A kalkon-szintáz-kódoló AeCHS részt vesz az Actinidia eriantha normál sziromszínezésében

Az antocianin bioszintetikus útja kivi. PAL, fenil-alanin-ammónia-liáz; C4H, transz-cinnamát-4-hidroxiláz; 4CL, 4-kumarát: CoA ligáz; CHS, kalkon-szintáz; CHI, kalkon-izomeráz; F3H, flavanon-3-hidroxiláz; F3′H, flavonoid 3′-hidroxiláz; F3′5′H, flavonoid 3′, 5′-hidroxiláz; DFR, dihidroflavonol-4-reduktáz; LDOX, leukoantocianidin-dioxigenáz; UFGT, flavonoid 3-O-galaktozil-transzferáz; UFGGT, flavonoid 3-O-galaktozid-xilozil-transzferáz; FLS, flavonol-szintáz; LAR, leukoantocianidin-reduktáz; ANR, antocianidin-reduktáz.

gének

Virágfenotípus három különböző Actinidia fajban. Az A. eriantha, az A. hemsleyana és az A. arguta sziromszíne vörös, világos rózsaszín és fehér,.

Az antocianin-komponensek tartalma és azok prekurzorai, beleértve a dihidrokvercetint, dihidromiricetint, cianidint, delphinidint, cianidin-3-O-galaktozidot, delphinidin-3-O-galaktozidot és cianidin-3-O-xilóz-galaktozidot. (A) Dihidroquercetin tartalom három gépelt sziromban. (B) Cyanidin-tartalom három tipizált sziromban. (C) Cianidin-3-O-galaktozid tartalom három tipizált sziromban. (D) Cianidin-3-O-xilóz-galaktozid három tipizált sziromban. (E) Dihidromiricetin-tartalom három gépelt sziromban. (F) Delphinidin-tartalom három tipizált sziromban. (G) Delphinidin-3-O-galaktozid három tipizált sziromban. (H) Három tipizált szirom összes antocianintartalma. Az adatok három ismétlés átlagai ± SE. A hibasávok az átlag standard hibáját jelentik. A különböző kisbetűs oszlopok szignifikánsan különböznek P ≤ 0,05 értéknél. Az adatokat Student t-tesztjével elemeztük.

A szerkezeti gének expressziós profilja három Actinidia fajban, köztük az A. eriantha, A. hemsleyana és A. arguta (A), valamint a génexpresszió klaszteranalízise (B). Az adatok három ismétlés átlagai ± SE. A hibasávok az átlag standard hibáját jelentik. A különböző kisbetűs oszlopok szignifikánsan különböznek P ≤ 0,05 értéknél. A normál színskálával -1 és 1 közötti cián és rózsaszín dobozok alacsony, illetve magas expressziós szintet jeleznek. A kék árnyék azt jelzi, hogy a CHS gén egyetlen csoportba van csoportosítva.

A DNS és a fehérje szekvenciaillesztései és a filogenetikai fa felépítése. (A) A CHS DNS-szekvencia összehangolása különböző Actinidia fajokban és fajtákban. (B) A CHS fehérje szekvencia összehangolása különböző Actinidia fajokban és fajtákban. (C) A filogenetikai fa építése aminosav-szekvenciák alapján. Az AeCHS, a teljes kódoló szekvenciát azonosítottuk és klónoztuk az Actinidia eriantha ’Zaoxu’ szirmokból. DTZ79_22g06860, a CHS gén-azonosítója az Actinidia eriantha ’White’; Achn109041/Ach00g109041.1, a CHS gén-azonosítója az Actinidia chinensis ’Hongyang’; Acc02004.1, CHS gén-azonosítója az Actinidia chinensis ‘Red 5’.

Szubcelluláris lokalizáció. (A) 2 × 35S: YFP és 2 × 35S: AeCHS: YFP vektorszerkezete. (B) Az AeCHS szubcelluláris lokalizációja a Nicotiana benthamiana levelekben. A kísérleteket háromszor megismételtük. Az AeCHS: YFP fúziós gén expresszáló sejtek fluoreszcenciát mutattak a citoplazmában. Üres plazmidot YFP taggel expresszáló sejteket használtunk kontrollként.

Az AeCHS szirmai elnémultak (felső) és a kontroll (alsó) A. eriantha ’Zaoxu’ virágok. Az AeCHS-elhallgatott virágok szirmai halványabb rózsaszínűek voltak, mint a kontrollé, és közel fehérek voltak.

A hajtások növekedési állapota a virágok eltávolítása után.