American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine

Absztrakt

Servei de Pneumologia és Anatomía Patológica, valamint Unidad de Investigación, Son Dureta Universitari Kórház, Palma de Mallorca, Spanyolország

Absztrakt

A krónikus obstruktív tüdőbetegségben (COPD) szenvedő betegek gyakran fogynak betegségük során. Feltételeztük, hogy ennek oka lehet vázizom apoptózis. Ennek a lehetőségnek a vizsgálatához 15 COPD-ben szenvedő betegnél (8 normál testtömeg-indexű [BMI] és 7 alacsony [2] BMI-vel rendelkező] 8 betegnél, 8 egészséges önkéntesnél és 6 ülő személynél ortopédiai műtéten átesett quadriceps femoris biopsziát kaptunk (mindkét csoport normális BMI). A csontvázizom apoptózisát transzferáz-mediált dUTP nick end jelzés (TUNEL) technikával és a poli (ADP-ribóz) -polimeráz proteolitikus fragmensek immundetektálásával értékeltük. COPD-ben szenvedő betegeknél is meghatározták a testtűrést cikloergométeren. Megállapítottuk, hogy a vázizom apoptózis (mindkét technikával) nőtt a COPD-ben és alacsony BMI-ben szenvedő betegeknél a másik három csoporthoz (p cachexia; COPD; krónikus bronchitis; emphysema; testmozgás) képest

Krónikus obstruktív tüdőbetegségben (COPD) szenvedő betegeknél gyakran fordul elő megmagyarázhatatlan fogyás a vázizom atrófiája miatt (1, 2). Ez klinikailag releváns, mert korlátozza mozgásképességüket és veszélyezteti életminőségüket (1). Ezenkívül negatív és független prognosztikai tényező (3, 4). Mégis, mivel a COPD-ben a vázizmok atrófiájának hátterében álló molekuláris mechanizmusok nem ismertek (5, 6), nem lehet új terápiás alternatívákat kifejleszteni (7).

Minden résztvevő írásbeli beleegyezést adott, miután teljes körű tájékoztatást kapott a vizsgálat céljáról, jellemzőiről és jellegéről, amelyet intézményünk Etikai Felülvizsgálati Testülete hagyott jóvá.

15 stabil COPD-s beteget vettünk fel osztályunk ambulanciájáról. Egyikük sem igényelte a kórházi felvételt vagy a kezelés megváltoztatását az előző 3 hónap során. A kezelés hosszú hatású β2 agonistákat, ipratropium-bromidot, teofillint és/vagy inhalációs szteroidokat tartalmazott. Egyik sem kapott orális szteroidokat. Mivel korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a 20 kg/m 2-nél alacsonyabb testtömeg-index (BMI = súly [kg]/magasság [m 2]) alacsony COPD-prognózissal járt, a betegeket e küszöbérték szerint csoportosították. érték. A BMI hét betegnél alacsonyabb volt, mint 20 kg/m 2 (17,5 ± 0,5 kg/m 2 [átlag ± SEM]; tartomány, 16,4–18,6 kg/m 2), és normális volt a maradék nyolc betegnél (24,8 ± 0,7 kg/m 2; tartomány: 23,2–26,3 kg/m 2). Egészséges önkénteseket (n = 8) a helyi újságokban történő hirdetéssel toboroztak az általános népességből (BMI, 25,4 ± 0,6 kg/m 2; tartomány: 24,0–26,7 kg/m 2). A csípő- vagy térdműtéten átesett betegeket (n = 6) intézményünk megfelelő osztályaiból toborozták (BMI, 26,4 ± 0,6 kg/m 2; tartomány: 24,8–27,9 kg/m 2), és egyébként egészséges egyének voltak, akik nem szteroid gyulladáscsökkentők voltak. csak terápia.

Spirometriát (GS; Warren E. Collins, Braintree, MA) minden résztvevőnél elértünk (13). COPD-ben szenvedő betegeknél a szénmonoxid (D l CO) (GS; Warren E. Collins) és az artériás vérgázok (helyi érzéstelenítésben radiális artéria punkcióval [IL BG3, Izasa, Spanyolország]) egylégzéses diffúziós képessége is megmaradt. eltökélt. A spirometrikus és a Dl CO referenciaértékek egy mediterrán populáció értékei voltak (14, 15). Valamennyi résztvevő (az ortopédiai betegek kivételével) növekményes, tünetekkel korlátozott testtesztet végzett egy cikloergométeren (CPXII; Warren E. Collins). Az oxigénfelvétel csúcsát (V o 2 csúcs) a kilélegzett levegő elemzésével határoztuk meg. Referenciaértékek voltak Jones és munkatársai (16).

A tűbiopsziákat helyi érzéstelenítésben a quadriceps femoris laterális részéből (a comb közepén) szereztük be, amint arról laboratóriumunk korábban beszámolt (17), kivéve azokat az ortopéd betegeket, akiknél a műtéti beavatkozás során szerezték be őket. Az izommintákat folyékony nitrogénben azonnal lefagyasztották, és elemzésükig -80 ° C-on tárolták.

A vázizom apoptózisának mennyiségét két kiegészítő technikával határoztuk meg: a fluoreszcens transzferáz-közvetített dUTP nick end jelölés (TUNEL) vizsgálatot (18) és a poli (ADP-ribóz) -polimeráz (PARP) proteolitikus fragmensek immundetektálását és mennyiségi meghatározását. Western blot (19).

Az eredményeket átlag ± SEM-ben mutatjuk be. Az immunhisztokémiai meghatározások reprodukálhatóságát a két megfigyelő között osztályon belüli korrelációs együtthatóval teszteltük (24). Egyirányú varianciaanalízis, majd post hoc adott esetben a kontrasztot (LSD) alkalmaztuk a csoportok közötti különbségek statisztikai szignifikanciájának meghatározásához. Az érdekes változók közötti összefüggéseket a kétfarkú Pearson-teszt segítségével tártuk fel. A 0,05 alatti p értéket szignifikánsnak tekintettük.