Alvadási és fibrinolitikus rendszerű fehérjeprofilok normál terhességű és magas vérnyomásban komplikált terhességben szenvedő nőknél

Sarah A. Hale

a Szülészeti, Nőgyógyászati és Reproduktív Tudományok, 89 Beaumont Ave, Vermonti Egyetem, Burlington, VT, Egyesült Államok, 05405

Burton Sobel

b Kardiovaszkuláris kutatási egység, Vermonti Egyetem, Burlington, VT, Egyesült Államok, 05405

Anna Benvenuto

a Szülészeti, Nőgyógyászati és Reproduktív Tudományok, 89 Beaumont Ave, Vermonti Egyetem, Burlington, VT, Egyesült Államok, 05405

Adrienne Schonberg

a Szülészeti, Nőgyógyászati és Reproduktív Tudományok, 89 Beaumont Ave, Vermonti Egyetem, Burlington, VT, Egyesült Államok, 05405

Gary J. Borz

c Orvosi Biostatisztika Tanszék, Vermonti Egyetem, Burlington, VT 05405

Ira M. Bernstein

a Szülészeti, Nőgyógyászati és Reproduktív Tudományok, 89 Beaumont Ave, Vermonti Egyetem, Burlington, VT, Egyesült Államok, 05405

Absztrakt

Célkitűzés

A jelenlegi vizsgálat hosszanti irányban a fibrinogén (Fib), a D-Dimer, az 1. típusú plazminogén aktivátor (PAI-1) és a szövet típusú plazminogén aktivátor (T-Pa) koncentrációit értékelte terhesség előtt, valamint a terhesség első és harmadik trimeszterében a terhesség átmenetéről.

Dizájnt tanulni

Húsz egészséges, nemdohányzó, semmihez nem tartozó nőt vizsgáltak, akik 29,8 ± 3,0 évesek, BMI-értékük 23,3 ± 3,2 kg/m 2 volt, a menstruációs ciklus 8. és 4. napján, valamint a korai (11-15 hét) és a késői (31-34 hét) terhesség során. . Tizenhét nőnek volt egyedülálló koncepciója, és a szövődmény nélküli terhesség (CTL) idején született, és három nőnél komplikált magas vérnyomás (CH) alakult ki terhesség alatt a harmadik trimeszter (késői terhesség) kiértékelése után. Az adatok átlag ± SEM, a szignifikancia alapja p Kulcsszavak: terhesség, preeclampsia, koaguláció, fibrinolízis, T-Pa, fibrinogén

Bevezetés

A terhességet a koaguláció és a fibrinolitikus fehérjék expressziójának változásai kísérik, amelyek elősegítik az alvadék kialakulásának egyensúlyát. A koagulációs kaszkád aktivációjának növekedése hozzájárul a vérzés kockázatának csökkenéséhez, amely egyébként káros lehet a magzat és az anya egészségére. A koaguláció mind az extrinsic, mind az intrinsic útjában bekövetkezett változásokat jól jellemezték, és azt mutatják, hogy a protrombin, a VII, X, XII és VIII koagulációs faktorok a terhesség alatt fokozódnak [1]. Kimutatták, hogy a fibrinogén, a fibrin előfutára terhesség alatt növekszik, hozzájárulva a prokoaguláns környezethez [1–3].

A fibrinolitikus rendszerben lévő fehérjék, amelyek gátolják a fibrinolízist, felfelé szabályozódnak, ezáltal még jobban elősegítve a koagulációt. Az 1-es típusú plazminogén aktivátor inhibitor (PAI-1) antifibrinolitikus fehérje, amely szerepet játszik az érrendszer átalakításában [4]. A PAI-1-t számos endotélsejt szekretálja, amelyet számos jelátviteli egység stimulál, beleértve a trombint [5]. A terhesség alatt a PAI-1 a fibrin lebontásában kulcsfontosságú fehérje, a szövet típusú plazminogén aktivátor (T-Pa) elsődleges inhibitora [6, 7]. A T-PA-t az endothel sejtek termelik, amelyek az endothel sérülésére válaszul lokálisan szekretálódnak, és fibrin jelenlétében a plazminogén hatásos aktivátorai, a fibrin lebontásának döntő lépése [5]. A T-PA nő a terhesség alatt; a PAI-1 növekedése azonban felülírja a T-PA szintjét, ezáltal fenntartva a prokoagulálható környezetet [8]. Bár a terhesség alatti koagulációs folyamatok dominálnak a fibrinolízissel szemben, a D-Dimer, a fibrin lebomlásának terméke, a terhesség előrehaladtával növekszik, ami funkcionálisan aktív fibrinolitikus rendszert mutat [8].

