Nem bejelentett furoszemid az étrend-kiegészítőkben

Kutatási cikk - Biomedical Research (2019) 30. évfolyam, 5. szám

Nem bejelentett furoszemid az étrend-kiegészítőkben.

Farmakognóziai és Gyógyszerkémiai Tanszék, Gyógyszerésztudományi Kar, Plovdivi Orvostudományi Egyetem, Plovdiv, Bulgária

* Levelező szerző: Stanislava Ivanova
Farmakognóziai és Gyógyszerkémiai Tanszék
Plovdivi Orvostudományi Egyetem
Plovdiv
Bulgária

Elfogadott dátum: 2019. július 23

További kapcsolódó cikkekért látogasson el ide: Orvosbiológiai kutatás

Absztrakt

A legújabb tanulmányok azt állítják, hogy az étrend-kiegészítők tartalmazhatnak farmakológiailag aktív összetevőket vagy be nem jelentett gyógyszeres anyagokat, amelyek potenciálisan egészségügyi kockázatot jelentenek. Leggyakrabban ezek a termékek anabolikus szteroidokkal, efedrinnel, szibutraminnal, vízhajtókkal és másokkal szennyezettek. A szennyezett étrend-kiegészítők súlyos egészségügyi következményekkel járhatnak (az anyagok farmakológiai hatása, mellékhatások, gyógyszerkölcsönhatások és még sokan mások) vagy más negatív következményekkel járhatnak, mint például a doppingteszt sikertelensége (hivatásos sportolók számára). Végeztük a furoszemid HPLC szűrését. A méréseket 228 nm-en végeztük 0,8 ml/perc áramlási sebességgel. A mozgófázist metanol és víz alkotta 80: 20 (v/v) arányban. A mobil fázis pH-ját foszforsavval 3,3-ra állítottuk be. Kromatográfiás oszlop - Microsorb-MV 100-5 C18 150 × 4,6 mm. A „prosztata egészség” kategóriában 30 étrend-kiegészítőt elemeztünk. A minták 10% -ában találtunk be nem jelentett furoszemidet.

Kulcsszavak

Étrend-kiegészítők, Étrend-kiegészítők, HPLC furoszemid, Nem bejelentett anyagok, Dopping.

Bevezetés

Ugyanakkor az étrend-kiegészítők fogyasztása gyorsan növekszik: a fogyasztók javítani vagy fenntartani akarják a fiziológiai vagy metabolikus funkciókat. A fogyasztók elvárásai a betegség/állapot megelőzésétől a betegség/állapot kezeléséig, sőt a gyógyításig terjednek [3]. A világszerte alkalmazott étrend-kiegészítők nem állíthatják, hogy bármilyen betegséget diagnosztizálnak, kezelnek, gyógyítanak vagy megelőznek [2], mivel azok olyan termékekre vonatkoznak, amelyek kompenzálni kívánják azokat a tápanyagokat, amelyek egyébként nem lehetnek eléggé jelen az étrendben [3]. A 443 weboldal nemrégiben végzett kutatása azonban riasztó eredményeket mutatott: az étrend-kiegészítők 81% -a állított egészségre. 55% állította, hogy a specifikus betegségekkel kezelt, megelőzött, diagnosztizált vagy gyógyított termék volt [2]. Az ilyen termékek félrevezethetik a fogyasztókat, és súlyos egészségügyi következményekhez vezethetnek: nem megfelelő öngyógyulás, az egészségi állapot alábecsülése és mások.

A kötelező analitikai ellenőrzés és a liberális szabályozás hiánya miatt a világ legtöbb részén a legújabb tanulmányok azt állítják, hogy az étrend-kiegészítők gyakran tartalmaznak farmako-aktív összetevőket vagy be nem jelentett gyógyszereket, amelyek potenciálisan egészségügyi kockázatot jelentenek [4-18]. Az étrend-kiegészítőket leggyakrabban anabolikus szteroidokkal, efedrinnel, szibutraminnal, vízhajtókkal és másokkal szennyezik. A szennyezés véletlenül (a rossz gyártási gyakorlat miatt) vagy szándékosan fordulhat elő [2]. A szennyezett étrend-kiegészítők súlyos egészségügyi következményekkel járhatnak (az anyagok farmakológiai hatása, mellékhatások, gyógyszerkölcsönhatások és még sokan mások) vagy más negatív következményekkel járhatnak, mint például a doppingteszt sikertelensége (hivatásos sportolók számára). Az amerikai sürgősségi helyiségekből származó adatok elemzése tízéves időszakra 23 000 látogatást becsült az étrend-kiegészítők bevétele utáni káros hatások miatt. Ezen emberek közül 2156 került kórházba [2].

