokat [10]. A különböző részek közül a lótuszlevél koncentrációfüggő gátlást mutatott az α-amiláz és lipáz aktivitásában, és a szabályozott lipid anyagcserét [11]. A taurin (2-amino-etán-szulfonsav) a legtöbb emlős, köztük az ember szöveteiben is bővelkedik [12,13], és az elhízott egerekben csökkent a vér taurin-koncentrációja [14]. A taurinpótlás javíthatja a szérum lipidprofilokat patkányokban [15] és egerekben [16], és csökkentheti a szérum TG koncentrációját túlsúlyos vagy elhízott embereknél [17]. Ezenkívül mind a lótuszlevél, mind a taurin rendkívül biztonságos tulajdonságokkal rendelkezik, és elhízásmentesen funkcionális ételek alapanyagaként szolgálhatnak. Ezért ezt a kutatást a lótuszlevél forró vízkivonat és taurin kiegészítés antiobezitásának és hipolipidémiás hatásainak értékelésére végezték magas zsírtartalmú étrendet tápláló patkányokban.

Mód

Állatok és étrend

Három hetes hím Sprague-Dawley patkányokat a Hyundai-Bio-tól (Anseong, Korea) vásároltak. Valamennyi patkányt laboratóriumi állatoknál tartottuk az Inha Egyetemen, a Laboratóriumi állatok gondozására és felhasználására vonatkozó útmutató (Resources 1996) ajánlása alapján, állandó 12 órás világos és sötét ciklus mellett (AM 09:00

PM 09:00), szabályozott hőmérséklet (23 ± 1 ℃) és páratartalom (55 ± 10%). Egy hetes akklimatizálást követően, pelletizált kereskedelmi táplálékkal, a patkányokat véletlenszerűen négy csoportba osztották (n = 8) 6 héten keresztül (normál étrend, N csoport; magas zsírtartalmú étrend, HF csoport; magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró) vízkivonat, HFL csoport; magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró víz kivonat + taurin, HFLT csoport). A lótuszlevél forró vizes kivonatot orálisan adtuk HFL és HFLT csoportoknak, és ugyanannyi desztillált vizet adtunk orálisan az N és HF csoportoknak. A taurint tápvízben (3 tömeg/térfogat%) feloldva egészítettük ki. Az élelmiszer- és vízbevitelt mindennap, a testtömeget pedig kétnaponta mértük. A kísérleti étrend összetétele az AIN76 [18] alapján készült, amint azt az 1. táblázat 1. táblázata mutatja .

Asztal 1

Kísérleti étrendek összetétele (g/100g étrend)

ÖsszetevőkKísérleti étrendekNormál étrendNagy zsírtartalmú étrend

DL-Methione	0,3	0,3
Vitamin keverék	1	1
Ásványi keverék	3.5	3.5
Cellulóz	5.	5.
Szacharóz	50	40
Kukoricakeményítő	15	10.
Kazein	20	20
Babolaj	5.	5.
Disznózsír	0	15
Szénhidrát (kcal/100g)	260	200
Fehérje (kcal/100g)	85	85
Zsír (kcal/100g)	45	180
Összes kalória (kcal/100g)	390	465

Vitamin keverék (g/kg); tiamin-hidroklorid 600 mg, riboflavin 600 mg, piridoxin-hidroklorid 700 mg, nikotinsav 3 g, D-kalcium-pantotenát 1,6 g, folsav 200 mg, D-biotin 20 mg, cianokobalamin 1 mg retinil-palmitát előkeverék (250 000 NE/g) 1,6 g, DL-alfa tokoferol-acetát (250 NE/g) 20 g, kolekalciferol (400 000 NE/g) 250 mg, menakinon 5 mg szacharóz, finom porban 972,9 g, ásványi keverék (g/kg); kétgázalapú kalcium-foszfát 500 g, nátrium-klorid 74 g, kálium-citrát-monohidrát 220 g, kálium-szulfát 52 g, 24 g magnézium-oxid, mangán-karbonát (43)

Mn 48%) 3,5 g, vas-citrát (16

17% Fe) 6 g, cink-karbonát (70% ZnO) 1,6 g, réz-karbonát (53)

55% Cu) 0,3 g, kálium-jodát 0,01 g, nátrium-szelenit 0,01 g, króm-kálium-szulfát 0,55 g, szacharóz finoman porítva 118 g.

A lótuszlevél forró vizes kivonatának elkészítése

Szárított lótuszporport a Seonwon Temple-től (Ganghwa-gun, Incheon, Korea) vásároltak. A lótusz mintát vízzel extraháltuk 90 ° C-on 2,5 g/100 ml szilárd folyadék arány mellett 2 órán át. Vákuumszűrés után az extraktumot rotációs bepárlóba vezetjük (Büchi Laboratoriums Teknik, Svájc). A tömény folyadékot fagyasztva szárítóval szárítottuk (Ilshin, Korea). A barna port 18,8% -os extrakciós hozammal kaptuk, és -20 ° C-on tároltuk az alkalmazásig.

Mintavétel és kémiai elemzés

Hat hét elteltével az állatokat 12 órán át éheztettük az elejtés előtt. Vért vettünk a szívből, és szérumot kaptunk centrifugálással 3000 fordulat/perc sebességgel 20 percig. A májat, a vesét, a lépet, az epididymális zsírt (E-zsír) és a retroperitoneális zsírt (R-zsír) lemértük. Az E-zsír egy részét eltávolították a patkányokból szövettani fényképezés céljából. A szérumokat azonnal folyékony nitrogénben lefagyasztották, majd alkalmazásukig -70 ° C-on tárolták (Operon, Korea).

