A tirozolt és a hidroxi-tirozolt az emberek szűz olívaolaj mérsékelt és tartós adagjaiban szívják fel

Absztrakt

Célkitűzés: A tirozol és a hidroxi-tirozol felszívódásának vizsgálata a szűz olívaolaj fogyasztásának mérsékelt és tartós adagjaiból. A tanulmány azt is megvizsgálta, hogy ezek a fenolos vegyületek felhasználhatók-e a szűz olívaolaj-bevitel biomarkereként.

Tervezés és beavatkozások: Egy adag szűz olívaolaj (50 ml) bevitele. Ezt követően egy hétig a résztvevők a szokásos étrendet követték, amely napi 25 ml ugyanolyan szűz olívaolajat tartalmazott a nyers zsír forrásaként.

Beállítás: Unitat de Recerca en Farmacologia. Institut Municipal d'Investigació Mèdica (IMIM).

Tárgyak: Hét egészséges önkéntes.

Eredmények: A tirozol és a hidroxi-tirozol 24 órás vizeletnövekedése egyszeri adag (50 ml) bevitele és rövid távú (egy hét, 25 ml/nap) szűz olívaolaj (P

Bevezetés

A mediterrán étrendet, amelyben az olívaolaj a fő zsírkomponens, a koszorúér-betegség és egyes rákos megbetegedések alacsonyabb gyakoriságával társítják (Renaud et al, 1995). A szűz olívaolaj gazdag fenolos vegyületekben, amelyekről kimutatták, hogy késleltetik in vitro fém által kiváltott és gyökfüggő LDL oxidáció (Visioli és mtsai, 1995; Fitó és mtsai, 2000; Owen és mtsai, 2000). Az olívaolaj-fenolos vegyületek egyéb biológiai tulajdonságai közé tartozik a vérlemezkék aggregációja és az apoptózis indukciója a HL-60 sejtekben (Manna és mtsai, 1999).

Sejtkultúra-modellek adatai arra utalnak, hogy a hidroxi-tirozol mennyiségileg felszívódik a bél szintjén (Manna és mtsai, 2000). Patkányoknál szájon át alkalmazott olaj alapú adagolás a tirozol és a hidroxi-tirozol szignifikánsan nagyobb eliminációját eredményezte 24 órás vizeletben, mint a vizes adagolás (Tuck és mtsai, 2001). Az első kísérleti bizonyítékot a tirozol és a hidroxi-tirozol olívaolajból történő abortuszára emberben Visioli és munkatársai (2000) szerezték be egyszeri, 50 ml fenollal dúsított olívaolajok orális dózisából. A 100 mg olívaolaj-fenolt tartalmazó étrend-kiegészítők elfogyasztása után az olívaolaj-fenolok nagy része felszívódott, a felszívódott olívaolaj-fenolok nagymértékben módosultak a szervezetben (Vissiers és mtsai, 2002). Beszámoltak a tirozol és a hidroxi-tirozol biohasznosulásáról emberben egyetlen, természetes formában szedett 50 ml szűz olívaolaj egyszeri dózisával (Miró-Casas et al., 2001a, b). A tirozol és a hidroxi-tirozol szintje a vizeletben emelkedett, miután a szűz olívaolaj-fogyasztás 0–4 órakor elérte a csúcsot, és 12–24 órakor visszatért az alapértékekre (Miró-Casas és mtsai, 2001a, b).

Ennek a vizsgálatnak a célja annak meghatározása, hogy a tirozol és a hidroxi-tirozol felszívódhat-e a szűz olívaolaj mérsékelt és tartós adagjaiból. A tanulmány célja annak vizsgálata is, hogy ezek a fenolos vegyületek felhasználhatók-e a szűz olívaolaj bevitelének biomarkereként.

Mód

Tárgyak

A tanulmányt az 1975-ös, 1989-ben felülvizsgált helsinki nyilatkozatnak megfelelően végezték el. A protokollt a helyi etikai bizottság (CEIC-IMAS) hagyta jóvá. Az alanyok írásbeli beleegyezésüket adták. Hét egészséges, 22 és 63 év közötti önkéntest (négy nő és három férfi) vettek fel a laboratóriumi személyzetből. Az alanyok súlya 64,1 ± 14,2 kg (átlag ± sd; férfiak 75,7 ± 14,0 kg és nők 55,5 ± 6,4 kg), testtömeg-indexük 22,8 ± 3,0 (átlag ± sd; férfiak 24,7 ± 3,8 és nők 21,1 ± 0,95). A fizikális vizsgálat és a rutin laboratóriumi vizsgálatok után kapott eredmények alapján egészségesnek tekintették őket.

