A Cassia acutifolia infúzió hatása az elhízás és a cukorbetegség patkány modelljének glükózszintjére

Raffoul-Orozco Abdel Kerim

1 Kísérleti és Klinikai Terápiás Intézet, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Ávila-González Ana Elisa

1 Kísérleti és Klinikai Terápiás Intézet, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Barajas-Vega Jessica Lucía

1 Kísérleti és Klinikai Terápiás Intézet, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Rodríguez-Razón Christian Martín

2 Laboratóriumi immunológia, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

García-Cobián Teresa Arcelia

1 Kísérleti és Klinikai Terápiás Intézet, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Ramírez-Lizardo Ernesto Javier

1 Kísérleti és Klinikai Terápiás Intézet, Élettani Tanszék, Egészségtudományi Egyetemi Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Rubio Arellano Edy David

3 Laboratóriumi gyógyszerkutatás és fejlesztés, Farmakobiológiai Tanszék, Pontos Tudományok és Mérnöki Központ, Guadalajarai Egyetem, Guadalajara, Mexikó

Absztrakt

Célkitűzések

A tanulmány célja a Cassia acutifolia elhízásra és a glükózszintre gyakorolt hatásainak vizsgálata volt az elhízás és a cukorbetegség patkány modelljében.

Mód

Véletlenszerű szelekció útján 36 Wistar hím patkányt osztottak két kontrollcsoportba, a pozitív és a negatív kontroll csoportba, és négy kísérleti csoportba, amelyek a Cassia acutifolia különböző infúzióit kapták vízben ad libitum.

Eredmények

Az eredmények statisztikailag szignifikáns anti-obesogén hatást mutattak ki (P = 0,02), bár ezt nem tartották klinikailag szignifikánsnak. Ezenkívül a Cassia acutifolia csökkentette a glükózszintet 30 mg/dl-ről 90 mg/dl-re (P = 0,05). Megfigyeltük azonban a máj káros mellékhatásait, a transzaminázszint kétszeres növekedését (P = 0,002) és a vesékben a kreatininszint csökkenését (P = 0,001), és ezek a káros hatások nem voltak életképes magyarázattal.

Következtetés

A Cassia acutifolia anti-hiperglikémiás hatással rendelkezik elhízott cukorbeteg patkányokban. A Cassia acutifolia azonban káros hatásokkal is jár, ezért nem szabad betegeknek beadni.

1. Bemutatkozás

Az Egészségügyi Világszervezet (WHO) szerint a krónikus, nem fertőző betegségek jelentik a világszerte a leggyakoribb morbiditási és halálozási okokat [1]. Az ENSANUT (Táplálkozási és Egészségügyi Országos Teszt) szerint a felnőtt mexikóiak 9,17% -a, ami 6,4 millió embernek felel meg, egy korábbi diabétesz diagnózisról számolt be orvos által [2]. Ezért létfontosságú az új stratégiák meghatározása a cukorbetegek kezelésére.

A 2-es típusú diabetes mellitus (DM2) nagyrészt megelőzhető és kezelhető az étrend és az életmód megváltoztatásával [3]. Mexikó lakosságában azonban ez a fajta kezelés nem hozta meg a várt eredményeket. Ha a megelőzés és a nem farmakológiai kezelések nem elégségesek, farmakológiai kezelésekre van szükség. A legtöbb kezelés jó eredménnyel jár, ha helyesen írják fel őket, a betegség időzítése, adagolása és a beteg igényei alapján. Ezek a tényezők azonban bonyolulttá teszik a kezelést. Így a betegek nagy százaléka ésszerű idő alatt nem éri el a kívánt glükózkontrollt (vagyis a glükózszintet ≤ 100 mg/dL), ami sok beteget elidegenít az ilyen típusú kezeléstől és alternatív kezelést keres [3].

Mexikóban általánosak az alternatív kezelések, különösen az úgynevezett „gyógymódok”. Ezek a gyógymódok gyakran xenobiotikumok, amelyeket egy betegség kezelésére vagy megelőzésére használnak. Ezen gyógymódok egy része, például a táplálékgyógyszerek, fokozott kutatást motivált, mert jó eredményeik voltak. Számos ilyen gyógymód azonban csak anekdotikus bizonyítékokkal támasztja alá hatékonyságukat. Ezen túlmenően ezeknek a gyógymódoknak némelyike a placebo-hatásnak tulajdonítható, és egyes gyógymódoknak akár káros hatásai is lehetnek.

