Az étrendi halolaj növeli a zsír felszívódását és a széklet epesav-tartalmát anélkül, hogy megváltoztatná az epesav szintézisét 20 d-es elválasztó patkányokban masszív ileocecalis reszekció után

Tárgyak

Absztrakt

Bevezetés:

Az étrendi halolaj (FO) beszámolt arról, hogy az ileocecalis reszekció (ICR) után csökkenti a széklet zsírkiválasztását a rövid bél szindróma (SBS) elválasztó patkány modelljében, és megváltoztatja az epesav szekréciójának és szintézisének változását felnőtteknél. Feltételeztük, hogy az étkezési FO a kukoricaolajjal (CO) összehasonlítva részben a megnövekedett máj BA szintézis és a luminal BA koncentrációk miatt növeli a bél zsír felszívódását az elválasztott SBS patkányokban.

Mód:

Az ICR átesése után 20 d-os patkányokat etettek ad lib 7 napig CO vagy FO diétával, amely 5% szacharóz-polibehenátot (SPB) tartalmaz, az étrendi zsírfelszívódás markerét. Meghatároztuk a széklet zsírsav, a széklet és a belek luminal BA-ját, a koleszterin-7α-hidroxiláz (Cyp7α1) és a szterin-12α-hidroxiláz (Cyp8β1) máj mRNS-expresszióját, valamint a szérum 7α-hidroxi-4-kolesztén-3-1 (7αC4) szintjét.

Eredmények:

A CO-ICR patkányokkal összehasonlítva az FO-ICR patkányok magasabb intesztinális felszívódást mutattak a teljes zsírban és a legtöbb egyedi zsírsavban. Bár az FO-ICR patkányokban a száraz széklet grammjára eső BA-tartalom nőtt, a maradék jejunum BA-tartalma, a BA bioszintetikus enzimek máj mRNS-expressziója, a Cyp7α1 és Cyp8β1 vagy a szérum 7αC4, a BA szintézis.

Következtetés:

Az étrendi FO növeli az étrendi zsír felszívódását anélkül, hogy növelné a máj BA szintézisét az elválasztott SBS patkányokban.

Ebben a vizsgálatban szacharóz-polibehenátot (SPB) alkalmaztak bélmarkerként az étrendi zsír felszívódásának mérésére. Az SPB egy nem felszívódó étkezési zsír, amely hidrolízis termékének, a behénsavnak, a legtöbb étrendi zsírban nem található természetes zsírsavnak a gázkromatográfiás elemzésével könnyen mérhető. A teljes és az egyedi zsírsav felszívódását a behénsav és más zsírsavak arányából számítják ki az étrendben és a székletben (7). A BA metabolizmusát a széklet és a belek luminalis BA tartalmának, valamint a máj BA szintézisének markereinek mérésével vizsgálták, beleértve a koleszterin 7α-hidroxiláz (Cyp7α1) májsebesség-expresszióját, a BA szintézisében a sebességkorlátozó enzimet és a szterin 12α-hidroxiláz (Cyp8β1), a kolinsav-bioszintézis meghatározója és a 7α-hidroxi-4-kolesztén-3-1 (7αC4) szérumszintje, egy BA bioszintetikus útközbenső termék, amelynek szintje korrelál a máj Cyp7α1 aktivitásával és a máj BA szintézisével (8).

Eredmények

A testtömeg változásai

1.ábra mutatja a preoperatív testtömeg napi százalékát ICR patkányokban a műtét utáni 7 d táplálkozási időszak alatt. A műtét előtti testtömeg hasonló volt a két csoportban (47,26 ± 4,20 g az ICR patkányokban, akik CO-étrendet tápláltak (CO-ICR csoport), és 47,70 ± 5,44 az ICR patkányokban, akik FO étrendet tápláltak (FO-ICR csoport). A két ICR csoportból reszektált bélszegmensek hossza hasonló volt (26,2 ± 2,7 cm a CO-ICR csoportban és 26,5 ± 3,6 cm az FO-ICR csoportban). A műtét utáni testtömeg mindkét csoportban körülbelül 13% -kal csökkent 1 nappal a műtét után. Mind a CO-ICR, mind az FO-ICR patkányok a 4. posztoperatív napra visszanyerték preoperatív súlyukat, és a 7. posztoperatív napon a súlyok 58,76 ± 7,11 g voltak a CO-ICR csoportban és 61,51 ± 5,35 g az FO-ICR csoportban.

