Orvosbiológiai
Jelentések

  • Journal Home
  • Jelenlegi probléma
  • Közelgő kérdés
  • Legolvasottabb
  • Legtöbbször idézett (dimenziók)
    • Az elmúlt két év
    • Teljes
  • Legtöbbször idézett (CrossRef)
    • Az elmúlt év 0
    • Teljes
  • Közösségi média
    • Múlt hónap
    • Múlt év
    • Teljes
  • Archívum
  • Információ
  • Online benyújtás
  • Információ a szerzőknek
  • Nyelv szerkesztése
  • Információ a bírálók számára
  • Szerkesztési irányelvek
  • Szerkesztőbizottság
  • Célok és hatály
  • Kivonatolás és indexelés
  • Bibliográfiai információk
  • Információ a könyvtárosoknak
  • Információ a hirdetők számára
  • Újranyomtatások és engedélyek
  • Lépjen kapcsolatba a szerkesztővel
  • Általános információ
  • A Spandidosról
  • Konferenciák
  • Munkalehetőségek
  • Kapcsolatba lépni
  • Felhasználási feltételek
  • Szerzői:
    • Hidetomo Kikuchi
    • Satomi Kogure
    • Rie Arai
    • Kouki Saino
    • Atsuko Ohkubo
    • Tadashi Tsuda
    • Katsuyoshi Sunaga

  • Ezt a cikket a következők említik:

    Absztrakt

    Bevezetés

    Bizonyos típusú élelmiszerek jótékony hatással vannak az emberi egészségre; a hatásokat azonban nem magyarázzák a tápanyagtartalom, például a makrotápanyagok, a vitaminok és az ásványi anyagok (1). Az ilyen típusú, funkcionális élelmiszereknek nevezett élelmiszerek olyan élelmiszer-eredetű termékek, amelyek fokozzák a normál fiziológiai vagy kognitív funkciókat, vagy megakadályozzák a betegség alapjául szolgáló rendellenes funkciókat (1). Ezek az ételtípusok hozzájárulnak az öngyógyítás, vagyis a vény nélkül kapható gyógyszerek, köztük a gyógynövényes és a hagyományos termékek használatához is az ön által felismert betegségek vagy tünetek kezelésére (1,2). Különösen érdekes a természetes termékek biológiai aktivitása és biztonságossága, beleértve az ételeket, a hagyományos gyógynövényeket, a kampót és azok fitokemikumait (3–13).

    csipkebogyó

    A csipkebogyó a Rosa nemzetségbe tartozó rózsanövények, különösen a Rosa canina L. gyümölcse, más néven kutyarózsa. A csipkebogyó különösen magas C-vitamin-tartalommal rendelkezik más gyümölcsökhöz és zöldségekhez képest (14,15), és egyéb vitaminokat, ásványi anyagokat, cukrokat, zsírsavakat és flavonoidokat tartalmaz (14). A csipkebogyót hagyományosan nátha, fertőző betegségek és gyulladásos betegségek kezelésére adták (16). Hagyományos felhasználásának alátámasztására különféle tanulmányok arról számoltak be, hogy a csipkebogyó bioaktivitást mutat, ideértve az antioxidánsokat (17,18), a gyulladáscsökkentőket (19–22), a hepatoprotektíveket (23), a cukorbetegségeket (17) és az elhízást (24). ) hatások. Ezért a csipkebogyó funkcionális tápláléknak tekinthető, amely elősegíti az egészséget. Noha a csipkebogyót hagyományosan húgysav (urát) anyagcserezavarok kezelésére adták (16), hatásait nem részletezték részletesen.

    Emberekben az urát a purin anyagcseréjének végterméke, amelyet a májban lévő xantin-oxidáz (XO) kettős enzimkatalízist követően a hipoxantin szállít (25). A szérum uráttermelést a májba szállított endogén (de novo purinszintézis és szöveti katabolizmus normális körülmények között) és exogén (étrend, beleértve az állati fehérjét is) prekurzor fehérjék szabályozzák; mivel annak kiválasztását a vesék a veseplazma áramlásával, a glomeruláris szűréssel és a proximális tubuluscserével szabályozzák (26,27). Termelésének és kiválasztásának kiegyensúlyozatlansága hiperurikémiát vált ki, amely köszvénygé és vesekővé is fejlődik, és felgyorsítja a vese- és szív- és érrendszeri betegségek progresszióját (28,29). A kálium-oxonáttal (PO) kezelt egerek általában az urát túltermelés (hiperurikémia) modelljét szolgálják, mivel intraperitoneális injekciója az urát túltermelését indukálja egerekben (30–33). Valójában egy korábbi, PO-val kezelt ABCG2-knockout egerek alkalmazásával végzett tanulmány arról számolt be, hogy a vesén kívüli urátkiválasztás csökkenése a hiperurikémia egyik leggyakoribb oka (33).

