Az ösztrogénreceptor-modulátorok hatása a morfin indukálta szenzibilizációra az egerek memóriájában

Mahdieh Anoush

1 Farmakológiai és Toxikológiai Tanszék, Gyógyszerészeti Iskola, Zanjan Orvostudományi Egyetem, Zanjan, Irán

Ali Jani

1 Farmakológiai és Toxikológiai Tanszék, Gyógyszerészeti Iskola, Zanjan Orvostudományi Egyetem, Zanjan, Irán

Moosa Sahebgharani

2 Farmakológiai Tanszék, Orvostudományi Kar, Teheráni Orvostudományi Egyetem, Teherán, Irán

Mohammad Reza Jafari

3 Fiziológiai és Farmakológiai Tanszék, Orvostudományi Kar, Zanjan Orvostudományi Egyetem, Zanjan, Irán

Absztrakt

Célkitűzés: Ebben a tanulmányban az ösztradiol-valerát és a raloxifenea szelektív ösztrogénreceptor-modulátor hatása; (SERM) morfin-indukálta szenzibilizációval vizsgálták az egerek memóriáját, a passzív elkerülés feladata szerint.

Módszer: Az egerek morfint vagy ösztradiolt és raloxifent kaptak három napig önmagukban vagy morfinnal kombinálva. 5 napos gyógyszermentes periódus után az alanyok sóoldatot vagy morfiumot kaptak edzés előtti kezelésként, majd ezt megelőzően sóoldatot adták be. A memória visszakeresését egy passzív elkerüléses teszt segítségével értékeltük, mind az edzés, mind a teszt napján.

Eredmények: Az eredmények azt illusztrálták, hogy a morfin háromnapos beadása szenzibilizációt váltott ki a memória visszaszerzésének fokozásával (morfin indukálta szenzibilizáció az egerek memóriájában). Az ösztradiol-valerát önmagában és morfinnal (5 mg/kg) történő háromnapos beadása egyaránt helyreállította az emlékezetet. Másrészről a raloxifen háromnapos adagolása nem volt hatással a memória visszaszerzésére, de az egerek memóriájában csökkent morfium indukálta szenzibilizációt.

Következtetés: A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy kölcsönhatás van az ösztrogén receptor modulátorok és a morfin által indukált szenzibilizáció között az egerek memóriájában.

Bebizonyosodott, hogy az akut és krónikus morfin-expozíció számos hatása más-más módon fejeződik ki a nemek alapján, például anti-nocicepció (18), mozgás (19), valamint a tolerancia és függőség kialakulása (20). Ezenkívül a korábbi kutatások szerint az ösztrogén bebizonyította, hogy befolyásolja a tanulást és a memóriát (21), míg hatékonysága a feladattanulmány tervezésétől (22), a memória típusaitól (23) és a hormon beadásának időtartamától függ (24).

Korábbi jelentések szerint az ösztrogén jelentős szerepet játszik a morfin által kiváltott fájdalomcsillapítással szembeni akut tolerancia kiváltásában (25). Sőt, arról számoltak be, hogy a morfinnal összefüggő kontextuális memória csökkenthető a tamoxifen hatására, és ezt a károsodást betilthatja az ösztradiol-kezelés (26). Másrészt a gerinc kappa- és a mu-opioid receptor hetero-dimerizációja módosítható az ösztrogén gerincvelői szintézisével és a membrán ösztrogén receptorok egyidejű szignálozásával és a nőspecifikus gerinces morfin antinocicepcióval (27). Számos tanulmány készült az ösztrogén és a morfin kölcsönhatásairól, de nincsenek jelentések az ösztrogén morfinnal kiváltott szenzibilizációra gyakorolt hatásáról az egerek tanulásában.

A vizsgálat célja az ösztradiol-valerát és a raloxifen (szelektív ösztrogénreceptor-modulátor; SERM) különféle dózisainak hatásának értékelése volt az egerek memóriájában a morfin által kiváltott szenzibilizációra.

Anyag és módszerek

Jelen vizsgálatban 20,2–29,4 g tömegű hím felnőtt NMRI egereket (állatgyógyászati tanszéken tenyésztett, Gyógyszerészeti Iskola, ISO17025 engedéllyel) használtunk. Az állatokat egy hőmérséklet/nedvességtartalmú (22 ± 3 ° C/45-55% páratartalom) telep telepen helyeztük el, és 12 órás világos/sötét ciklusban tartottuk szabadon hozzáférve az élelemhez és a vízhez, a kísérletek kivételével. A kísérleteket 10:00 és 15:00 között végeztük. Az állatokat a kísérletek előtt legalább 72 órán át a laboratóriumi körülményekhez igazítottuk. Minden kezelési csoport tíz állatot tartalmazott. A protokollokat az állatgondozásra és -használatra vonatkozó nemzeti irányelvek szerint hajtották végre, amelyeket az intézet Etikai Bizottsága hagyott jóvá.