Mexikóban a DM2-ben szenvedő betegek kezelésére általában a „senos de mujer” levelének infúzióját használják, amely angolul női mellként jelent, és amelyet gyakran Senna vagy Cassia acutifolia néven emlegetnek. A növény Afrikában és Ázsiában endemikus, de Mexikóban már megtalálható. A hagyományos gondolkodásmód, sőt néhány szakember javasolja, hogy a nap folyamán infúziót igyon a glükózszint fenntartása érdekében. Annak ellenére, hogy nem végeztek tanulmányokat ennek az állításnak az igazolására, anekdotikus bizonyítékok arra utalnak, hogy a növény fogyasztása jó eredményekkel jár. A tanulmány célja a Cassia acutifolia infúzió glükózszintre gyakorolt hatásának értékelése volt az elhízás és a cukorbetegség patkány modelljében.

2. Anyagok és módszerek

Hím Wistar patkányokat a Guadalajarai Egyetem Egészségtudományi Egyetem Központjának állattartó házából szereztek be. Az állatokat legalább két hétig akklimatizáljuk. A patkányok tömege 100 ± 20 g volt. Korábban nem kaptak semmilyen kezelést, és genetikai változások nélkül voltak. A patkányokat egyenként helyeztük el, és jól szellőztetett állatszobában (25 - 27 ° C) tartottuk, 12 órás világos/sötét ciklus mellett. A patkányok szabadon hozzáférhettek módosított étrendhez (magas kalóriatartalmú és füves patkány chow) és vízhez vagy módosított vízhez (infúzió) ad libitum.

Az állatokat emberségesen kezeltük a Guadalajarai Egyetem Etikai Bizottságának mexikói hivatalos szabványának (NOM-062-ZOO-1999) intézményi irányelveinek és a kísérleti állatok felhasználására és kezelésére vonatkozó nemzetközi irányelveknek megfelelően.

Az elhízást és a DM2-t hiperkalórikus táplálkozási táplálékkal indukálták patkányokban. Az étrendet „Purine, Rodent Chow®” -ból állítottuk elő, amelyet 10 percig egy 90 ° C-on megolvasztott, majd szobahőmérsékleten hagyott sertészsírban merítettek, hogy manipulálható legyen. Elég szacharózt (10 tömeg% száraz tömeg) adtunk hozzá, hogy az élelmiszer teljesen ellepje és homogén keveréket kapjon. Az ételt ad libitum ajánlották fel.

A modellt 10 hetes etetés után hozták létre, ekkor a patkányok nagyobb testtömeget értek el az egészséges kontrollokhoz képest (> 300 g) [4]. A kiegyensúlyozott táplálékkal etetett patkányok (rágcsáló Chow ®) elérték az 180–220 g átlagos súlyt, és negatív kontrollként használtuk őket. Az étrend módosításait az 1. táblázat mutatja be. A kezelés előtt, alatt és után a patkányok testtömegét speciális patkányskálával mértük.

Asztal 1

A táplálkozási információk összehasonlítása, a felhasznált táplálék a Rodent Chow Diet, Purina ® volt

DietStandarHiperkalória

Kalóriasűrűség	3,1 kcal/g	5,9 kcal/g
Fehérjék	18%	14%
Lipidek	24%	38%
Szénhidrát	58%	48%

Az ebben a vizsgálatban alkalmazott modellben a DM2-t hiperglikémiaként határozták meg, amint arról a korábbi vizsgálatok beszámoltak, valamint a polidipszia, a poliuria és a polifágia diagnózisaként. Az élelmiszer-felvételt grammban és a vízfogyasztást milliliterben rögzítették. Ezenkívül vizeletet gyűjtöttünk, és a térfogatot milliliterben rögzítettük. Ez kontrollként és összehasonlításként szolgált a kezelést követően, és az infúzióban lévő Cassia mennyiségének kiszámításához használták.

A „senos de mujer” vagy a Cassia acutifolia növény leveleit, amelyek valójában hüvely alakú gyümölcsök, kiskereskedelmi egészségügyi élelmiszerboltokból szereztek be, felismerhető márka nélkül csomagolták őket, és a betegek kezelésre használták fel őket. A hüvelyeket a guadalajarai egyetem biológusai azonosították. Mindegyiknek öt és hat magja volt, és a napszárítás jellemzői voltak.

Az egyes patkányok infúziójához szükséges vízmennyiséget üvegtartályba adagoltuk. A vizet felforraljuk és kivesszük a sütőből. A vizet ezután csoportok szerint osztották fel, és vagy az egész gyümölcsöt (hüvely és magok), vagy csak a hüvelyeket adták hozzá a szükséges súlynak megfelelően. Ez utóbbi készítmény annak köszönhető, hogy néhány beteg arról számolt be, hogy csak „leveleket” kell hozzáadni. Az oldatot hagytuk lehűlni, mielőtt ad libitum minden patkánynak felajánlották volna. Vegye figyelembe, hogy minden adagolóvíznek volt hálózata, amely megakadályozta, hogy a hüvely vagy egy mag darabjai akadályozzák az infúzió áramlását.

