A hepatitis A élelmiszer-eredetű terjedése: A vírus túlélésével, transzferjével és inaktiválásával kapcsolatos legújabb tanulmányok

Syed A Sattar

1 Ottawa Egyetem Orvostudományi Kar Környezetmikrobiológiai Kutatóközpont;

Tetro Jason

1 Ottawa Egyetem Orvostudományi Kar Környezetmikrobiológiai Kutatóközpont;

Sabah Bidawid

2 Élelmiszer-igazgatóság, Health Canada, Ottawa, Ontario

Jeff Farber

2 Élelmiszer-igazgatóság, Health Canada, Ottawa, Ontario

Absztrakt

A hepatitis A kórokozója, a hepatitis A vírus (HAV) jelentős közegészségügyi probléma (1), és globális szinten jelentős morbiditást és gazdasági veszteségeket okoz (2). A HAV az ötödik leggyakrabban jelentett fertőző betegség az Egyesült Államokban, és a hatodik helyet foglalja el az első tíz élelmiszer-eredetű kórokozó között (3). A hepatitis A Észak-Amerikában is az egyetlen jelenthető élelmiszer-eredetű vírusos betegség (4), és az Egyesült Államokban a leggyakrabban jelentett, oltással megelőzhető betegség (5). Az Egyesült Államok Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hivatala (4) V. függelékében szerepel a súlyos veszélyek listáján.

A HAV, a Hepatovirus nemzetség tagja a Picornaviridae családba (6,7), fertőzött egyedek ürülékéből kerül ki. A vírus elsősorban a fekáliával szennyezett anyag lenyelésével terjed (8). A HAV-nak csak egy szerotípusa ismert, és a vírusfertőzés tartós immunitást ad. A vírus ürülése a székletben jóval a klinikai tünetek és tünetek megjelenése előtt megkezdődik, majd ezt követően néhány napig folytatódik. Sok egyén, különösen a gyermekek, megfertőződhetnek a vírussal anélkül, hogy megbetegednének. A vírus ilyen „csendes” terjesztői továbbadhatják a vírust a körülöttük lévő másoknak. Ezek a tényezők gyakorlatilag lehetetlenné teszik a fertőzött személyek azonosítását és elkülönítését, mielőtt azok elkezdnék kiválasztani a vírust. Ezért elengedhetetlen a jó személyes és környezeti higiénia hangsúlyozása.

Az elmúlt években a hepatitis A előfordulása megnőtt Kanadában (9). A növekedés oka többek között a megnövekedett utazás azokra a területekre és onnan, ahol a betegség nagyobb endemicitással bír; a magas kockázatú szexuális gyakorlatok és az illegális drogok használatának növekedése; egyre több napköziotthonos gyermek, ennek megfelelően nagyobb lehetősége van a HAV-ra a család és a közösség többi tagjának is; valamint a friss gyümölcsök és zöldségek behozatalának növelése kevésbé szigorú környezeti ellenőrzésekkel rendelkező régiókból. Ilyen élelmiszerek bekövetkeztek a hepatitis A kitöréseiben az Egyesült Államokban (10).

Ez a rövid áttekintés összefoglalja a HAV túlélésre képes képességét a kezeken és a nem porózus környezeti felületeken, valamint több ételben és azokban, valamint a hő- és gammasugárzás potenciális hasznát az inaktiválás során. HAV a kísérletileg szennyezett tejtermékeken és élelmiszereken (termékek), amelyeket gyakran nyersen vagy minimálisan feldolgozva fogyasztanak. Kiemeli továbbá a HAV átvitelét a szennyezett ujjbetétekről a felületek és tárgyak tisztántartására alkalmi érintkezés során. Javaslatok készülnek a jövőbeni kutatásokra is.

ÉTELT SZÜLETETT HAV

A HAV átvitelével összefüggő ételek típusai közé tartoznak a kagylók, saláták, szendvicsek, zöldségek, gyümölcsök, elkészített fagyasztott narancslé, fagylalt, sajt, rizspuding, jeges sütemény, puding, tej, kenyér, aprósütemények és más nyers vagy kevéssé elkészített ételek ( 4). Az élelmiszerek HAV-val való szennyezése többféle módon történhet: székletben szennyezett anyagokban termesztett és/vagy öntözött gyümölcsök és zöldségek; széklet által szennyezett vizekben termesztett és onnan betakarított kagylók (4); élelmiszerek feldolgozása és elkészítése székletileg szennyezett berendezésekben; és fogyasztásra kész élelmiszerek kezelése fertőzött, rossz személyi higiéniával rendelkező személyek részéről (11). A rossz egészségügyi feltételekkel rendelkező és nem megfelelő hulladékártalmatlanítási rendszerek, valamint a nem kielégítő gyártási gyakorlatok szintén hozzájárulhatnak az élelmiszerek szennyeződéséhez.

A HAV túlélése és átadása

A HAV könnyen képes túlélni a fagyást, akár 12 hónapig is megmarad friss vagy sós vízben (12), és néhány naptól hétig megőrzi fertőzőképességét szárított ürülékben (13). Emellett számos környezeti feltételnek, valamint fizikai és kémiai tényezőnek is ellenáll (14,15).