Kábítószerek és vegyszerek:

A morfium-szulfátot Temadból (Irán) szerezték be. Ösztradiol-valerátot, raloxifént és ultraszűrött szezámolajat (az ösztradiol hordozójaként) az Iran Hormone Company-tól vásároltunk. A polietilénglikolt 300 (PEG300) a Merck Schuchardt OHG-tól (Hohenbrunn, Németország) vásároltuk.

A morfin-szulfátot normál sóoldatban (0,9%), az ösztradiol-valerátot szezámolajban és normál sóoldatban (0,9%) emulgeáltuk. A PEG300-at vivőanyagként használtuk a raloxifenhez.

Passzív elkerülő készülék

A passzív elkerülő berendezés tartalmaz egy fadobozt (30 × 30 × 40 cm magasságú), amelynek padlója 29 párhuzamos rozsdamentes acél rúdból (0,3 cm átmérőjű, 1 cm távolságra van egymástól). A rács padlójának közepén egy fa emelvény (4 × 4 × 4 cm) van elhelyezve. Szaggatott stimulátor (Panlab LE12106, Spanyolország) szaggatott áramütéseket (1 Hz, 0,5 mp, 50 V DC) vitt át a rács padlójára. A készülék alkalmazásával egypróbás, passzív elkerülő feladatot hajtottak végre. Mindegyik egeret óvatosan a fa emelvényre helyezték. Amikor az egér lelépett az emelvényről, és mind a négy mancsát a rács padlójára tette, akkor 15 másodpercig áramütést kapott. A retenciós teszt megállapításához minden egyes egeret 24 órával az edzés után ismét az emelvényre helyeztünk, és a visszalépés késleltetését stopperrel rögzítettük. Az időrögzítéshez felső 300 másodperces határidőt osztottak ki.

1. kísérlet: Ez a kísérlet a morfin által kiváltott szenzibilizációt vizsgálta a passzív elkerülési memóriában. Az egyik kontrollcsoportba tartozó állatok 10 ml/kg normál sóoldatot kaptak szubkután (S.C) mind az edzés előtti, mind a teszt előtti beadás során. A másik kontrollcsoport 5 mg/kg (S.C) morfint kapott edzés előtti és sóoldatot teszt előtti kezelésként. Három másik csoport három, 5, 10 és 20 mg/kg morfint kapott intraperitoneálisan (I.P); Öt nap gyógyszermentes időszak után 5 mg/kg morfiumot kaptak előképzésként, majd sóoldat (10 ml/kg, I.P) teszt előtti beadásával.

2. kísérlet: Ez a kísérlet értékelte az ösztradiol-valerát szerepét a morfin által indukált szenzibilizációban a tanulásban. Ezekben a kísérletekben az összes állatcsoport morfint (5 mg/kg, S.C) kapott edzés előtti és sóoldatot (10 ml/kg) teszt előtti kezelésként. Az állatcsoportok egy csoportja 0,45, 0,9 és 1,8 mg/kg ösztradiol-valerátot kapott intraperitoneálisan (I.P.) egyidejű sóoldat-beadással (10 ml/kg, I.P.) három napig. A másik csoport 0,45, 0,9 és 1,8 mg/kg ösztradiol-valerátot (I.P.) kapott egyidejű morfint adva (5 mg/kg, S.C.) három napig.

3. kísérlet: Ez a kísérlet értékelte a raloxifen szerepét a morfin által kiváltott szenzibilizációban a tanulásban. Ebben a kísérletben az állatcsoportok 10 ml/kg fiziológiás sóoldatot vagy 5 mg/kg morfiumot (S.C) kaptak edzés előtti és sóoldatot (10 mg/kg) teszt előtti kezelésként. Az állatcsoportok egy csoportja 5, 10 és 20 mg/kg raloxifent (I.P) kapott, majd sóoldat beadása (10 ml/kg, I.P) három napig. A másik készlet 5, 10 és 20 mg/kg raloxifent (IP) és morfint (5 mg/kg, S.C) kapott három napig.

A hatás (3 nap különböző dózisú morfin + edzés előtti sóoldat vagy morfin

+ fiziológiás sóoldat előtti teszt) a lecsökkentési késleltetéseknél a releváns kontrollcsoportokhoz képest. Mindegyik érték 10 állat mediánját és kvartilisét jelenti.

Korlátozás

A jelen vizsgálatot egy SERM-rel (raloxifen) végezték, amely egy teljes ösztrogén receptor antagonista, például a fulvestrant jobb volt, mint ahelyett, hogy.

Következtetés

Jelen tanulmány eredményei feltárták az ösztrogénreceptor-modulátorok és a morfin által kiváltott szenzibilizáció közötti kölcsönhatást az egerek tanulásában.