    Számos tanulmány kimutatta, hogy a gyógyszer-metabolizáló enzimeket, például a citokróm P450 (CYP) gátló ételek vagy italok egyidejű alkalmazása, valamint az említett enzim által metabolizált gyógyszer megváltoztatja a vér koncentrációját, bár alkalmanként káros hatásokkal jár (34). Ehhez az élelmiszer-gyógyszer kölcsönhatáshoz hasonló jelenség keletkezhet az élelmiszerek és a kábítószerek között. Valójában korábban bebizonyosodott, hogy az italok és az ételek, például a sör, a vörösbor, a fekete és a gyógyteák, a fokhagyma, a fűszerek, a buzogány, a szerecsendió, a gyümölcs- és gyümölcslé, a paradicsomlé és az édesgyökér gátolták az enzim által közvetített gyógyszer-anyagcserét ( 9,10,35–39). Noha a csipkebogyót táplálékként és hagyományos gyógyszerként használták (16), legjobb tudásunk szerint nincs bizonyíték a csipkebogyó és a CYP3A4-metabolizáló gyógyszerek közötti kölcsönhatásra.

    Jelen tanulmányban a csipkebogyó forró víz-, etanol- és etil-acetát-kivonatok XO-aktivitásra gyakorolt ​​hatásait vizsgálták in vitro vizsgálattal. Ezenkívül a csipkebogyó forró víz kivonat urát anyagcserére gyakorolt ​​hatását értékeltük a hiperurikémia modell egerek szérum urát szintje alapján. Továbbá megvizsgálták, hogy a csipkebogyó forró vízkivonat gátolja-e a CYP3A4 aktivitását in vitro.

    Anyagok és metódusok

    Anyagok

    Eltérő rendelkezés hiányában a különféle reagenseket és az Urate C-teszt Wako készletet a Wako Pure Chemical Industries, Ltd.-től (Oszaka, Japán) vásároltuk. A csipkebogyót a Tree of Life Co.-tól (Tokió, Japán) szerezték be. A xantin-oxidázt (íróból), a nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát-oxidált formát (β-NADP +), a glükóz-6-foszfátot (G-6-P) és a G-6-P-dehidrogenázt (G-6-PDH) Oriental Yeast, Ltd. (Tokió, Japán). A dimetil-szulfoxidot (DMSO) és a 11a-hidroxi-progeszteront a Sigma-Aldrich-től (Merck KGaA, Darmstadt, Németország) szereztük be. Humán CYP3A4R baktoszómákat (rekombináns CYP3A4) a Cypex Ltd.-től (Skócia, Egyesült Királyság) vásároltunk. A Mightysil RP-18 GP 250-4,6 (5 µm) [oktadecilszilil (ODS) oszlopot] a Kanto Chemical, Co., Inc.-től (Tokió, Japán) vásároltuk.

    Csipkebogyó forró víz kivonat elkészítése

    Az extraktumot 1 g triturált porból 20 ml MilliQ-vízzel szobahőmérsékleten készítettük, és 100 ° C-on 30 percig főztük. Az extraktumot lehűtjük, szűrjük és fagyasztva szárítóval bepároljuk, majd a szárított mintát (hozam: 65,2%) lemérjük és 50 mg/ml koncentrációban feloldjuk MilliQ-vízben.

    Csipkebogyó-etanol vagy etil-acetát kivonatok készítése

    Az extraktumokat 1 g triturált porból 20 ml etanollal vagy etil-acetáttal készítettük, és szobahőmérsékleten 2 órán át kevertük. Az extraktumokat etanollal vagy etil-acetáttal ezt követően szűrjük és bepároljuk, majd a szárított mintákat lemérjük (hozam: 5,66, illetve 0,85%), és 50, illetve 100 mg/ml koncentrációban készítjük DMSO-ban.

