Határok a táplálkozásban

Elhízottság

Szerkesztette
Anna C. Calkin

Baker Szív és Diabétesz Intézet, Ausztrália

Felülvizsgálta
Michael Kraakman

Columbia University Irving Medical Center, Egyesült Államok

Brenna Osborne

Egészségügyi és Orvostudományi Kar, Koppenhágai Egyetem, Dánia

A szerkesztő és a lektorok kapcsolatai a legfrissebbek a Loop kutatási profiljukban, és nem feltétlenül tükrözik a felülvizsgálat idején fennálló helyzetüket.

magas

  • Cikk letöltése
    • PDF letöltése
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • Kiegészítő
      Anyag
  • Exportálás
    • EndNote
    • Referencia menedzser
    • Egyszerű TEXT fájl
    • BibTex
OSZD MEG

Eredeti kutatás CIKK

  • Liggins Intézet, Aucklandi Egyetem, Auckland, Új-Zéland

Bevezetés

Az egészség és a betegség fejlődési eredete hipotézis azt javasolja, hogy a kedvezőtlen korai életkörülmények, például az optimális szülői táplálkozás, programozhatják az elhízást és a krónikus betegségeket az utódokban (9). Mind az anyai HF, mind az anyai sós étrend függetlenül kapcsolódik az utódok káros programozási hatásaihoz. Az anyai HF (obesogén) diéták elhízást és metabolikus szindrómát programoznak utódokban (10, 11). Az anyák magas sótartalmú étrendje megnövelte az utódok vérnyomását és az érrendszeri káros változásokat, hozzájárulva a szív- és érrendszeri megbetegedések kockázatának növekedéséhez (12, 13). Az anyai HF és sótartalmú étrend együttes hatását az utódok egészségének fejlesztési programozására azonban még nem értékelték alaposan. Bizonyítékok utalnak arra, hogy az anya alacsony fokú gyulladása közvetítheti az utódok programozási hatásait (14–16). A HF-diéták függetlenül kapcsolódnak az alacsony fokú gyulladás elősegítéséhez (17), és a magas sótartalmú HF-étrendhez való hozzáadásról beszámoltak, hogy súlyosbítják a gyulladásos folyamatokat (7). Ezért várható, hogy az anyai HF és a magas sótartalmú étrend együttesen fokozza az utódok káros programozási hatásait.

Anyagok és metódusok

Állatmodell

1.ábra. A kísérleti tervezés áttekintése. A nőstény Sprague-Dawley patkányok CD-, SD-, HF- vagy HFSD-étrendet fogyasztottak ad libitum a párzást megelőző 21 napban, valamint a terhesség és a szoptatás ideje alatt. A hím utódokat szokásos chow étrendre választották ad libitum. A születés utáni 130. napon (P130) a hím utódokat elemzés céljából plazma- és szövetgyűjtés céljából leöltük.

Plazmaelemzés

A plazmát inzulin és leptin szempontjából kereskedelmi patkányspecifikus ELISA-módszerekkel (Crystal Chem, Chicago, IL, USA) elemeztük. Az interleukin (IL) -1β, IL-6 és a tumor nekrózis faktor α (TNFα) citokineket Quantikine ELISA módszerrel (R&D Systems; Minneapolis, MN, USA) elemeztük. A plazmát glükóz, szabad zsírsavak, trigliceridek, alacsony sűrűségű lipoprotein koleszterin (LDL), nagy sűrűségű lipoprotein koleszterin (HDL), összkoleszterin és laktát dehidrogenáz elemzésére a Hitachi 902 autoanalizátorral (Hitachi High Technologies Corporation, Tokió, Japán) ).

Stromalis vaszkuláris frakció (SVF) izolálása

Az ivarmirigy zsírszövetét azonnal levágták a selejtezett állatokról, és steril foszfáttal pufferolt sóoldatba helyezték. 1 g zsírszövetet finomra aprítottunk, és emésztőpufferbe helyeztük (Krebs-ringer-hidrogén-karbonát-puffer; 0,155 M NaCl, 0,2 M NaHC03, 0,1 M KH2PO4, 0,12 M KCl, 0,05 M CaCl2, 0,1 M MgS04 és 1 M HEPES, pH-beállítással) 7,35–7,45; 4% BSA, 2 mg/ml kollagenáz). Az elegyet rázóvizes fürdőben 37 ° C-on 45 percig inkubáltuk, majd leszűrtük. Az átfolyást megpördítettük, és az SVF pelletet összegyűjtöttük és TRI Reagensben (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) tároltuk a későbbi elemzés céljából.