növeli

Napi testtömeg. A műtétet 20 d éves korban végezték. A napi posztoperatív testtömeg a műtét előtti súly% -ában van kifejezve (100% -os pontozott vonal). Nyílt körök: kukoricaolaj – ileocecalis reszekciós csoport (n = 7); kitöltött körök: halolaj – ileocecalis reszekciós csoport (n = 7) patkányok.

Az összes étrendi zsír és az egyes zsírsavak felszívódása

Az összes étkezési zsír felszívódás (%) hét FO-ICR patkány közül hatban magasabb volt, mint a megfelelő CO-ICR társaiké, így az összes étrendi zsír felszívódás

12% -kal magasabb az FO-ICR csoportban, mint a CO-ICR csoportban (37,89 ± 12,47 vs. 25,38 ± 8,31, P 2. ábra

A széklet BA és a Bél Luminal BA tartalma

Valamennyi FO-ICR patkány székletének BA-tartalma magasabb volt (μmol/g száraz széklet), mint egyező CO-ICR társaiké (FO-ICR csoport: 32,49 ± 5,95, összehasonlítva a CO-ICR csoporttal: 24,78 ± 5,74; P 2 = 0,6926, P 3. ábra

A bél luminális BA tartalma a jejunum maradványaiban 20 d-os kukoricaolaj-ileocecalis reszekció során (n = 6, fehér oszlop) és halolaj – ileocecalis reszekció (n = 6, szürke oszlop) patkányok. I., II., III. És IV x tengely: a jejunum maradvány négy kvartilisje a proximálistól a disztálisig. BA, epesav.

A máj mRNS expressziója a Cyp7α1 és Cyp8β1, valamint a szérum 7αC4 szinteken

A máj BA szintézisét a máj mRNS expressziójának mérésével értékeltük a Cyp7α1 és Cyp8β1, valamint a szérum 7αC4 szintjét. Ahogy látható 2. táblázat, sem a Cyp7α1 és Cyp8β1 máj mRNS-expressziója, sem a szérum 7αC4 szintje nem volt különbözõ a CO-ICR és az FO-ICR patkányok között.

Vita

Mód

Fogyókúrák

Alapvető étrendként a folyékony étrendet, a Lieber-DeCarli Regular Control Patkánytáplálást, Dyets # 710027 (Dyets, Bethlehem, PA) alkalmazták. Az SPB-t Ryan Temel (Wake Forest University Health Sciences Patológiai Tanszék – Lipidtudományi Tanszék) adományozta. Az FO és CO diétákat 10,4 ml FO (menhadenolaj, Dyets # 402940,) vagy CO plusz 2,6 g SPB felhasználásával készítettük alaposan 210,69 g alaptáplálékkal elkeverve, 1 liter víz hozzáadása előtt. Ezt az elegyet ezután 30 másodpercig homogenizáltuk Polytron-szerű keverővel, a gyártó utasításainak megfelelően. Mindkét étrend tartalmazta

5% (g zsír/100 g étrend, w/w) SPB. A FO diéta 18,3% (w/w) FO-t és 16,7% (w/w) CO-t tartalmazott, míg a CO-diéta 35% (w/w) CO-t tartalmazott. A két étrend táplálkozási profilját a 3. táblázat . Az étrendi zsírsavakat kivontuk (19) és elemeztük (20). Az étrendeket 4 ° C-on tároltuk, és az elkészítéstől számított 48 órán belül felhasználtuk.