    XO aktivitás mérése in vitro

    Az XO aktivitás mérését a korábban publikált módszerekkel végezzük módosításokkal (40). Röviden: 151,5 µl Tris-HCl puffer (pH 7,5; 100 mM), 7,5 µl XO (0,4 U/m) 50 mM Tris-HCl pufferben (pH 7,5) és 9 µl csipkebogyó kivonat [koncentrációk, 10, 20, 50 és 100 mg/ml (végső koncentráció, 500, 1000, 2500 és 5000 µg/ml) etil-acetát extraktumban, és 0,5, 1, 5, 10, 50 mg/ml (végső koncentráció, 25, 50, 250 (500, illetve 2500 µg/ml) forró vizes és etanolos kivonatokban] 1,5 ml-es csövekben összekevertük. Ezeket a csöveket hőblokkban inkubáltuk 37 ° C-on 5 percig. Ezt követően 12 µl xantint (80 uM) 25 mM NaOH-ban adunk hozzá, és 37 ° C-on inkubáljuk 30 percig. A csöveket 100 ° C-on inkubáltuk 1 percig a reakció befejezéséhez. Az uráttermelés mennyiségének méréséhez az Urate C-teszt Wako készletet használtuk a gyártó protokollja szerint. A relatív XO aktivitást az egyes csipkebogyó kivonat csoportok abszorbanciájának és a megfelelő vivőanyag kontrollcsoport (MilliQ-víz vagy DMSO) abszorbanciájának arányában fejeztük ki. A maximális gátló koncentráció felét (IC50) az XO aktivitás görbékből számoltuk.

    Állatok

    Minden kísérletet, valamint az állatok gondozását és kezelését a Josai Egyetem (Sakado, Japán) intézményi állatgondozási és felhasználási bizottság hagyta jóvá. Harminc hím ddY egeret (életkor: 5 hét) a Sankyo Labo Service Corporation, Inc.-től (Tokió, Japán) szereztünk be. Az egereket hat ketrecben helyezték el, ketrecenként öt egérrel. 12 órás fény/sötét ciklusnak tették ki őket, és 22 ± 2 ° C állandó hőmérsékleten és 55 ± 10% páratartalmon tartották. Az egereket 1 hétig hagytuk alkalmazkodni a laboratóriumi környezethez a kísérletek előtt, és laboratóriumi pellet-chow-t (CE-2; CLEA Japan Inc., Tokió, Japán) és ad libitum vizet adtunk hozzá. Az összes egeret eutanizáltuk pentobarbitális nátrium intraperitoneális injekciójával a kísérletek befejezése után.

    A hiperurikémia modell egerek kezelését csipkebogyó forró vizes kivonatokkal és allopurinol PO-val, urikáz-gátlóval alkalmazták a hiperurikémia modell egerek létrehozására, a korábban leírtak szerint (30–33). Röviden: a ddY egerek pellet-chow és vízellátását (életkor 6 hét; testtömeg, 31,0 ± 0,37 g) leállítottuk a kísérlet előtti este. Az egereket véletlenszerűen öt csoportra osztottuk (n = 7 a kontrollcsoportban, n = 5 az 5 mg/ml allopurinol csoportban és n = 6 az 1 mg/ml allopurinol, 0,5X vagy 1X csipkebogyó forró víz kivonat csoportban Az egereket PO-val kezeltük 0,5% CMC-Na-ban (280 mg/kg, ip) 1 órával, mielőtt 5 ml/kg MilliQ-vizet (mint kontrollcsoportot), 1 vagy 5 mg/kg allopurinolt vagy 5 ml/kg 0,5x vagy 1X csipkebogyó forró vízkivonat (

    165 mg/kg). A kísérlet ütemtervének diagramját az 1. ábra mutatja be.

    1.ábra.

    Csipkebogyó forró vizes kivonatokkal és allopurinollal végzett kezelés idővonalának diagramja a hiperurikémia modell egerekben.