Olívaolaj jellemzői

Dizájnt tanulni

A kísérlet 12 napig tartott. Az önkéntesek olívaolajat és alacsony antioxidáns tartalmú étrendet követtek 4 nap alatt (kimosási időszak). A táplálkozási szakember arra utasította őket, hogy több ételt (kávé, tea, gyümölcs, zöldség, bor és olívaolaj) zárjanak ki az étrendjükből. Az 5. napon reggel 8 órakor 50 ml (44,5 g) szűz olívaolajat adtak be a résztvevőknek egyetlen dózisban, közvetlenül vagy egy kis kenyér mellett. Ezt követően egy hétig minden résztvevő a szokásos étrendet követte, amely naponta 25 ml (22,5 g) ugyanolyan szűz olívaolajat tartalmazott, mint amelyet az 5. napon fogyasztottak nyers zsírforrásként. Huszonnégy órás vizeletet gyűjtöttünk kiinduláskor (4. nap), 50 ml szűz olívaolaj (5. nap) beadása után, és egy hét 25 ml/nap szűz olívaolaj fogyasztása után (12. nap). A vizeletmintákat elemzésükig -80 ° C-on tároltuk. A huszonnégy órás vizeletmennyiség 0,8–2,8 l, 0,98–2,55 l, illetve 0,78–3 l volt a 4., 5. és 12. napon. A résztvevőket arra kérték, hogy kerüljék a fenolos vegyületeket tartalmazó élelmiszerek magas bevitelét. A napi étrendi nyilvántartásokat minden önkéntestől megszerezték.

Étrendi értékelés

A tápanyagok bevitelét hét napi étrendi nyilvántartásból számoltuk ki a Diet Analysis Nutritionist IV szoftverrel (N Squared Computing, San Bruno, Kalifornia). Az alanyok napi energiafogyasztása a tartós olívaolaj bevitel hetében 1465 és 2284 kcal (átlagosan 1748 ± 331 kcal) között mozgott, és 37,5 ± 3% lipideket tartalmazott (PUFA 4,8 ± 1,2%, MUFA 17,9 ± 2,1% és SFA 14,7 ± 1,58%), szénhidrát 44,2 ± 5,1% és fehérje 18,3 ± 2,7%.

Laboratóriumi mérések

statisztikai elemzések

A csoportok közötti különbségeket a párosított minták Wilcoxon-tesztjével értékeltük. A statisztikai szignifikanciát a következők szerint határoztuk meg P

Eredmények

A tirozol és a hidroxi-tirozol vizeletszintjét a kiindulási értéken, egyszeri adag (50 ml) és tartós (napi egy hét, napi 25 ml) szűz olívaolaj után az 1. ábra mutatja. A vizelet tirozol- és hidroxi-tirozolszintje a egyszeri adagolás (P 1.ábra

Tirozol és hidroxi-tirozol 24 órás vizeletben egyszeri adag (50 ml) és tartós adagok (egy hét, 25 ml/nap) szűz olívaolaj fogyasztás után.

Az 1. táblázat a tirozol és a hidroxi-tirozol 24 órás vizelettel történő visszanyerését mutatja a becsült beadott mennyiség százalékában, mindkét intervenciós időszakban. A tirozol vizelettel történő visszanyerése hasonló volt. Azonban a hidroxi-tirozol átlagos helyreállítási értéke egy hét 25 ml/nap tartós szűz olívaolaj után 1,5-szerese volt az egyszeri 50 ml-es adag után elért értékeknek. Ezenkívül a tartós időszak végén a vizeletből származó hidroxi-tirozol átlagos mennyisége a 24 órás vizeletben (822 µg) magasabb volt, mint a napi adag (685 µg).

Vita

A jelen tanulmányban kapott adatok megerősítik a tirozol és a hidroxi-tirozol felszívódását a szűz olívaolaj fogyasztása után. A vizsgálat fontos megállapítása, hogy a vizeletből származó tirozol és hidroxi-tirozol tartós és mérsékelt adag szűz olívaolajból természetes formában szívódik fel. Ez az adag közel van ahhoz az adaghoz, amelyet napi tipikus mediterrán étrendben szoktak bevenni.

Mindazonáltal úgy tűnik, hogy a fenolos vegyületek anyagcseréje eltér. A vizeletből származó tirozol szintje egy hét tartós adag (25 ml/nap) szűz olívaolaj után alacsonyabb volt, mint az egyszeri 50 ml-es adag után. A tirozol vizeletből történő visszanyerése mindkét beavatkozási időszakban hasonló volt. A vizelet hidroxi-tirozol szintje azonban mindkét beavatkozási periódusban hasonló volt, a 25% szűz olívaolaj 100% -nál nagyobb tartós adagolása után a vizeletben a hidroxi-tirozol becsült gyógyulása volt.

