Izoszalipurposid meghatározása az örök törpe nyersanyagaiban és gyógyszereiben (Helichrysum Arenarium)

Nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC) alkalmaztunk a törpe örökkévaló (Helichrysum arenarium (L.) Moench.) Virágok. HPLC analízissel dolgoztunk ki egy módszert a törpe örök virágok és a „Flamin” gyógyszer izozalipurposid tartalmának meghatározására. A törpe örök virágok izosalipurposid tartalma 1,56% és 1,78% között változott; a „Flamin tabletták” tartalma 10,35 és 11,05 mg/tabletta között mozgott.

A flavonoidokat tartalmazó gyógynövények farmakológiai hatásainak széles spektrumával rendelkeznek, és egyedülálló kolagóg, májvédő, szorongásoldó, angioprotektív és gyulladáscsökkentő gyógyszerek forrását jelentik [1-7]. A kolagóg és hepatoprotektív szerek egyik lehetséges forrását az örök törpe virágai biztosítják - Helichrysum arenarium (L.) Moench. [2 - 4, 7, 8].

örök

A törpe örök virágokat és az ezeken alapuló gyógyszereket (infúziókat, a folyékony készítményt „Flamin”, kolagóg készítményeket) az orvostudományban kolagóg gyógyszerként használják [2 - 4, 8, 9], bár a kémiai összetétel tekintetében ellentmondásos eredmények születtek. A közzétett adatok azt mutatják, hogy a törpe örök virágokban domináns flavonoidok a kalkon izosalipurposid, valamint a flavanones szalipurposide, prunin és naringenin [2 - 4, 7, 8], bár nincs egyetértett vélemény arról, hogy ezek közül melyik komponens domináns. Az örök törpe egy sor más anyagot is tartalmaz, beleértve kumarolokat, fahéjsavakat, ftalidokat, poliszacharidokat és másokat [2 - 4, 8].

Véleményünk szerint a törpe örök virágok kémiai összetételének összetettsége felelős azért, hogy a „törpe örök virágok” gyógynövényanyag (MPM) analitikai módszerei nem felelnek meg a farmakognozia és a farmakopeia elemzésének jelenlegi követelményeinek. Így ennek az anyagnak a gyógyszerkönyvi monográfiája [10] csak egy kvalitatív reakciót határoz meg a flavonoidokra vonatkozóan az örök törpe elemzéséhez, és ez nem teszi lehetővé az e növényre jellemző egyes komponensek azonosítását. Eredményeink továbbá azt mutatják, hogy a farmakopéjaiás módszer [10] olyan eredményeket ad a flavonoid tartalomra, amelyeket a 2 - 3 tényezők megemelnek [11]. Korábban kifejlesztettünk egy módszert a teljes flavonoidok meghatározására differenciál spektrofotometriával, az izozalipurposid állapot referencia mintájának (SRS) felhasználásával [11]. Figyelembe véve azt a tényt, hogy a törpe örök virágok az izosalipurposid SRS forrása, az izoszalipurposid vizsgálati módszerének kidolgozása ebben az anyagban releváns.

Jelen munka célja egy eljárás kidolgozása az izoszalipurposid meghatározására törpe örök virágokban és a „Flamin tabletták” gyógyszer HPLC alkalmazásával.

Kísérleti szakasz

Megvizsgálták az Orosz Föderáció különböző régióiban gyűjtött törpe örök virágokat, az OAO Krasnogorskleksredstva (Moszkvai régió) és az OOO PKF Fitofarm (Anapa, Krasznodari körzet) ipari mintáival, valamint a „Flamin tabletták” (AO Galichfarm, Lvov) gyógyszer mintáival együtt. . A törpe örök MPM fitokémiai vizsgálatait spektrális és fizikai-kémiai analízissel végeztük, beleértve a spektrofotometriát és a HPLC-t.

A törpe örök virágokban az izosalipurposid vizsgálati módszerének kidolgozása magában foglalta a nyersanyagok vizes-etanolos kivonatainak és az izosalipurposide oldatainak UV-spektrumának meghatározását (1), szalipurposid (2), 5,7-dihidroxi -ftalid (3) és az 5-metoxi-7-hidroxi -ftalid (4) törpe örök virágokból kivont. A spektrumokat Specord 40 spektrofotométerrel (Analytik Jena) rögzítettük.

A vizsgálati módszer a következő optimális paramétereken alapult: a nyersanyag extrakciója 70% etil-alkohollal 1 órán át 1:50 arányú forrás mellett [11].

A HPLC elemzést Milikhrom-5 kromatográf alkalmazásával, a következő fordított fázisú kromatográfiai körülmények között, izokratikus rendszerben végeztük: KAX oszlop (2 mm × 80 mm), állófázisú Diasorb C-16, eluens rendszer, amely acetonitril: víz arányban állt 25: 7 arányban 1% jégecettel kiegészítve, eluálási sebesség 100 μm/perc, injektált minta térfogata 5 μl. Az anyagokat öt hullámhosszon detektáltuk: 254, 270, 290, 330 és 360 nm. A hullámhosszakat azon az alapon választottuk, hogy a vizsgálati vegyületek abszorpciós csúcsa 372 nm-nél (izosalipurposid), 284 nm-nél (szalipurposide), 256 és 292 nm-nél (5,7-dihidroxi -ftalid, 5-metoxi-7-hidroxi -ftalid) és 330 nm-nél ( hidroxi-fahéjsav). A csúcsok jelölésének alap- és analitikai hullámhossza 360 nm volt, mivel a célanalízis izosalipurposid volt, amelynek abszorpciós csúcsa 372 nm-en volt.

A törpe örök virágokból (1–5. Csúcs) kinyert anyagok relatív csúcstartási idejének összehasonlítása a HPLC kromatogramokon (1. ábra) és a „Flamin tabletta” gyógyszer (2. ábra) oldatainak az egyes anyag retenciós idejével csúcsok (3-6. ábra, 1. táblázat) négy vegyület (1–4) azonosítását tették lehetővé, amelyek között a domináns vegyület az izosalipurposid (1).

A törpe örök kivonat HPLC-kromatogramja (az anyag csúcsszáma megfelel az 1. táblázatban megadottaknak).