    A szérum urát mérése

    A vérmintákat (0,1 ml) 0,6 ml-es csövekbe gyűjtöttük egymás után 2, 4, 6 és 8 órán át, a farokvénában lévő borotvapengével kis bemetszéssel. A vérmintákat 1 órán át szobahőmérsékleten inkubáltuk, és 800 x g-vel 4 ° C-on 15 percig centrifugáltuk. A felülúszó (

    Az egyes vérmintákból 20 µl-t szérum mintaként gyűjtöttünk, és felhasználásig -20 ° C-on tároltunk. Az egyes szérumminták 3,3 µl-es szérum-urát mennyiségét az Urate C-test Wako kit segítségével mértük, a gyártó protokolljának megfelelően.

    A CYP3A4 aktivitás mérése in vitro

    8,6 perc. A relatív CYP3A4 aktivitást az egyes csipkebogyó kivonat csoportok HPLC csúcsterületének és a megfelelő vivőanyag (MilliQ-víz) kontrollcsoport arányának fejeztük ki.

    Statisztikai analízis

    A statisztikai elemzést a BellCurve for Excel Ver szoftverrel végeztük. 2.1 (Social Survey Research Information Co., Ltd., Tokió, Japán). Az elutasítási teszt alkalmazása után az adatokat Student t-teszt és P in vitro alkalmazásával elemeztük, és átlagként ± az átlag in vivo standard hibájaként .

    Eredmények

    A csipkebogyó kivonatok dózisfüggő hatása az XO aktivitásra

    2. ábra.

    3. ábra.

    Szérum urátszintek hiperurikémiás egerekben, amelyeket vivőanyaggal, 1 mg/ml allopurinollal, 5 mg/ml allopurinollal, 0,5X csipkebogyó kivonattal és 1X csipkebogyó kivonattal kezeltek. Az adatokat átlagként ± az átlag standard hibájaként adjuk meg. * P 50 érték,> 1 mg/ml).

    4. ábra.

    A csipkebogyó kivonatok hatása a CYP3A4 aktivitásra. Az adatokat átlag ± szórásként adjuk meg.

    Vita

    A CYP3A4-et tartják a legfontosabb gyógyszer-metabolizáló enzimnek, mivel az összes klinikai gyógyszer> 50% -át metabolizálja (48). Figyelembe kell venni a gyógynövények közötti kölcsönhatásokat a gyógynövények biztonságos használata érdekében (9,10,35–39). Jelen tanulmány megkísérelte meghatározni, hogy a csipkebogyó forró víz kivonata gátolja-e a CYP3A4 aktivitását. A jelenlegi vizsgálatban, bár a csipkebogyó 12–1 000 µg/ml forró vízkivonatának dózisfüggő gátlása volt a CYP3A4 aktivitásának, nagyon gyenge hatása volt. Ezért a csipkebogyó forró víz kivonat és a CYP3A4 szubsztrát gyógyszerek közötti kölcsönhatás kockázata alacsonynak tűnik. Ezenkívül más vizsgálatok arról számoltak be, hogy a csipkebogyóból származó etil-acetát, n-butanol és etanol kivonatok nem váltottak ki toxicitást egereken végzett akut toxicitási tesztben (20), és kedvező eredményeket kaptak az osteoarthritisben végzett klinikai vizsgálatok (49–51). Így a csipkebogyó biztonságát felhasználásának hagyományos tapasztalatai, valamint biztonsági tesztjei is megerősítették.

    Összefoglalva: a jelenlegi tanulmány a legjobb tudomásunk szerint először bizonyította, hogy a csipkebogyó forró vize, etanol és etil-acetát kivonatai gátolták az XO aktivitást in vitro, és hogy ez a gátló hatás nagyobb volt a forró víz és az etanol kivonatok esetében . Ezenkívül a csipkebogyó forró víz kivonat orális beadása csökkentette a szérum urát szintjét a hiperurikémiás egerekben az XO aktivitás gátlásának eredményeként. Különösen a csipkebogyó forró vízkivonat csekély hatást gyakorolt ​​a CYP3A4 aktivitására. Ezek az eredmények együttesen azt mutatják, hogy a csipkebogyó forró vízkivonat ígéretes jelölt funkcionális táplálékként magas urátszinttel rendelkező egyének számára és hiperurikémiás betegek terápiás reagenseként.

    Köszönetnyilvánítás

    Jelen tanulmányt a Japan Medical Herb Association támogatta (FY 2016 támogatás a KS számára). Ezt a kéziratot az Enago (Mumbai, India) szerkesztette angol nyelvre, nyelvtanra, írásjelekre és helyesírásra.