Míg a normális terhesség fokozott koagulációval jár, addig a preeclampsia (PE) kialakulásában szenvedő nőknél a koaguláció fokozódik a normál terhességhez képest [9]. A fokozott koaguláció klinikai megnyilvánulásai között szerepel a fibrinfelesleg feleslege és a mikrotrombus képződése, amely magában foglalja az anyai szerveket és a placentát is [10]. A PE hiperkoagulálhatóságát az endothel diszfunkciójának, az antithrombinszint csökkenésének és a trombinaktivitás markereinek megnövekedett szintjének tulajdonítják [9, 11]. A hemosztázisban szerepet játszó egyéb fehérjék, például a VIII-as faktor, az oldható fibrin, a trombomodulin és a D-dimer szintén beszámoltak arról, hogy megváltoztak a PE-ben [12–16].

A jelenlegi vizsgálat célja a koaguláció és a fibrinolitikus rendszer fehérjéinek koncentrációinak értékelése volt hosszanti irányban a nulliparous nőknél a terhesség előtt és a terhesség alatt, elsődleges hangsúlyt fektetve a nem terhes állapotból a terhességbe való átmenetre. Kiértékeltük a fibrinogén, a PAI-1, a T-Pa és a D-Dimer fibrin fragmens koncentrációját a terhesség előtt, valamint a terhesség korai és késői szakaszában. Ezenkívül értékeltük az időbeli különbségeket azoknál a nőknél, akiknél később preeclampsia alakult ki.

Mód

Minden időszakos értékelést 8 és 10 óra között végeztünk. Az alanyokat egy éjszakai böjt után a vizsgálat napján felvették a Vermonti Egyetem Általános Klinikai Kutatóközpontjába. Az alanyok terhesség előtti látogatásához először ürített vizeletet nyertek a nem terhes állapot megerősítésére. A magasság és a súly meghatározása után az alanyok a vizsgálat hátralévő részében fekvő helyzetben pihentek, legalább 30 perccel a vérvétel előtt.

A vérmintákat a vizsgálattól függően EDTA vagy nátrium-citrát csövekbe gyűjtöttük az antecubitalis fossa-ból, bent lévő vénás fiziológiás sóoldat használatával és 2,5 ml-es dobással. 60 percen belül 15 percig 3000 x g-vel centrifugáltuk őket a plazma izolálása érdekében. A plazmát ezután alikvotáljuk és -70 ° C-on tároljuk az elemzésig.

Vizsgálati módszerek

Alvadás

A plazma fibrinogén-koncentrációját Clauss-módszer alkalmazásával határoztuk meg [17]. A fibrinogénszintek közvetlenül korrelálnak a hígított plazmaminta alvadási idejével felesleges trombin jelenlétében. A fibrinogén koncentrációkat a STAR automatizált koagulációs analizátorral (Diagnostica Stago, Parsippany, NJ) számszerűsítettük. Ezután a beteg fibrinogén eredményeit összehasonlítottuk a kontroll eredmények alapján. Inter-assay CV 2-6% között mozgott.

Fibrinolízis

A T-PA antigént és a PAI-1 antigént kereskedelmi forgalomban kapható ELISA-k alkalmazásával értékeltük, összhangban a gyártó utasításával (TriniLIZE T-Pa Antigen kit és TriniLIZE PAI-1 Antigen kit, Diagnostica Stago). A PAI-1 antigén mind az aktív, mind az inaktív PAI-1-t, valamint a T-Pa-val és az urokináz plazminogén aktivátorral komplexelt PAI-1-t tükrözi.

A PAI-1 aktivitást a korábbiakban leírtak szerint értékeltük Chmielewska és Wiman által kifejlesztett módosított kromogén szubsztrát enzimatikus vizsgálati módszerrel [18].

A D-Dimer-t kereskedelemben kapható immuno-turbidometrikus vizsgálat (Liatest D-Di, Diagnostica Stago) alkalmazásával mértük, összhangban a gyártó utasításával. Az interassay CV 5 és 14% között mozgott.

Statisztikai elemzések

Az 1. táblázatban felsorolt demográfiai információkhoz a Student t-tesztjét használtuk a statisztikai szignifikancia meghatározásához. A születési súly percentilis P-értéke a százalékok probit transzformációját tükrözi az elemzés előtt. Kétfaktoros, ismételt mértékű varianciaanalízist alkalmaztak a normál terhességű nők és a koaguláció és a fibrinolitikus fehérjék longitudinális változásainak és a magas vérnyomás által komplikált nők összehasonlítására. Az ANOVA két tényezője a terhességi csoportot (egy alanyon átívelő tényező) és az értékelési időt (egyénen belüli tényező) képviselte. Adott esetben az egyszerű hatások F-tesztjeit alkalmazták, hogy megvizsgálják az egyes csoportok időbeli tendenciáit a teljes ANOVA után. Páronkénti összehasonlítást Fisher LSD-jével végeztünk. Spearman rangkorrelációját (r) alkalmazták az eredménymérések közötti korreláció vizsgálatára időn belül és időnként. Az elemzéseket a SAS Statistics Software 9.2 (SAS Institute, Cary NC) verziójával végeztük. A statisztikai szignifikanciát az a =, 05 alapján határoztuk meg.

