A posztnatális oxitocin injekciók tartós súlygyarapodást és megnövekedett nociceptív küszöböket okoznak hím és nőstény patkányokban

Absztrakt

A posztnatális növekedési retardáció a csecsemőkori időszakban megnövekedett morbiditással és mortalitással jár, valamint a későbbi életkorban a betegségek, például a szív- és érrendszeri betegségek és az inzulinfüggő diabetes mellitus kialakulásának fokozott kockázatával (1). Az intrauterin növekedés retardációja és a koraszülés gyakran összefügg a rossz posztnatális növekedéssel.

Újszülött patkányokban a kezelés kimutatták, hogy hosszan tartó növekedést eredményez a súlygyarapodásban és a nociceptív küszöbökben (2, 3), és felfelé szabályozza a központi glükokortikoid receptorokat, ezáltal befolyásolva a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese tengely aktivitását (4) . Továbbá a gyermekek számára végzett masszázs csökkentheti a vizelet kortizol- és noradrenalinszintjét (5). Az elmúlt években kimutatták, hogy a koraszülöttek kenguru gondozással (6) vagy masszázzsal (7, 8) történő kezelése pozitív fiziológiai, metabolikus és viselkedési hatásokkal bír, valamint javítja a szülés utáni növekedést (6–11). Ezeknek a hatásoknak a mechanizmusa nagyrészt ismeretlen, de valószínűleg a szomatoszenzoros idegek ingerlésével, valamint más típusú szenzoros ingerekkel váltják ki. Kimutatták, hogy a kenguru módszer megváltoztatja a korai csecsemők CCK plazmaszintjét (12), ami azt jelzi, hogy ez a kezelés stimulálja a vagális idegaktivitást, és ennek következtében esetleg anabolikus anyagcserét ezekben a csecsemőkben.

MÓD

Kísérleti állatok. Hét vemhes Sprague-Dawley patkányt szereztek be a B & K Universal AB-től (Sollentuna, Svédország). Az állatokat ketrecekben helyeztük el hőmérsékleten (20 ± 1 ° C) és páratartalom mellett (45-55%) ellenőrzött helyiségekben, megvilágítva 0600 és 1800 óra között. Pelletezett ételt használtak 18,5% fehérjetartalommal (Lactamin, Vadstena, Svédország). A víz és az étel mindig rendelkezésre állt ad libitum. A kölykök 1 hete születtek, miután a gátak megérkeztek az állatosztályra. Az alom patkányonként nyolc kölyökre csökkent, születése után 7 nappal. A kölyköket 22 d éves korukban elválasztották anyjuktól, és négy patkány ketrecében tartották. A vizsgálatot a stockholmi állatkísérletekkel foglalkozó etikai bizottság hagyta jóvá.

Vérminták kezelése. Közvetlenül a lefejezés után a törzsvizet 10 NE/ml heparint (KABI Pharmacia AB, Stockholm, Svédország) és 500 NE/ml aprotinint (Bayer AB, Stockholm, Svédország) tartalmazó hűtött műanyag csövekbe gyűjtötték. A mintákat azonnal centrifugáltuk, a plazmát összegyűjtöttük és lefagyasztottuk (-20 ° C).

Vérminták elemzése. CCK. Az RIA előtt a peptidet Sep-Pak C18 patronokkal (Waters Associates, Milford, MA) választották el a plazmafehérjéktől. A CCK meghatározása előtt a megtisztított plazmamintákat eredeti térfogatuk felében feloldottuk, és ezáltal kétszer betöményítettük. Ezt később korrigálták. A CCK immunvizsgálatát Smedh és Uvnäs-Moberg (23) leírása szerint végeztük. CCK standardot (Peninsula Laboratories, San Carlos, Kalifornia), OAL-656 antiszérumot (Otsaka Assay Laboratories, Tukoshima, Japán) és 125 I-CCK-t (NEN DuPont, Boston, MA) használtunk. A vizsgálat kimutatási határa 3,6 pmol/l volt. A vizsgálaton belüli és a vizsgálati interakciók közötti variációs együtthatók 10, illetve 12% voltak.

Inzulin. A plazmamintákat M8309 antiszérummal (Novo Research Institute, Bagsvaerd, Dánia) inkubáltuk 48 órán át 4 ° C-on. Ezután 125 I-inzulint (NEN DuPont) adunk hozzá, és az inkubálást 4 órán át 4 ° C-on folytatjuk. A standard görbék előállításához szintetikus patkányinzulint (Novo Research Institute) használtunk. A szokásos inzulint, antiszérumot és 125 I-inzulint 0,02 M veronális pufferben (pH 7,5) hígítottuk 4% BSA-val. A kimutatási határ 0,05 ng/ml volt. A vizsgálaton belüli és a vizsgálaton belüli variációs együtthatók 9,6%, illetve 10,1% voltak.

Szőlőcukor. A glükózt GOD-PAP módszerrel elemeztük (Merckotest 3395, Merck, Darmstadt, Németország).

Nociceptív küszöbök. A nociceptív reflexeket úgy értékeltük, hogy a patkány farkát 51-52 ° C hőmérsékletre termosztáttal szabályozott vízbe merítettük. Feljegyeztük a farok visszahúzódásának késleltetését. Három egymást követő értéket regisztráltunk, és az átlagot használtuk az elemzéshez.

Statisztikai analízis. Az eredményeket átlag ± SD-ként mutatjuk be. Az oxitocin testtömegre és súlygyarapodásra gyakorolt hatását kétirányú ANOVA-val tesztelték, amelynek kora, kezelése, valamint az életkor és a kezelés közötti kölcsönhatás volt a variáció összetevőjeként. Ha jelentős eltérést találtak, a t tesztet használtunk annak értékelésére, hogy melyik életkorban volt szignifikáns különbség az oxitocinnal és a sóoldattal kezelt patkányok között. Az oxitocinnal és sóoldattal kezelt állatok között a hormonszint, a testzsír és a nociceptív küszöbértékek különbségeit a t teszt. P a 0,05 vagy annál kisebb értékeket tekintettük statisztikailag szignifikánsnak.

EREDMÉNYEK

Testtömeg és súlygyarapodás. Hím patkányok. Az oxitocinnal kezelt hím patkányoknál a testtömeg nagyobb volt a születés utáni d 50-nél (I. kísérlet) és 60-nál (I. és II. Kísérlet) (1A. És 2A. Ábra), és nagyobb volt a súlygyarapodásuk (1B. És 2B. Ábra), ami kb. 40-60 nappal a születés után, összehasonlítva a kontrollokkal.