A szérum TG és az összes TC koncentrációit automatikus analizátorral (BPC BioSed srl, Olaszország) analizáltuk. Nagy sűrűségű lipoprotein-koleszterint (HDL-C) nyertünk az egész szérumból nagy sűrűségű lipoprotein kicsapási reagenssel (AM204-1, Asan Pharmaceutical, Korea) kis sűrűségű lipoprotein és nagyon alacsony sűrűségű lipoprotein 10 percig történő kicsapása után. 3000 fordulat/perc sebességnél (Hettich Mikro 200R, Tuttlingen, Németország) [19], majd HDL-C-tartalmat elemeztünk ugyanazon módszerrel, mint a TC-vel. Ezenkívül kiszámítottuk a HDL-C/TC arányát. A szérum alacsony sűrűségű lipoprotein-koleszterin (LDL-C) értékét a Friedewald-képlet [20] alkalmazásával az alábbiak szerint számoltuk:

LDL-C = TC- (HDL-C + TG/5)

Minden paraméter elemzése előtt standard szérumot (tételszám: 053801, Asan Pharmaceutical, Korea) használtunk a kalibráláshoz. Az összes eredményt mg/dl szérumban fejeztük ki.

A zsírszövet szövettani fényképét paraffin módszer alapján elemeztük fénymikroszkóppal. A friss szöveteket azonnal rögzítettük Bouin oldatában 6-12 órán át, majd a rögzített szöveteket folyó víz alatt mostuk. Miután a szöveteket különböző fokú alkoholon keresztül dehidrálták, a szöveteket 60 ° C-on paraffin blokkba ágyazták. Nyolc um-os metszeteket vágtunk és tojásalbuminnal bevont üveglemezekre szereltünk, majd a paraffint xilollal és alkohollal eltávolítottuk. Az üveglemezeket hematoxilinnal és eozinnal festettük. Miután dehidratálták és alkohollal és xilollal tisztították, az üveglemezeket a kanadai balzsamba helyezték. A fényképfelvételeket Zeiss Axiolab fénymikroszkóppal készítettük, amely Nikon Microflex HFX mikroszkóp kamerával volt felszerelve. Az epdidymális adipocita méretét az Image-Pro Plus 6.0 (Media Cybernetics, Maryland, USA) számította ki, és az eredményeket pixelenként adtuk epdidymális adipocytánként.

Statisztikai analízis

Az adatokat szignifikáns különbség szempontjából elemeztük egyirányú varianciaanalízissel, amelyet Duncan több tartományú tesztje követett p-nél (1. ábra). 1). Az N- és HF-csoportok élelmiszer-bevitele magasabb volt a HFL és HFLT csoportokhoz képest. Az N-csoport élelmiszer-hatékonysági aránya (FER) szignifikánsan alacsonyabb volt a többi csoporthoz képest (2. táblázat). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a lótuszlevél forró vizes kivonata és a taurin megakadályozhatja a magas zsírtartalmú étrend által kiváltott testsúlynövekedést; úgy tűnt, hogy az alacsony testtömeg a HFL és HFLT csoportokban részben az étvágycsökkenés miatt. Annak érdekében, hogy megértsük az étvágy változását a lótuszlevél forró vízkivonatának és a taurin bevitelével, további kutatásokat fogunk végezni.

FER: Élelmiszer-hatékonysági arány (FER (%) = [teljes testtömeg-növekedés (g)/teljes táplálék-bevitel (g)] × 100%); Az értékek átlag ± SE; Az oszlopon belül különféle szubindexekkel rendelkező értékek p-nél szignifikánsan eltérnek (2. ábra). 2). Az epdidymális adipociták mérete szignifikánsan nagyobb volt a HF csoportban a többi csoporthoz képest, és a HFL és HFLT csoportok hasonló adipocita méretet mutattak, mint az N csoport (3. ábra). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a lótuszlevél forró vizes kivonata önmagában vagy taurin-kiegészítéssel gátolhatja a lipidfelhalmozódást az epididymális adiypocyta szövetekben.

A taurinnal ellátott lótuszlevél forró vízkivonat hatása az epididymális zsírsejtekre Szövettani fénykép: Az epididymális zsírsejtek szövettani fényképét normál patkányok étrendjével vagy magas zsírtartalmú patkányok étrendjével táplálják önmagában a lótuszlevél forró víz kivonatának vagy a lótusz levél forró vizes kivonatának kiegészítésével taurinnal. Nagyítás × 200. Morfológiai változás mutatkozott a HF csoportban más csoportokhoz képest. N, normál étrend csoport; HF, magas zsírtartalmú étrendcsoport; HFL, magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró víz kivonat csoport; HFLT, magas zsírtartalmú étrend + lótuszlevél forró víz kivonat + taurin csoport.

A taurinnal ellátott lótuszlevél forró vízkivonat hatása az epididymális zsírsejtekre Az epididymális adipociták méretei: A lótuszlevél forró vizes kivonatának és taurin kiegészítésének hatása az epididymális adipocyták méretére normál étrenddel vagy magas zsírtartalmú étrenddel ellátott patkányokban. Számítás sztochasztikus 10 sejt segítségével Image-Pro Plus 6.0 alkalmazással. Az adatokat átlag ± SE-ként adtuk meg. A különböző szubindexekkel rendelkező értékek p-nél (44K, PDF) jelentősen eltérnek

Köszönetnyilvánítás

Ez a cikk a Journal of Biomedical Science 17. kötet 2010. évi 1. mellékletének részeként jelent meg: A taurin 17. nemzetközi találkozójának közleményei. A kiegészítés teljes tartalma online elérhető a http://www.jbiomedsci.com/supplements/17/S1 címen.

Köszönetet mondunk a Dong-A Gyógyszergyárnak, amely taurint adományozott.