Az állatokat véletlenszerűen két kísérleti és két kontroll csoportba osztottuk. A kísérleti csoportok két változó dózisú alcsoportból álltak, mindegyik alcsoportban 6 patkány:

F1 csoport: 50 mg gyümölcs 50 ml vízben

F2 csoport: 100 mg gyümölcs 50 ml vízben

S1 csoport: 50 mg hüvely 50 ml vízben

S2 csoport: 100 mg-os hüvely 50 ml vízben

Kontroll pozitív csoport: elhízott és hiperglikémiás patkányok

Kontroll negatív csoport: egészséges patkányok (csak a betegség modelljének megállapításához).

A kezelést a betegeknél alkalmazott szokásos gyakorlat szerint végeztük. A 8 hetes beavatkozás befejezése után a patkányokat 12-16 órán át éheztettük, és altatásban felöltettük.

Vérmintákat (kb. 5–8 ml) szívpunkcióval nyertünk. A vérmintákat 1500 fordulat/perc sebességgel 10 percig centrifugáltuk, a felülúszót (szérumot) összegyűjtöttük és -20 ° C-on tároltuk az elemzésig. A szérum glükózkoncentrációt, valamint az alanin-aminotranszferáz (ALT), az aszpartát-aminotranszferáz (AST) és a kreatinin szintjét a biológiai biztonság megítélésére enzimhez kapcsolt kolorimetriás technikákkal határoztuk meg. Az eredményeket tartalmazó számításokat automatizált szoftveres ERBA 1100 spektrofotométerrel végeztük.

Az eredményeket az SPSS 21. verziójával elemeztük. Az adatokat átlag ± szórásként (SD) fejezzük ki. A betegség modell értékeléséhez Mann-Whitney U teszteket használtak, a kontroll és az intervenciós csoportok összehasonlítására Kruskal-Wallis teszteket használtak; P ≤ 0,05 statisztikailag szignifikánsnak tekintettük.

3. Eredmények

Először összehasonlítottuk az egészséges patkányokat (negatív kontroll) a kezeletlen elhízott patkányokkal (pozitív kontroll). Statisztikai különbségeket találtunk a csoportok között az elhízásban, amelyet a megnövekedett testtömeg határoz meg, és a DM2-ben, amelyet a hiperglikémia, valamint a polidipszia, a polifágia és a poliuria triád jelenléte határoz meg (1. ábra). További 50% -os testtömeg-növekedést figyeltünk meg a vizsgálat kezdete és vége között (P = 0,004). Hasonlóképpen találtunk különbségeket a glükózszintekben 100 mg/dl felett (P = 0,03). A cukorbetegség klinikai triádjában a különbség statisztikai és klinikai volt (P = 0,004).

Különbségek láthatók a klinikai adatok között, amelyek lehetővé teszik az elhízás jelenlétének meghatározását, és a DM2. Az értékeket átlag + SD-ként fejezzük ki. A kiindulási érték és a végső tömeg g-ben, a szérum glükózszint g/dl-ben, a vízfogyasztás ml-ben, az élelmiszer-bevitel g-ben és az orin-kibocsátás számlálása ml-ben, mindez napi átlag. * = P ≤ 0,05 és ** = P ≤ 0,01.

DM2, 2-es típusú diabetes mellitus; SD-k, szórások.

A biológiai biztonsági paramétereket a hiperkalórikus étrend fogyasztását követően elemeztük. A betegség modelljének biztonságosságának felmérése és a vizsgálatot veszélyeztetni képes egyéb állapotok figyelemmel kísérése érdekében mértük a kreatinin szintet a vese biológiai biztonságának monitorozásához, valamint az ALT és az AST szintet a máj biológiai biztonságának értékeléséhez. Ezekben a paraméterekben nem észleltünk klinikai vagy statisztikai különbségeket (P> 0,05) (2. ábra), ami arra utal, hogy a modell elfogadható, és nem lenne káros mellékhatása a májra vagy a vesére. Ezek a megfigyelések lehetővé tették számunkra a beavatkozás biológiai biztonságának értékelését ebben a tanulmányban.

Statisztikai különbségeket nem figyeltek meg, az ebben a vizsgálatban alkalmazott betegségmodell a biológiai biztonság volt. Az értékeket átlag + SD-ként fejezzük ki.

SD-k, szórások; ALT, alanin-aminotranszferáz; AST, aszpartát-aminotranszferáz.