A legtöbb esetben a termékek a következő kategóriákba tartoznak: étrend-kiegészítők: fogyás, étrend-kiegészítők és izomépítő étrend-kiegészítők. Ebben a tanulmányban úgy döntünk, hogy elemezzük az étrend-kiegészítők egy másik kategóriáját - a prosztata egészségét. Elemzési sorozatokat hajtottunk végre a furoszemid szűrésére.

Az első hatvan évvel ezelőtti vízhajtók felfedezése továbbra is a mérföldkő a terápiás fejlődésben. A furoszemid (4-klór-2 - [(furán-2-il-metil) amino] -5-szulfamoil-benzoesav) egy hurok-diuretikum, amelyet 1959-ben szabadalmaztattak. Orvosi felhasználásra 1964-ben hagyták jóvá. Furoszemid (1.ábra) a pangásos szívelégtelenség és az ödéma kezelésére alkalmazzák [19]. Az orálisan beadott furoszemid vizelethajtó hatása általában 30 perccel a bevitel után jelentkezik [19]. A furoszemid intravénásan is beadható 40-80 mg/nap dózisban. Manapság a klinikai gyakorlatban az egyik legszélesebb körben alkalmazott vizelethajtó. A doppingellenes világügynökség a furoszemidet doppingnak tekinti, mivel annak bevitele elfedheti más doppinganyagok bevitelét. A furoszemid anyaga olcsó. Az Egyesült Államokban a furoszemidet tartalmazó generikus gyógyszerek napi körülbelül 0,15 USD-ba kerülnek Bulgáriában (az Európai Unióban), a furoszemidet tartalmazó orális generikus gyógyszerek körülbelül 0,035 euróba kerülnek naponta. Az anyag ára és hatása az étrend-kiegészítők hamisításának lehetséges oka lehet [16,17].

1.ábra: A furoszemid szerkezete.

Nagy klinikai jelentősége miatt számos analitikai eljárást fejlesztettek ki a furoszemid kimutatására gyógyszerészeti termékekben és biológiai mintákban [20-26].

Anyagok és metódusok

Anyagok

Referencia szabvány: Furoszemid (Sigma-Aldrich).

Reagensek: Metanol HPLC-hez (Sigma-Aldrich); Foszforsav- (Sigma-Aldrich); Deionizált víz.

Minták: 30 étrend-kiegészítő, amelyek jótékony hatással vannak a prosztata egészségére. A mintákat étrend-kiegészítő üzletekből, gyógyszertárakból és az internetről vásárolták.

Mód

Hangszerelés: Varian Pro Star HPLC rendszer, UV detektor, kromatográfiás oszlop - Microsorb-MV 100-5 C18 150 × 4,6 mm, Hamilton fecskendők kézi HPLC befecskendező nyílásokhoz (25 mcl).

Kromatográfiai feltételek: A mozgófázis 80: 20 (v/v) arányban metanolból és vízből áll. A pH-3,3 foszforsavval beállítva (Sigma-Aldrich).

Elúció: Izokratikus elúció. A méréseket 228 nm-en végeztük 0,8 ml/perc áramlási sebességgel. 20 mikroliter injekciós térfogattal.

Standard oldat és tesztoldatok elkészítése: A törzsoldatokat metanol-víz (v/v 7: 3) elegyben készítettük, különböző koncentrációkban. A standard oldatot és a tesztoldatokat 70% metanolt és 30% vizet tartalmazó oldószerrel hígítva készítettük.

Eredmények és vita

A módszer validálása

A módszert az ICH irányelvek szerint validálták [27]. A szűréshez Varian Pro Star HPLC rendszert használtunk: kromatográfiás oszlop - Microsorb-MV 100-5 C18 150 × 4,6 mm és UV detektor. A detektort 228 nm-en állítottuk be. Készítettünk egy mobil fázist, amely metanolból és vízből áll 80: 20 (v/v) arányban. A mozgófázis pH-ját 3,3-ra állítottuk foszforsav (Sigma-Aldrich) hozzáadásával.

Furoszemid standard oldata: 5,0 mg referenciaanyag furoszemidet (Sigma Aldrich) lemérünk egy mérőlombikba (10 ml). Az anyagot 10 ml (70% metanol/30% víz) oldatban oldjuk. A törzsoldat koncentrációja - 500 μg/ml. A furoszemid munkaoldatokat a törzsoldat hígításával állítottuk elő. Megállapítottuk a furoszemid standard retenciós idejét - 2,19 perc. 2. ábra a furoszemid standard oldatának kromatogramja.

2. ábra: A furoszemid standard standard oldatainak kromatográfiái különböző koncentrációban.