Az SBS állatmodellje

A vizsgálat kísérleti protokollját a Wake Forest Egyetem Egészségtudományi Intézményi Állattenyésztési és Felhasználási Bizottsága hagyta jóvá. Tizennégy hím elválasztó Sprague-Dawley patkányt különféle almokból választottak el gátjaiktól 20 napos korukban. Az ICR műtétet a korábban leírt módon hajtották végre (21). Röviden, a műtét aszeptikusan történt, az eljárás során az érzéstelenítéshez inhalált 2% izofluránt és oxigént használtak. A bélszakaszt az 5. és a 6. mesentericus ér között az ileocecalis kereszteződéshez közeli és a cecumtól 1 cm-re disztálódó felszálló vastagbélben távolítottuk el, miután a mesenterialis ereket lekötöttük. Ez átlagosan 26 cm vékonybél eltávolítását eredményezi, ami volt

A vékonybél 50% -a. A jejunum és a proximális vastagbél maradékát end-to-end anasztomizálták. A műtét után a patkányokat 1 ml meleg sóoldattal hidratáltuk intraperitoneális csepegtetéssel, és a hasat bezártuk. A patkányokat egy csecsemőinkubátorban tartottuk 35 ° C-on a műtét után legalább 30 percig, amíg az érzéstelenítésből teljesen ki nem gyógyult, majd visszatértük a hagyományos egyedi tartóketrecekbe. A patkányokat két csoportra osztottuk a reszekált vékonybél testtömegének és hosszának egyeztetésével, és CO-diétával (CO-ICR) vagy FO-diétával (FO-ICR) etettük, mindkettő 5% SPB-t tartalmazott, 7 napon át a műtét után. . A víz csak a műtét utáni első 24 órában volt elérhető, amikor a folyékony étrend minimális volt.

A széklet zsírsavjának elemzése és a zsír felszívódásának kiszámítása

Friss foltmintákat gyűjtöttünk az ICR utáni 7. etetési nap végén. Körülbelül 160–200 mg nedves székletet szárítottunk N2-fúvással 70 ° C-on, aminek eredményeként

40–80 mg száraz széklet. Zsírsavakat extraháltunk a száraz székletből (19), elszappanosítottuk, metileztük és gázkromatográfiával elemeztük (20). Az abszorbeált összes zsír és az egyes zsírsavak frakcióit az étrendben és a székletben lévő behénsav és más zsírsavak arányából számoltuk ki, Jandacek és mtsai. (7).

A széklet és a bél luminális BA mérései

Friss foltos székletmintákat gyűjtöttünk az utolsó 3 napos etetés során, és egyesítettük. Két gramm összegyűjtött székletmintát egy éjszakán át vákuumkemencében szárítottunk 70 ° C-on. Körülbelül 0,21–0,37 g száraz ürüléket extraháltunk Dawson leírása szerint et al. (22) és enzimatikus módszerrel határozták meg a teljes BA-tartalmat (23).

Egy külön kísérletben 12 ICR patkányt elpusztítottak a CO (n = 6) vagy FO diéták (n = 6) 7 napig az ICR után. A maradék jejunumot a pylorustól 4 cm távolságra és a reanastomosis helyétől 1 cm távolságra leválasztottuk. A maradék jejunum átlagos hossza 38,4 ± 6,6 cm volt CO-ICR patkányokban és 37,7 ± 4,6 cm FO-ICR patkányokban. A maradék jejunumot ezután egyenlően felosztották négy I – IV szegmensre a proximalistól a distalisig. Az egyes szegmensek luminális tartalmát összegyűjtöttük, és a BA koncentrációkat a luminális tartalomban enzimatikus vizsgálattal (Colorimetric Total Epe Acids Assay Kit; Diazyme Laboratories, Poway, CA) mértük.