Szövettani elemzés

Az adipocita szövettanát a korábban leírtak szerint végeztük (22). Retroperitonealis zsírszövetminták (n = 7/csoport) 10% semleges pufferolt formalinban rögzítettük, paraffinba ágyazottuk, majd metszettük (8 µm) egy Leica RM 2135 rotációs mikrotóm alkalmazásával (Leica Instruments, Nussloch, Németország). Normál hematoxilin és eozin festést végeztünk. A tárgylemezeket fénymikroszkóppal néztük meg 10x objektív mellett, és digitális képeket készítettünk a NIS Elements-D szoftverrel (Nikon 800, Tokió, Japán). A képeket vakon és manuálisan elemezték az ImageJ 1.46v szoftverrel (US National Institutes of Health, Bethesda, USA). Minden szakaszból négy reprezentatív látómezőt elemeztünk az átlagos adipocita terület meghatározásához.

Gén expressziós elemzés

Az RNS-t izoláltuk a retroperitoneális zsírszövetből és az SVF-ből TRI reagenssel (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA). Az RNS-t a májból és a felső bélből (duodenum) izoláltuk az RNeasy Mini Kit (Qiagen, Hilden, Németország) alkalmazásával. Az RNS-koncentrációt a NanoDrop 1000 spektrofotométerrel (Thermo Fisher Scientific Inc., Wilmington, DE, USA) határoztuk meg. A reverz transzkripciót a High-Capacity cDNS Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems, Warrington, Egyesült Királyság) segítségével végeztük. Kvantitatív valós idejű polimeráz láncreakció (RT-qPCR) elemzést végeztünk az ABI 7900HT Fast RT-qPCR rendszeren, a Sequence Detection System 2.4 szoftver segítségével az mRNS expressziójának mennyiségi meghatározásához TaqMan Fast Advanced Master Mix és előre megtervezett TaqMan Gene Expression Assays segítségével Biosystems, Warrington, Egyesült Királyság; S1 táblázat kiegészítő anyagban). A minták közötti változékonyság ellenőrzésére a gének relatív mennyiségét normalizáltuk peptidilprolil-izomeráz A-ra (Ppia), hipoxantin – guanin-foszforibozil-transzferáz 1 (Hprt1) és/vagy glicerinaldehid-3-foszfát-dehidrogenáz (Gapdh) kifejezés. Az adatok elemzéséhez összehasonlító CT-módszert (2 –ΔΔCT) alkalmaztunk (23).

Statisztikai analízis

2. ábra. Adipocita morfológia és adipogén és gyulladásos markerek felnőtt hím utódok retroperitoneális zsírszövetében. A rögzített retroperitoneális zsírszöveteket metszettük és hematoxilinnal és eozinnal festettük (n = 7/csoport). Állatonként négy reprezentatív képet elemeztek vakon a J 1.48v képen. (A) Reprezentatív képek az egyes csoportokból; a skálasáv 100 µm-t jelent. (B) Átlagos adipocita terület és (C) az adipocita területe a méret szerinti eloszlás szerint. Retroperitonealis zsírszövet gén expressziója (D) Dlk1; (E) Mcp1; (F) Cd11c; és (G) Il-1β; Tnfα; Il-6; Il-10; és Tlr4 (n = 7/csoport). Az adatokat kétirányú varianciaanalízissel elemeztük post hoc Holm – Sidak teszteket végez több összehasonlítás céljából. Az adatokat átlag ± SEM-ben fejezzük ki, ahol *P + P + P + P + P Kulcsszavak: fejlesztési programozás, magas zsírtartalmú étrend, magas sótartalmú étrend, étrendi nátrium, metabolikus gyulladás, inzulinérzékenység

Idézet: Segovia SA, Vickers MH, Harrison CJ, Patel R, Gray C és Reynolds CM (2018) Az anyai magas zsírtartalmú és magas sótartalmú étrendek differenciál programozási hatással vannak a felnőtt hím patkány utódok anyagcseréjére. Elülső. Nutr. 5: 1. doi: 10.3389/fnut.2018.00001

Beérkezett: 2017. február 06 .; Elfogadva: 2018. január 05 .;
Publikálva: 2018. március 07

Anna C. Calkin, Baker Heart and Diabetes Institute, Ausztrália

Michael Kraakman, Columbia Egyetem Orvosi Központ, Egyesült Államok
Brenna Osborne, Új-Dél-Wales Egyetem, Ausztrália