Linearitás: Egy tipikus kalibrációs görbe (3. ábra) furoszemid csúcsterületét 250 μg/ml - 1,5 μg/ml koncentrációtartományban a következő lineáris regressziós vonallal kaptuk: Y = 125904x + 366243 (R2 = 0,9865).

3. ábra: Kalibrációs görbe.

Kimutatási határ:

Ahol: σ = a válasz szórása; S = a kalibrációs görbe meredeksége; DL = kimutatási határ.

Az S meredekséget az analit kalibrációs görbéjéből becsültük.

Megállapítottuk a DL = 0,031 mkg/ml értéket

Pontosság: Kiértékeltük a napon belüli pontosságot (megismételhetőség) és a napközi pontosságot (köztes pontosság). A relatív szórásértékek minden esetben kisebbek voltak, mint 1,4% az ismételhetőség és a köztes pontosság szempontjából. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a módszer megfelelő pontossággal rendelkezik a furoszemid meghatározásában.

Pontosság: A pontosságot három különböző 50, 75 és 100% -os koncentrációjú minták elemzésének megismétlésével értékeltük. Minden koncentrációs szinthez három tesztet készítettünk. Átlagos gyógyulás: 98,46 ± 0,14%. Az eredmények azt mutatják, hogy a módszer pontos.

Robusztus: Értékeltük a pH változásának hatását a mozgófázisban és annak összetételét (metanol/víz aránya). Megállapítottuk, hogy a mobil fázis pH-ja 3,2 és 3,5 között változhat, jelentéktelen hatással a csúcsfelületekre, a csúcs aszimmetriájára és a retenciós időre. Megállapítottuk, hogy a metanol/víz aránya a mozgófázisban +/- 1% között változhat, jelentéktelen hatásokkal a csúcsterületekre, a csúcs aszimmetriára és a retenciós időre. Minden kísérletet ismétlésben hajtottunk végre (n = 6).

A módszer alkalmazása az étrend-kiegészítők elemzésében

4. ábra: Az N14 minta kromatogramja.

5. ábra: Az N 18 minta kromatogramja.

6. ábra: Az N 26 minta kromatogramja.

A be nem jelentett furoszemid 9 és 35, 5 mg/kapszula között változott. Az összes szennyezett étrend-kiegészítőt felcímkézték: 1 kapszula naponta kétszer. A be nem jelentett furoszemid bevitele ezekben az adagokban mindenképpen a páciens diurézisének jelentős növekedéséhez vezet. Néhány fogyasztó számára ez pozitív hatással járhat. Egy másik hatás a vérnyomás jelentős csökkenése lenne, amely egyes fogyasztók számára nagyon veszélyes lehet. A furoszemid bevitele számos mellékhatással jár. A furoszemidbevitel gyakori mellékhatásai a következők: hipokalaemia, hypomagnesaemia, szájszárazság, fejfájás és mások. A furoszemid ismerete nélküli bevitel számos veszélyes gyógyszerkölcsönhatáshoz is vezethet. A be nem jelentett furoszemid bevitelének másik nagy kockázata a pozitív doppingteszt. Ha egy profi sportoló furoszemiddel szennyezett étrend-kiegészítőt használ, pozitív doppingmintát adna. A furoszemidet doppingszernek tekintik. A diuretikumok és a maszkírozók kategóriájába tartozik. A be nem jelentett furoszemid jelenléte az étrend-kiegészítőkben rendkívül veszélyes.

Következtetés

Az étrend-kiegészítők használata az egész világon folyamatosan növekszik. Ez a tény néhány fontos aggályt vet fel a biztonságossággal és a hatékonysággal kapcsolatban. Sok kutató azt állítja, hogy egyes étrend-kiegészítők tartalmazhatnak farmakológiailag aktív összetevőket vagy be nem jelentett gyógyszeres anyagokat, amelyek potenciális egészségügyi kockázatot jelentenek. 30 különböző étrend-kiegészítő HPLC elemzését végeztük a „prosztata egészség” kategóriában. A jelenlegi HPLC módszer kielégítő eredményeket nyújt alacsony detektálási szinttel, jó pontossággal és robusztussággal. A módszer alkalmazása pontos eredmények mellett lehetővé tette a furoszemid meghatározását. A minták 10% -ában találtunk be nem jelentett furoszemidet. Az étrend-kiegészítőkben továbbra is gyenge gyártási folyamatok, vagy szándékos szennyeződés gyógyszerekkel vagy más farmakológiai hatóanyagokkal fordul elő. A szennyezett étrend-kiegészítő bevitele nagyon súlyos egészségügyi következményekkel járhat.