Asztal 1

Az anyák demográfiai jellemzői és a terhesség kimenetele

Jellemző CTL (n = 17)
Átlag ± SECH (n = 3) *
Átlagos ± SEp-érték #

Anya életkora (év)	28,9 ± 0,7	31,3 ± 1,2	.21
BMI (kg/m 2)	23,6 ± 0,8	21,5 ± 0,9	.31
Terhesség előtti ciklus napja	8,6 ± 1,1	7,7 ± 1,2	.71.
Az első trimeszter tanulmányi napja †	93,3 ± 2,6	97 ± 7,6	.60
A harmadik trimeszter tanulmányi napja	227,8 ± 2,0	212,0 ± 0,6	.005
Gesztációs életkor a szüléskor (hét)	39,7 ± 0,3	38 ± 1,0	.13.
Születési súly (g)	3582 ± 96	2514 ± 421	.001
Születési súly percentilis	55,2 ± 6,0	12 ± 9,1	.003

Eredmények

A tantárgy jellemzői

Minden terhesség szingulett volt, és az alanyok többsége kaukázusi, 90% (18/20). A klinikai és demográfiai jellemzőket az 1. táblázat mutatja be. Nem volt szignifikáns különbség a nem magas vérnyomás (CTL) között, és a nőknél komplikált hipertónia (CH) alakult ki életkorban, testtömeg-indexben (BMI), terhesség előtti ciklus napban, a terhesség korai vizsgálatának napjában és a terhesség korában a szülés során (1. táblázat). Jelentős különbség volt a CTL és a CH között a harmadik trimeszterben, ahol a CTL-eket tizenhat nappal később vizsgálták, mint a CH-t. Az újszülöttek születési súlya és születési százaléka szignifikánsan alacsonyabb volt a CH alanyokban a CTL-hez képest (p = 0,001, illetve p = 0,01). A CH újszülöttek közül kettő kicsi volt a terhességi életkor szempontjából (1. és 5. születési súlyú percentilis), míg a harmadik CH újszülött a 30. percentilisben volt. A CTL újszülöttek súlya a 15. és a 95. percentilis között mozgott.

A hemosztatikus vizsgálatok átlagát és SE-jét mindkét csoportban a 2. táblázat tartalmazza, az 1. és a 2. ábra mutatja be 2 .

Alvadás

Longitudinális vizsgálatunk kiemeli a terhesség előtt kezdődő és a terhességen átmenő koagulációs és fibrinolízis kaszkádok változásainak időbeli jellegét. Kezdetben a fibrinogén (és valószínűleg a trombinképződés) növekedése normális terhesség esetén következik be. A késői terhesség során a T-Pa fokozza a fibrinolízist, azonban a fibrinogén tartós növekedése a PAI-1 egyidejű növekedésével párosulva a koaguláció irányába tolhatja el az egyensúlyt. CH esetén a T-Pa tovább növekszik, talán kompenzáló válaszként a túlzott koagulációra és a hipertóniás-bonyolult terhességre jellemző mikrotrombusok képződésére vagy potenciálisan az endothelialis sérülésre utalóan.

Köszönetnyilvánítás

A kutatásokat a Vermonti Egyetemen, Burlington, VT végezték

Támogatás: NIH HL 71944 (IMB) M01 RR109 (UVM GCRC)

Rövidítések

CTL	ellenőrzés
CH	bonyolult magas vérnyomás
PAI-1	plazminogén aktivátor inhibitor-1
T-Pa	szövet típusú plazminogén aktivátor

Lábjegyzetek

Kiadói nyilatkozat: Ez egy szerkesztetlen kézirat PDF-fájlja, amelyet kiadásra elfogadtak. Ügyfeleink számára nyújtott szolgáltatásként a kéziratnak ezt a korai változatát biztosítjuk. A kézirat átmásolásán, szedésén és a kapott bizonyíték felülvizsgálatán átesik, mielőtt a végső hivatkozható formában közzétennék. Felhívjuk figyelmét, hogy a gyártási folyamat során olyan hibákat fedezhetnek fel, amelyek befolyásolhatják a tartalmat, és a naplóra vonatkozó minden jogi felelősségvállalás vonatkozik.