A vírus túlélése élő és élettelen felületeken:

A HAV több órán keresztül képes életben maradni emberi kézen (14) és több napig a beltéri környezeti felületeken (16). A vírusnak a kézen való túlélésére való képességét a laboratóriumi célokra adaptált vírustörzs (HM-175) székletben való felfüggesztésével, felnőtt önkéntesek ujjbetéteire helyezésével és a vírus helyreállításával több órán keresztül tanulmányoztuk. Az eluátumokat fertőző vírusra titráltuk plakkvizsgálati módszerrel, és meghatároztuk a bomlás sebességét a vírus fertőzőképességében. Felezési ideje 5,50 és 7,70 óra között mozgott (1. táblázat). Ez arra utal, hogy a vírus képes megtartani a fertőzőképességet a kézben a műszak nagyobb részében, ha az élelmiszerkezelők vagy gondozóik nem tudják megfelelően és gyakran fertőtleníteni őket. Érdemes megjegyezni azt is, hogy összehasonlító vizsgálatok során kiderült, hogy a HAV hosszabb ideig életben marad a kezeken, mint számos más emberi patogén vírus és baktérium (17).

ASZTAL 1

A hepatitis A vírus túlélése a felnőtt önkéntesek kezén

ABCDE

Felezési idő (h)	6.10	7.20	6.10	7.70	5.50
Ki érték *	0,0019	0,0016	0,0019	0,0015	0,0021

A HAV a nem poros környezeti felületeken még a környezeti hőmérséklet és relatív páratartalom (RH) széles tartományában is jobban meg tud élni, mint az emberi bőrön. Ezt úgy tesztelték, hogy a székletben szuszpendált vírust rozsdamentes acéllemezekre helyezték, és több napos időtartamon keresztül eluálták fertőzésének mérésére. E kísérletek eredményeit a 2. táblázat mutatja be. 5 ° C-os hűtési hőmérsékleten tartva a HAV felezési ideje legalább 103 óra (több mint négy nap), függetlenül az RH-tól. 20 ° C-on a felezési ideje volt a leghosszabb (közel 7,8 nap), amikor az RH alacsony volt, és a legrövidebb (valamivel több mint két nap) a legmagasabb RH-szinten. 35 ° C-on is a HAV felezési ideje 65 óra (2,7 nap) volt alacsony RH mellett. 35 ° C-on tartva 95% ± 5% relatív páratartalommal nem élte túl jól. A HAV-val összehasonlítva az 1-es típusú poliovírus (Sabin), egy prototípusos pikornavírus gyenge túlélést mutatott ugyanazokban a vizsgálati körülmények között.

2. TÁBLÁZAT

A hepatitis A vírus (HM-175) és az 1-es típusú poliovírus (Sabin) felezési ideje órákban (Ki értékek) * nem porózus környezeti felületeken, különböző léghőmérsékleti és relatív páratartalom mellett

% Relatív páratartalomTesztelt vírus Tartási hőmérséklet (C) 25 ± 555 ± 580 ± 595 ± 5

Hepatitisz A	5.	169 (0,0041)	151 (0,0046)	123 (0,0056)	103 (0,0067)
20	187 (0,0037)	128 (0,0054)	71 (0,0097)	51 (0,0113)
35	65 (0,0106)	50 (0,0138)	21 (0,0329)	2 (0,0984)
1. típusú polivírus	20	2 (0,3928)	NT	NT	7 (0,0984)

Az NT nincs tesztelve. A 16. hivatkozásból adaptálva

Figyelembe véve a módosított atmoszférájú csomagolásban (MAP) értékesített, fogyasztásra kész zöldségek növekvő használatát, Bidawid és munkatársai (18) nemrégiben tanulmányozták a HAV túlélését salátán szobahőmérsékleten és 4 ° C-on tárolt MAP-ban. Az eredmények azt mutatták, hogy a HAV túlélése 4 ° C-on körülbelül azonos volt a MAP-ban és a szokásos csomagolási körülmények között, és hogy a vírus túlélése valamivel jobb volt a magasabb szén-dioxid-szintet tartalmazó MAP-ban, amikor a szennyezett salátát szobahőmérsékleten tárolták.

Noha további vizsgálatokra van szükség ezen eredmények megerősítéséhez és kiterjesztéséhez, a szobahőmérsékleten tárolt MAP anyagban a HAV megnövekedett túlélése oka lehet az etilén széndioxid általi gátlása, ami a zöldségek fiziológiai romlásának csökkenését eredményezi, mint pl. saláta, és a vírust esetleg kevésbé mérgező hatások. Lehetséges, hogy a MAP gátló hatást gyakorolhat a gazdasejteken belüli vírusreplikációra. Korábbi tanulmányok (19) kimutatták, hogy a vízi környezetben őshonos mikroflóra például káros az enterális vírusok túlélésére. Ezek az eredmények megerősítik az élelmiszerek MAP-ba történő csomagolásuk előtti szennyeződésének elkerülése fontosságát is.