A máj mRNS expressziójának mérése a Cyp7α1 és Cyp8β1, valamint a szérum 7αC4

A teljes RNS-t a májból TRIzol Reagens (Invitrogen, Grand Island, NY) alkalmazásával extraháltuk, a gyártó javaslatának megfelelően. A cDNS-t 1 ug RNS-ből szintetizáltuk véletlenszerű hexamer primerek és egy Transcriptor First Strand cDNS szintézis készlet segítségével (Roche Applied Science, Indianapolis, IN). Az mRNS expressziójának számszerűsítéséhez minden valós idejű PCR reakcióban 25 ng RNS-ből szintetizált cDNS-t összekevertünk 2x SYBR Green PCR Master Mix-el (Roche Applied Science) és 500 nmol/l előre és reverz primerekkel, és a reakciót 7500 Fast Real-Time PCR rendszerrel (Applied Biosystems, Carlsbad, Kalifornia) elemeztük. A bemutatott értékek háromszoros meghatározások átlagai; az expressziót 18S riboszomális RNS alkalmazásával normalizáltuk. A valós idejű PCR mérések primer szekvenciáit a Roche Universal Probe Library tervezte (Probe Finder tervezte), vagy a megadott referenciákból szerezték be. Az alkalmazott patkány primer szekvenciák a következők voltak: Cyp7a1: 5′-GGAGCTTATTTCAAATGATCAGG-3 ’és 5′-CACTCTGTAAAGCTCCACTCACTT-3’; Cyp8β1 (24. hivatkozás): 5'-GGCTGGCTTCCTGAGCTTATT-3 'és 5'-ACTTCCTGAACAGCTCATCGG-3'; és 18S riboszomális RNS (24. hivatkozás): 5'-GTAACCCGTTGAACCCCTT-3 'és 5'-CCATCCAATCGGTAGTAGCG-3'.

A patkányokat az ICR és a szérum összegyűjtése után a 7. etetési nap végén lefejeztük. A szérum 7αC4-et folyadékkromatográfia-tandem tömegspektrometriával (8) mértük az Immunokémiai Core Laboratóriumban (Mayo Clinic, Rochester, MN).

Statisztikai elemzések

Minden eredményt átlag ± SD-ben fejezünk ki. A két csoport közötti átlagértékeket a Student's segítségével hasonlítottuk össze t-teszt. Pearson-korrelációt használtunk két változó kapcsolatának elemzésére. A P értéke

Pénzügyi támogatási nyilatkozat

Ezt a tanulmányt a Gyermekgyógyászati ​​Osztály (Q.Y.) fejlesztési alapja és az Országos Egészségügyi Intézet (DK047987) támogatta a P.A.D.

Hivatkozások

Vanderhoof JA, Park JH, Herrington MK, Adrian TE. Az étkezési menhadenolaj hatása a nyálkahártya adaptációjára patkányokban a vékonybél reszekciója után. Gasztroenterológia 1994;106.: 94–9.

Kollman KA, Lien EL, Vanderhoof JA. Az étrendi lipidek befolyásolják a bél adaptációját a bél hatalmas reszekciója után. J Pediatr Gastroenterol Nutr 1999;28.: 41–5.

Yang Q, Kock ND. Az étrendi halolaj hatása a bél adaptációjára 20 napos elválasztó patkányokban hatalmas ileocecalis reszekció után. Pediatr Res 2010;68: 183–7.

Sukhotnik I, Mor-Vaknin N, Drongowski RA, Coran AG, Harmon CM. Az étrendi zsír hatása a zsír felszívódására, valamint az egyidejű plazma és szöveti zsírösszetételre rövid bél szindróma patkány modelljén. Pediatr Surg Int 2004;20: 185–91.

Jonkers IJAM, Smelt AHM, Princen HMG és mtsai. A halolaj fokozza az epesav szintézist a hipertrigliceridémiában szenvedő férfi betegeknél. J Nutr 2006;136: 987–91.

Smit MJ, Temmerman AM, Wolters H, Kuipers F, Beynen AC, Vonk RJ. Diétás halolaj által kiváltott változások az intrahepatikus koleszterin transzportban és az epesav szintézisében patkányokban. J Clin Invest 1991;88: 943–51.

Jandacek RJ, Heubi JE, Tso P. Újszerű, nem invazív módszer a bél zsírfelszívódásának mérésére. Gasztroenterológia 2004;127.: 139–44.

