Határok a Cellular-ban
és fertőzéses mikrobiológia

Mikrobiom az egészségügyben és a betegségekben

Szerkesztette
Yinduo Ji

Minnesotai Egyetem Testvérvárosok, Egyesült Államok

Felülvizsgálta
Janakiram Seshu

Texasi Egyetem, San Antonio, Egyesült Államok

Skót P. Ouellette

A Nebraskai Egyetem Orvosi Központja, Egyesült Államok

A szerkesztő és a lektorok kapcsolatai a legfrissebbek a Loop kutatási profiljukban, és nem feltétlenül tükrözik a felülvizsgálat idején fennálló helyzetüket.

határdiszbiózisa

  • Cikk letöltése
    • PDF letöltése
    • ReadCube
    • EPUB
    • XML (NLM)
    • Kiegészítő
      Anyag
  • Exportálás
    • EndNote
    • Referencia menedzser
    • Egyszerű TEXT fájl
    • BibTex
OSZD MEG

Eredeti kutatás CIKK

  • 1 Természettudományi, Egészségügyi, Oktatási és Mérnöki Kar, Sunshine Coast Egyetem, Sippy Downs, QLD, Ausztrália
  • 2 Szexuális egészség és HIV szolgálat, Klinika 87, Sunshine Coast, Nambour, QLD, Ausztrália
  • 3 Élettudományi Egyetem, Felsőoktatás és Akadémiai Gyakorlat, Műszaki Egyetem, Sydney, NSW, Ausztrália

Bevezetés

Az IDO1 számos sejttípus által termelhető specifikus citokinek, például IFN-y, IL-1β, TNF-a és IL6 hatására (Shirey és mtsai, 2006; Campbell és mtsai, 2014). Az IDO1 termelés az IL-17 termelő CD4 + T sejtek csökkent differenciálódásával (Favre és mtsai, 2010), a gyulladáscsökkentő IL-10 fokozott termelésével (De Luca és mtsai, 2013), a toleranciával és az immunszuppresszióval társult (Moffett és mtsai.). Namboodiri, 2003). Kimutatták, hogy a triptofán katabolizmusa a kinurenin útján számos betegségben és rendellenességben is szerepet játszik (Campbell és mtsai, 2014; Heng és mtsai, 2016), míg a kynurenin kimutatták, hogy a betegség előrehaladásának nagyon fontos biomarkere. (Chen és Guillemin, 2009), és a bél mikrobiota dysbiosisával társult (Vujkovic-Cvijin et al., 2014). Immunszupresszorként azonban az IDO1-nek jótékony hatással volt a toleranciára, és egy tanulmány arról számolt be, hogy a magas kinurenin a hüvelyi mikrobiom egészséges állapotához kapcsolódik, összehasonlítva a bakteriális vaginosisban (BV) szenvedő nőkkel (Vitali et al., 2015).

Ez a tanulmány arra a kérdésre kívánt választ adni, amely egy évtizedes hipotézis körül alakult ki, a genitális mikrobiómában az indolt termelő baktériumok arányával kapcsolatban, amely potenciálisan hozzájárulhat a C. trachomatis immunkijátszás a triptofán éhezés révén. Korábban azt tapasztaltuk, hogy az indolt termelő baktérium felülúszó képes volt megmenteni C. trachomatis a triptofán kimerülése után in vitro (Ziklo és mtsai, 2016b). Ezt kibővítettük in vitro adatok a szexuális egészségügyi klinikán részt vevő nők kis csoportjának elemzésére Chlamydia negatív, Chlamydia pozitív vagy Chlamydia ismétlés-pozitív. Megmértük a nők mikrobiomját, a citokintermelést, valamint a hüvelyi triptofán, kinurenin és indol szintjét. Ebben a tanulmányban bizonyítékokat szolgáltatunk arra, hogy a nők ismételt C. trachomatis a genitális fertőzésben a kinurenin és a kinurenin/triptofán arány szignifikánsan magasabb, míg a CST IV-ben szenvedő nőknél a triptofán szintje szignifikánsan alacsony.