Vírustovábbítás a szennyezett és tiszta felületek között:

A HAV bejuthat az élelmiszerekbe, miután azokat betakarították vagy megfőzték, miután később székletben szennyezett kézzel vagy környezeti felületekkel érintkeztek. Mivel ez kulcsfontosságú kérdés a hepatitis A számos, élelmiszer által okozott kitörésének keletkezésének megértésében, valamint a kockázatértékelésben és a megfelelő környezeti kontrollintézkedések bevezetésében, a szerzők ezt a szempontot kvantitatív kísérleti megközelítéssel próbálták kezelni. Mindegyik donorfelület székletben szuszpendált HAV-val volt szennyezett, és az oltóanyagot változó hosszúságú szárítással hagyták környezeti körülmények között. Ezután a donorfelületet érintkezésbe hozták egy tiszta befogadó felülettel, ugyanazzal a nyomással, súrlódással és az érintkezés időtartamával, mint ami normális munkában vagy háztartási körülmények között történne, és mértük a fertőző vírusátadás mértékét (14).

A 3. táblázatban összefoglalt adatok azt mutatják, hogy a vírusátadás nemcsak a szennyezett és tiszta felületek közötti 10 másodperces alkalmi érintkezés esetén következik be (0,2 kg/cm 2 nyomás), hanem az is, hogy az inokulum életkora a donor felületén különbséget jelent. az átvitt vírus mennyisége. Amikor a nyomás szintjét 1 kg/cm2-re növelték és/vagy súrlódást alkalmaztak érintkezés közben, az átvitt fertőző vírus mennyisége kétszer-háromszorosára nőtt (14). Míg a vírusátvitelt még akkor sem kísérelték meg, amikor az oltás még nedves volt, várhatóan sokkal nagyobb lesz, függetlenül az érintett donor és a befogadó felületek jellegétől.

3. TÁBLÁZAT

A fertőző hepatitis A vírus átadása a szennyezett és tiszta felületek között

Átadás a transzferről a donor felületére a PFU-ra 0 percen át Száradási idő a donor felületén (perc) PFU átadva% átadva

Fémlemez	Ujjpad	10,795	20	2667	24.7
60	1277	11.8
120	575	5.3
180	233	2.16
240	0	0
Ujjpad	Fémlemez	12,275	20	3484	28.4
60	2092	17.0
120	908	7.4
180	158	1.3
240	50	0.4
Ujjpad	Ujjpad	10,433	20	2800	27.0
60	1833	17.6
120	933	8.9
180	167	1.6
240	17.	0.2

PFU Plakkképző egységek. A 14. referenciától adaptálva

A közelmúltban a szerzők azt is tanulmányozták, hogy a HAV hogyan kerül át a kezekből az élelmiszerekbe. Ezt úgy hajtottuk végre, hogy a HAV-tartalmú szárított oltóanyagot érintkezésbe hoztuk (0,2 kg/cm2, súrlódás nélkül) a kísérleti úton szennyezett felnőtt önkéntesek ujjbetéteivel tiszta saláta darabokkal 10 másodpercig (20). Ez a fertőző vírus csaknem 10% -ának átvitelét eredményezte.

A szerzők tudomása szerint ezek az adatok jelentik az első kvantitatív értékelést a HAV-transzferről, valamint a nyomás és a súrlódás kapcsolatáról az érintkezés során, és nagymértékben hozzá kell járulniuk a megfelelő környezeti ellenőrzési stratégiák kialakításához és az élelmiszerek kezelőinek a keresztezés elkerülése szükségességének oktatásához. élelmiszerek szennyeződése. Ezek a megállapítások megerősítik azt a tényt is, hogy a kézmosás önmagában nem lehet elegendő az élelmiszer-eredetű HAV terjedésének megszakításához anélkül, hogy rendszeresen és megfelelően tisztítanák és fertőtlenítenék az ételekkel gyakran érintkező felületeket és tárgyakat.

HŐVEL INAKTIVÁLJUK

A hő a leghatékonyabb mérték a HAV inaktiválásában (21,22). A HAV teljes inaktiválása a kagylók húsában elérhető, ha a kagylókat 1,5 percig 85 ° C és 90 ° C közötti belső hőmérsékletre melegítjük (gőzöljük) (23).

A szerzők a közelmúltban tesztelték a zsírtartalom hatását a sovány tej (1%), a homogenizált tej (3,5% zsír) és az asztali krém (18% zsír) HAV hőállóságára (24). A 4. táblázat adatai azt mutatják, hogy a rutinszerű pasztőrözés hőmérséklete nem megfelelő a HAV inaktiválására ezekben a tejtermékekben. Ezenkívül a zsírtartalom növelése védő szerepet játszik, és így hozzájárulhat a vírus fokozott hőstabilitásához az ilyen termékekben.

4. TÁBLÁZAT

A különböző log10 szintek szükséges idő (perc) a hepatitis A vírus fertőzőképességében, ha különböző zsírtartalmú tejtermékeket melegítenek