Camilleri M, Nadeau A, Tremaine WJ és mtsai. A szérum 7alpha-hidroxi-4-koleszten-3-on (vagy 7alphaC4) mérése, az epesav felszívódásának helyettesítő tesztje az egészség, az ileumbetegség és az irritábilis bél szindróma folyadékkromatográfia-tandem tömegspektrometriával. Neurogastroenterol Motil 2009;21: 734–43.

Morin CL, Grey VL, Garofalo C. A lipidek hatása a bél adaptációjára a reszekció után. In: Robinson JWL, Dowling RH, Riecken EO, szerk. A bél adaptációjának mechanizmusa. Lancaster: MTP Press, 1981: 175–85.

Sukhotnik I, Mor-Vaknin N, Drongowski RA, Miselevich I, Coran AG, Harmon CM. Az étrendi zsír hatása a korai morfológiai béladaptációra rövid bél szindrómában szenvedő patkányokban. Pediatr Surg Int 2004;20: 419–24.

Thomson AB, Hunt RH, Zorich NL. Áttekintő cikk: olestra és emésztőrendszeri biztonsága. Aliment Pharmacol Ther 1998;12.: 1185–200.

Gyűrűk EH, Minich DM, Vonk RJ, Stellaard F, Fetter WP, Verkade HJ. A zsír felszívódásának funkcionális fejlődése a korai és koraszülöttek között szorosan összefügg a hosszú láncú zsírsavak felszívódásának képességével a bél lumenéből. Pediatr Res 2002;51: 57–63.

Bérard AM, Dumon MF, Darmon M. Az étrendi halolaj az egér májában fokozza a koleszterin-7alfa-hidroxiláz mRNS szintjét, ami az epesav és a koleszterin kiválasztásának növekedéséhez vezet. FEBS Lett 2004;559: 125–8.

Smit MJ, Verkade HJ, Havinga R és munkatársai. Az étrendi halolaj patkányokban fokozza az epesav által kiváltott koleszterin szekréciót az epébe. J Lipid Res 1994;35: 301–10.

Levy R, Herzberg GR. Az étrendi halolaj és a kukoricaolaj hatása az epe áramlására és összetételére patkányokban. Nutr Res 1995;15: 85–98.

Gälman C, I. Arvidsson, Angelin B, Rudling M. A máj koleszterin-7alfa-hidroxiláz aktivitásának monitorozása a perifériás vérben lévő stabil epesav közbenső 7-alfa-hidroxi-4-koleszten-3-on vizsgálatával. J Lipid Res 2003;44.: 859–66.

Honda A, Yamashita K, Numazawa M és mtsai. A 7alpha-hidroxi-4-koleszten-3-on rendkívül érzékeny mennyiségi meghatározása emberi szérumban LC-ESI-MS/MS segítségével. J Lipid Res 2007;48: 458–64.

Fallon EM, Le HD, Puder M. A parenterális táplálkozással összefüggő májbetegségek megelőzése: az omega-3 halolaj szerepe. Curr Opin Szervátültetés 2010;15: 334–40.

Bligh EG, Dyer WJ. Gyors módszer a teljes lipidek extrahálására és tisztítására. Can J Biochem Physiol 1959;37: 911–7.

Metcalfe LD, Schmitz AA, Peika JR. Zsírsav-észterek gyors előállítása lipidekből gázkromatográfiás elemzés céljából. Anal Chem 1966;38: 514–5.

Yang Q, Kock ND. Bél adaptációja 20 napos elválasztó patkányok masszív ileocecalis reszekcióját követően. J Pediatr Gastroenterol Nutr 2010;50: 16–21.

Dawson PA, Haywood J, Craddock AL és munkatársai. Az ileum epesav transzporter célzott törlése kiküszöböli az epesavak enterohepatikus ciklusát egerekben. J Biol Chem 2003;278: 33920–7.

Mashige F, Tanaka N, Maki A, Kamei S, Yamanaka M. Az összes epesav közvetlen spektrofotometriája a szérumban. Clin Chem 1981;27.: 1352–6.