Anyagok és metódusok

Tanulmányozza a kohortot

A hüvelyváladék elúciója

A LASIK PVA szemszivacsokat (Visitec, USA) 2 percre a hüvely hátsó fornixjébe helyeztük a váladék felszívására. A szivacsokat azonnal -20 ° C-ra helyeztük, amíg a hüvelyi folyadékok ugyanazon a napon eluálódtak, amint azt Kozlowski és mtsai korábban leírták. (2000), 300 μl PBS-t használva, amely 1% bakteriális proteáz-gátlót (Sigma, Ausztrália) és 10% igepalt (Sigma, Ausztrália) tartalmaz.

Triptofán és kinurenin ELISA

A hüvelyi váladékminták triptofán és kinurenin koncentrációját triptofán és kinurenin ELISA assay (Immusmol, Franciaország) alkalmazásával határoztuk meg a gyártó utasításainak megfelelően. Röviden, 20 μl méhnyak-szekréciót használtunk mindegyik mintából egy 96 lyukú lemezes kompetitív ELISA-vizsgálatban. O.D. mérései standard görbe alapján koncentrációkká alakítottuk át. A méréseket a minták hígítási tényezőjének megfelelően korrigáltuk. A kinurenin/triptofán arányt úgy számítottuk ki, hogy a méréseket elosztottuk a két készletből.

Citokinek mérése hüvelyváladékban

Három citokint, az IFN-y-t, az IL-17-et és az IL-10-et mértünk a nők nyaki váladékából, ELISA assay (Elisakit.com, VIC, Ausztrália) felhasználásával, a gyártó utasításainak megfelelően. A fehérje szinteket pg/ml-ben standard görbe alapján határoztuk meg, és a méréseket a minták hígítási tényezője szerint korrigáltuk.

A hüvelyi mikrobiom elemzése

Statisztikai analízis

Az adatok elemzését a Graph Pad Prism V. 7.01 alkalmazásban (Graph Pad Software, Ausztrália) végeztük, és átlagként ± szórásként (SD) adtuk meg. A statisztikai különbségeket Mann-Whitney teszttel elemeztük. A korrelációs elemzést Pearson-teszt alkalmazásával végeztük. A hüvelyi mikrobiómák adataiban szereplő specifikus baktériumok összehasonlító elemzését Kruskal Wallis teszttel végeztük QIIME-ban (Caporaso et al., 2012). A készenléti táblázatokat Fisher pontos tesztjével elemeztük.

Eredmények

Magasabb kinurenin/triptofán arány van jelen Chlamydia Pozitív (egyszeri vagy ismétlődő fertőzések) Chlamydia Negatív nők

Az IFN-y köztudottan a klamidium növekedésének kulcsszabályozója, és az egyik mechanizmus a triptofán IDO1-re történő szabályozásával és kimerítésével történik, kinureninné történő átalakítással (1. ábra). Annak megállapítása, hogy a rendelkezésre álló triptofán vagy termékének, a kinurenin hüvelyi traktusszintje korrelálhat-e az egyén reakciójával a kezdeti vagy ismételt fertőzésekre C. trachomatis, megmértük a triptofán és a kinurenin fehérje szintjét a hüvelyi szekrécióból. Noha nem találtunk szignifikáns összefüggést önmagában a triptofánszinttel (2C. Ábra), mégis Chlamydia pozitív, egyszeres vagy ismételt fertőzésben szenvedő nőknél a kinurenin/triptofán arány szignifikánsan magasabb volt (o 34. A statisztikai különbségeket a grafikon mutatja (**o Kulcsszavak: triptofán, kinurenin, indol, hüvelyi mikrobiota, gamma-interferon, Chlamydia-fertőzés

Idézet: Ziklo N, Vidgen ME, Taing K, Huston WM és Timms P (2018) A hüvelyi mikrobiota diszbiózisa és a magasabb hüvelyi kinurenin/triptofán arány összefüggést tár fel Chlamydia-fertőzés Nemi szervi fertőzések. Elülső. Sejt. Fertőz. Microbiol. 8: 1. doi: 10.3389/fcimb.2018.00001

Beérkezett: 2017. április 03 .; Elfogadva: 2018. január 05 .;
Publikálva: 2018. január 18.

Yinduo Ji, a Minnesotai Testvérvárosok Egyeteme, Egyesült Államok

Janakiram Seshu, Texasi Egyetem, San Antonio, Egyesült Államok
Scot P. Ouellette, a Nebraska Egyetem Orvosi Központja, Egyesült Államok