Jelenleg nem tudjuk, mely anyagcsere- vagy étrendi tényezők lehetnek érintettek. Elvethettük az analitikai módszertani különbségeket, mivel a napközi variációs együtthatók (CV%) és a pontosság (hiba%) csak kissé jobbak a tirozolnál, mint a hidroxi-tirosolnál (CV, 2.8 vs. 6%, és a hiba 2.7 vs. 5%; Miró-Casas és mtsai, 2001b). A szűz olívaolaj egyetlen adagjának bevétele után a tirozol és a hidroxi-tirozol felezési idejét körülbelül 8 órára becsülik (Miró-Casas és mtsai, 2001b). Noha az olívaolaj folyamatos kitettsége hosszú távú hidroxi-tirozol felhalmozódást eredményezhet, a vizelet hidroxi-tirozol-koncentrációja és a vizelet helyreállítása 25 ml olívaolaj tartós adagja után megfigyelhető csak az elért egyensúlyi állapot mellett.

A hidroxi-tirozol és konjugált formáinak (oleuropein és a hidroxi-tirozol glikozidjai) jelenlétét más élelmiszerekben nem jelentették. Alternatív megoldásként a dihidroxi-fenil-etanolt a dopamin-metabolizmusból származó metabolitként azonosították a dopaminerg sejtvonalakban (Lamensdorf és mtsai, 2000). Egyéb in vitro vizsgálatok kimutatták, hogy a 3,4-dihidroxi-fenil-acetaldehid (DOPAL), egy dopamin-metabolit, a humán máj alkohol-dehidrogenáz izoenzim általi redukciója eredményeként hidroxi-tirozol képződik (Mardh & Vallee, 1986). Az étrendi fehérje lebontásából származó tirozin előfutára lehet a dopamin endogén képződésének a tirozin-hidroxiláz enzimet tartalmazó sejtekben (Goldstein és mtsai, 1999). Ezért a hidroxi-tirozol endogén képződése az étrendi tirozin emberi metabolizmusából származhat. Nem lehet kizárni, hogy a hidroxi-tirozol prekurzorok exogén forrásai lehetnek, például dopamin vagy más biogén aminok, például a tiramin, amelyek jelen vannak az élelmiszerekben (Novella-Rodríguez et al, 2000).

Összefoglalva, a közölt adatok azt mutatják, hogy a 24 órás vizelet tirozol és hidroxi-tirozol felszívódik tartós és mérsékelt szűz olívaolaj-fogyasztás esetén. Eredményeink alapján azonban a vizelet-tirozol a szűz olívaolaj-fogyasztás jobb biomarkerének tűnik, mint a vizelet-hidroxi-tirozol. Ezen eredmények megerősítéséhez további vizsgálatok szükségesek hosszabb intervenciós időszakokkal és szűz olívaolajok felhasználásával, amelyek fenoltartalma eltér.

Hivatkozások

Caruso, D, Berra, B, Giavarini, F, Cortesi, N, Fedeli, E & Galli, G (1999). A szűz olívaolaj-vegyületek hatása az emberi alacsony sűrűségű lipoproteinek in vitro oxidációjára. Nutr. Metab. Cardiovasc. Dis., 9., 102–107.

Deiana, M, Aruoma, OI, Spencer, JP, Kaur, H, Halliwell, B, Aeschbach, R, Dessi, MA és Corongiu, FP (1999). A peroxinitrit-függő DNS-bázis módosításának és tirozin-nitrálásának gátlása extra szűz olívaolajból származó antioxidáns hidroxi-tirozollal. Ingyenes Rad. Biol. Med., 26., 762–769.

De la Puerta, R, Ruíz-Gutierrez, V & Hoult, JR (1999). A leukocita 5-lipoxigenáz gátlása szűz olívaolaj fenoljai által. Biochem. Pharmac., 57, 445–449.

Fitó, M, Kovász, MI, Lamuela-Raventós, RM, Vila, J, Torrents, J, de la Torre, C & Marrugat, J (2000). Az olívaolaj és fenolos vegyületeinek védő hatása az alacsony sűrűségű lipoprotein oxidációval szemben. Lipidek, 35, 633–638.

Giovannini, C, Straface, E, Modesti, D, Coni, E, Cantafora, A, de Vincenzi, M, Malorni, W & Masella, R (1999). A tirozol, a fő olívaolaj-biofenol, véd a Caco-2 sejtekben az oxidált LDL által kiváltott sérülések ellen. J. Nutr., 129, 1269–1277.

Goldstein, DS, Swoboda, KJ, Miles, JM, Coppack, SW, Nemman, A, Holmes, C, Lamensdorf, I & Eisenhofer, G (1999). A plazma dopamin-szulfát forrásai és fiziológiai jelentősége. J. Clin. Endokrinol. Metab., 84., 2528–2531.