Wooton-Kee CR, Cohen, DE, Vore M. Megnövekedett koleszterin-7alfa-hidroxiláz expresszió és az epesav-készlet nagysága a szoptató patkányban. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2008;294: G1009–16.

Köszönetnyilvánítás

Köszönjük April Roncának és Ryan Temelnek, hogy nagylelkűen ellátta a hím elválasztó patkányokat és az SPB-t.

Szerzői információk

Hovatartozások

Gyermekgyógyászati ​​Klinika, Neonatológiai Osztály, Wake Forest Egyetem Orvostudományi Kar, Winston-Salem, Észak-Karolina

Qing Yang és Yuegang Chen

Belgyógyászati ​​Klinika, Gasztroenterológiai Szakosztály, Wake Forest Egyetem Orvostudományi Kar, Winston-Salem, Észak-Karolina

Tian Lan és Paul A. Dawson

Patológiai – Lipidtudományi Tanszék, Wake Forest Egyetem Orvostudományi Kar, Winston-Salem, Észak-Karolina

Tian Lan és Paul A. Dawson

A PubMed Google Scholar alkalmazásban is kereshet erre a szerzőre

A PubMed Google Scholar alkalmazásban is kereshet erre a szerzőre

A PubMed Google Scholar alkalmazásban is kereshet erre a szerzőre

A PubMed Google Scholar alkalmazásban is kereshet erre a szerzőre

Levelezési cím

Jogok és engedélyek

Erről a cikkről

Idézd ezt a cikket

Yang, Q., Lan, T., Chen, Y. et al. Az étrendi halolaj növeli a zsír felszívódását és a széklet epesav-tartalmát anélkül, hogy megváltoztatná az epesav szintézisét 20 d-es elválasztó patkányokban masszív ileocecalis reszekció után. Pediatr Res 72, 38–42 (2012). https://doi.org/10.1038/pr.2012.41

Beérkezett: 2011. október 25

Elfogadva: 2012. február 29

Publikálva: 2012. március 23

Kibocsátás dátuma: 2012. július

További irodalom

A szalmonellózis kialakulása a bioaktív élelmiszer-vegyületek hatására

  • Ajay Kumar
  • , Abimbola Allison
  • , Monica Henry
  • , Anita Scales
  • & Aliyar Cyrus Fouladkhah

Mikroorganizmusok (2019)

Fontos-e az ileocecalis szelep fenntartása a bél adaptációs mechanizmusai számára a rövid bél elválasztási patkány modelljében?

  • Guilherme Garcia Barros
  • , Ana Cristina Aoun Tannuri
  • , Ítalo Gerardo Rotondo
  • , Vitor Van Vaisberg
  • , Leandro Silveira Sarmento
  • , Cícero Mendes Neto
  • , Suellen Serafini
  • , Josiane de Oliveira Gonçalves
  • , Maria Cecília Mendonça Coelho
  • & Uenis Tannuri

Nemzetközi Gyermeksebészet (2018)

Halolajjal dúsított mérsékelt zsírtartalmú étrend hatása a bél lipidfelszívódására öregedés által gyorsított hajlamos egérmodellben

  • Kazushi Yamamoto
  • , Yui Iwagaki
  • , Kouichi Watanabe
  • , Tomonori Nochi
  • , Hisashi Aso
  • & Tsuyoshi Tsuduki

Táplálás (2018)

Anatómiai megközelítés a bél adaptációs mechanizmusainak megértéséhez

  • Cathleen M. Courtney
  • , Emily J. Onufer
  • , Kristen M. Seiler
  • & Brad W. Warner

Szemináriumok a gyermeksebészetben (2018)

Az N-3 többszörösen telítetlen zsírsavak stimulálják az epesav méregtelenítést az emberi sejtek modelljeiben

  • Anna Cieślak
  • , Jocelyn Trottier
  • , Mélanie Verreault
  • , Piotr Milkiewicz
  • , Marie-Claude Vohl
  • & Olivier Barbier

Canadian Journal of Gastroenterology and Hepatology (2018)