A magas sótartalmú étrend kardiovaszkuláris és vesehatásai alacsony nephronszámú GDNF +/- egerekben

PD Dr. Kerstin Benz

szív

Erlangen-Nürnbergi Egyetem Gyermekgyógyászati ​​Tanszéke

Loschgestr. 15, D-91054 Erlangen (Németország)

Kapcsolódó cikkek a következőhöz: "

  • Facebook
  • Twitter
  • LinkedIn
  • Email

Absztrakt

Célok: Az alacsony nefronszám javasolt összefüggésének, valamint a vese- és szív- és érrendszeri betegségek későbbi kialakulásának teszteléséhez a magas nátriumtartalmú diéta hatásait vizsgáltuk heterozigóta GDNF +/- egerekben. Mód: Az idős vad típusú és a GDNF +/- egereket 4 hétig magas nátrium- (HS, 4%) vagy alacsony nátriumtartalmú (LS, 0,03%) étrend szerint csoportosítottuk. A szívet, az aortát és a veséket morfometriai és sztereológiai értékelésekhez és TaqMan PCR-hez dolgoztuk fel. Eredmények: HS GDNF +/- egereknél az ivás mennyisége és vizelettermelése szignifikánsan nagyobb volt, mint a tömeg, és az átlagos artériás vérnyomás általában magasabb volt. A szívtömeg magasabb volt a GDNF +/-, mint a tömegben, de a különbség csak az LS esetében volt szignifikáns. A HS szignifikánsan megnövelte a szív intersticiális szövetét a GDNF +/-, de tömegben nem. Az LS-en a GDNF +/- egereknek szignifikánsan nagyobb a glomerulusa, mint a tömeg és a HS a glomeruláris terület további kétszeres növekedéséhez vezetett az LS-hez képest. Az elektronmikroszkóppal glomeruláris károsodás történt, miután a HS-t GDNF +/-, de tömegben nem észleltük. Az étrendi sóbevitel modulálta a vese IL-10 gén expresszióját GDNF + /-. Következtetés: 30% -kal alacsonyabb nefronszám mellett a HS-étrend a vese, valamint a szív- és érrendszer maladaptív változásainak kedvez.

Bevezetés

Összefoglalva tehát, vannak olyan specifikus populációkra vonatkozó humán adatok, amelyek alátámasztják a nephron alul adagolását, mint az esszenciális hipertónia egyik lehetséges okát, Brenner-hipotézist, de sem az érintett patomechanizmusok, sem az étrendi tényezők modulációs hatása, vagyis a magas sófogyasztás nem ismert. Ezért ennek a tanulmánynak az volt a célja, hogy megvizsgálja az étrendi sómódosítás alacsony és magas sótartalmú étrenddel történő hatásait a GDNF +/- modellben, 30% -kal alacsonyabb nephron mellett a kardiovaszkuláris és a vese szerkezetére és működésére. Ezen túlmenően célul tűztük ki azon szabályozási rendszerek változásainak elemzését, amelyek részt vehetnek a nátriumkezelésben, ha a sófogyasztás alacsony nephronszám esetén változik, azaz a renin angiotenzin rendszer (RAS), az endothelin (ET) rendszer, néhány gyulladásos marker és kiválasztott tubuláris nátrium-transzportereket.

Anyag és módszerek

Állatok és szövetek előkészítése

A GDNF +/- egereket kezdetben K. Krieglstein professzor és Dr. S. Hermann, a németországi Göttingeni Egyetem Neuroanatómiájának Tanszéke biztosította. Az egérmodellt eredetileg Pichel et al. [13]. A farokszövetet elválasztáskor nyertük genotipizáláshoz PCR-analízissel, az előzőekben leírtak szerint [14]. Valamennyi állatkísérletet az American Physiological Society irányelveinek megfelelően hajtották végre, és a helyi önkormányzatok jóváhagyták (Regierung von Mittelfranken, AZ # 54-2531.31-3/07).

A első kísérlet 34 GDNF +/- (15 hím, 19 nőstény) egeret alkalmaztunk 35 vad típusú C57B6 (tömeg, 15 hím, 20 nő) kontrollként. Az egereket fenntartott körülmények között helyeztük el (22 ± 2 ° C, 12 órás sötét/világos ciklus). A kísérlet kezdetén az egereket véletlenszerűen 2 különböző kezelési csoportba soroltuk. Az egyik állatcsoport (16 GDNF +/-, 19 vadtípus) magas sótartalmú étrendet (HS, 4%) és 0,9% sóoldatot kapott ivóvízként; a másik csoport (18 GDNF +/-, 16 vad típusú) alacsony sótartalmú étrendben részesült, amely 0,03% sót és normál csapvizet tartalmazott. Mindkét rendet 4 héten keresztül adták. A leölés előtt az összes egeret carotis artériás katéterrel láttuk el izoflurán altatásban, és az érzéstelenítés után 2 órával az öntudatos egerekben megmértük az intraarterialis vérnyomást [15]. Ezt követően mindkét vesét vettük szövettani elemzésre és az mRNS expressziójának értékelésére. A fenti állatok közül, amelyek többnyire 49-53 hetesek voltak, a fiatalabb állatok csoportját (n = 3 csoportonként, 27-34 hetes korosztály) alkalmaztuk a szérum aldoszteronszint meghatározására radioimmun vizsgálattal (Radim Aldosterone MAIA; Radim Deutschland GmbH, Németország) [16]. Vérvétel után ezeket az állatokat perfúzióval fixáltuk glutáraldehiddel az alábbiakban leírtak szerint.

Immunhisztokémia

A vesék morfológiai vizsgálata

Minden morfológiai vizsgálatot vak módon hajtottak végre, vagyis a megfigyelő nem tudott a kísérleti protokollról.

Intrarenalis artériák. A vese kortikális artériák hosszsűrűségét (Lv) az Lv = c * QA egyenlet alapján határoztuk meg 200-szoros nagyítással. Röviden, a paraffin metszeteken a QA-t a kéreg területére jutó erek számaként határoztuk meg. A kérgi erek területét és lumenjét planimetria és egy félautomatizált képelemző rendszer segítségével határoztuk meg (Soft Imaging Systems, Münster, Németország). Az összes SMA-vel festett vese szakaszon az ér minimális és maximális átmérőjét (Dmin, illetve Dmax) mértük; c-t Dmin/Dmax-ban határoztuk meg. Az edény területe Avessel és a lumen területe Alumen az Avessel = π * (Douter/2) 2 és az Alumen = π * (Dinner/2) 2 egyenletekkel került meghatározásra (Douter: az edény egyik külső helyétől az ellentétes távolság) hely; vacsora: távolság az edény egyik belső helyétől az ellentétes helyig; Dmax = Douter - vacsora a legnagyobb edényátmérőnél, Dmin: Douter - vacsora az edény legkisebb átmérőjénél). Az erek lumenjét a kettő különbségeként számoltuk ki.

A szív morfológiai vizsgálata

A vese valós idejű PCR-je

Az adatok elemzése

Asztal 1

Állatokra vonatkozó adatok - Testtömeg, vese súly és szérumparaméterek