Hedelin, H, Grenabo, L & Pettersson, S (1986). Az ureáz hatása hígítatlan emberi vizeletben. J. Urol., 136, 743–745.

Lamensdorf, I, Eisenhofer, G, Harvey-White, J, Nechustan, A, Kirk, K & Kopin, IJ (2000). A 3,4-dihidroxifenilacetaldehid fokozza a metabolikus stressz toxikus hatásait a PC12 sejtekben. Brain Res., 868, 191–201.

Manna, C, Della Ragione, F, Cucciolla, V, Borriello, A, D'Angelo, S, Galletti, P & Zappia, V (1999). A táplálkozás és a rák fejlődése 2, szerk. V Zappia, F Della Ragione, A Barbarisi, GL Russo és R Dello Iacovo, pp. 115–130, New York: Kluwer Academic/Plenum Publishers

Manna, C, Galletti, P, Maisto, G, Cucciolla, V, D'Angelo, S & Zappia, V (2000). Az olívaolaj-hidroxi-tirozol szállítási mechanizmusa és anyagcseréje a Caco-2 sejtekben. FEBS Lett., 470, 341–344.

Mardh, G & Vallee, BL (1986). Az I. osztályú alkohol-dehidrogenázok katalizálják az alkoholok és az aldehidek interkonverzióját a dopamin metabolizmusában. Biokémia, 25, 7279–7282.

Miró-Casas, E, Farré Albadalejo, M, Covas Planells, MI, Fitó Colomer, M, Lamuela Raventós, R & de la Torre, R (2001a). Tirozol biohasznosulása emberben a szűz olívaolaj lenyelése után. Clin. Chem., 47, 341–343.

Miró-Casas, E, Farré Albadalejo, M, Covas, MI, Ortuño Rodriguez, J, Menoyo Colomer, E, Lamuela Raventós, R & de la Torre, R (2001b). Kapilláris gázkromatográfia-tömegspektrometriás hidroxi-tirozol és tirozol mennyiségi meghatározása az emberi vizeletben olívaolaj bevitele után. Anális. Biochem., 294, 63–72.

Novella-Rodríguez, S, Veciana-Nogués, MT és Vidal-Carou, MC (2000). A biogén aminok és a poliaminok tejekben és sajtokban ionpáros nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával. J. Agric. Food Chem., 48, 5117–5123.

Owen, RW, Mier, W, Giacosa, A, Hull, WE, Spiegelhalder, B & Bartsch, H (2000). Fenolos vegyületek és szkvalén az olívaolajokban: a teljes fenolok, egyszerű fenolok, szekoroidok, lignánok és szkvalén koncentrációja és antioxidáns potenciálja. Food Chem. Toxicol., 38, 647–659.

Renaud, S, de Lorgeril, M, Delaye, M, Guidollet, J, Jacquard, F, Mamelle, N, Martin, JL, Monjaud, I, Salen, P & Toubol, P (1995). Krétai mediterrán étrend a szívkoszorúér betegség megelőzésére. Am. J. Clin. Nutr., 61, 1360–1365.

Szalámi, M, Galli, C, de Angelis, L & Visioli, F (1995). F2-izoprostánok képződése oxidált kis sűrűségű lipoproteinekben: a hidroxi-tirozol gátló hatása. Pharmac. Res., 31, 275–279.

Singleton, VL & Ross, JA (1965). Az összes fenolos anyag kolorimetriája foszfomolibdikus-foszfotungstinsav-reagenssel. Am. J. Enol. Vitic., 16., 144–158.

Tsimidou, M, Papadopoulos, G & Boskou, D (1992). Fenolos vegyületek meghatározása szűz olívaolajban fordított fázisú HPLC-vel, az UV-detektálást hangsúlyozva. Food Chem., 44., 53–60.

Tuck, KL, Freeman, képviselő, Hayball, PJ, Stretch, GL & Stupans, I (2001). A in vivo az olívaolaj antioxidáns fenolos alkotóelemeinek hidroxi-tirozol és tirozol sorsa, jelölt vegyületek intravénás és orális adagolása után patkányoknak. J. Nutr., 131, 1993–1996.

Visioli, F., Bellomo, G, Montedoro, G & Galli, C (1995). Az alacsony sűrűségű lipoprotein oxidációja gátolt in vitro olívaolaj-alkotórészek által. Atherosclerosis, 117., 25–32.

Visioli, F, Galli, C, Bornet, F, Mattei, A, Patelli, R, Galli, G & Caruso, D (2000). Az olívaolaj-fenolok dózisfüggően felszívódnak az emberekben. FEBS Lett., 468, 159–160.

Vissiers, MN, Zock, PL, Roodenburg, AJ, Leenen, R & Katan, MB (2002). Az olívaolaj-fenolok felszívódnak az emberekben. J. Nutr., 132, 409–417.