Az Enoki gombák hipolipidémiás és antioxidáns aktivitása (Flammulina velutipes)

1 Bioipartechnikai Tanszék, Dayeh Egyetem, Dacun, Changhua 51591, Tajvan

2 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Hungkuang Egyetem, Shalu, Tajcsung 43302, Tajvan

Absztrakt

Az irodalmak szerint, Flammulina velutipes olyan biológiailag aktív komponenseket tartalmaz, mint az élelmi rost, a poliszacharid és a mikoszterin, amelyeknek bizonyított hatása a vércukorszint, a vérnyomás és a koleszterin csökkentésére. Ez a tanulmány az abból kivont aktív komponenseket használta Flammulina velutipes por (FVP) és Flammulina velutipes kivonat (FVE), hogy megvizsgálják ezen aktív komponensek hatását a hörcsögök lipid metabolizmusára. Az eredmények azt mutatják, hogy az összes élelmi rosttartalom FVP-ben és FVE-ben 29,34 mg/100 g, illetve 15,08 mg/100 g. A teljes mikoszterintartalom 46,57 ± 0,37 mg/100 g, illetve 9,01 ± 0,17 mg/100 g. A hím hörcsögöket lipid metabolizmus monitorozásnak vetették alá, 1, 2 és 3% FVP vagy FVE hozzáadásával az étrendjükbe 8 héten keresztül. Az állatvizsgálati eredmények azt mutatják, hogy a 3% FVP és FVE csoportokban a legalacsonyabb a TC (összkoleszterin), a TG (triacilglicerin), az LDL (alacsony sűrűségű lipoprotein koleszterin) és az LDL/HDL (nagy sűrűségű lipoprotein koleszterin) koncentráció a szérumban. és a máj (P

1. Bemutatkozás

A tanulmány célja először a funkcionálisan aktív komponensek elemzése F. velutipes por (FVP) és F. velutipes kivonatok (FVE). Ezután mind az FVP-t, mind az FVE-t hozzáadják a hörcsögök étrendjéhez, hogy megvizsgálják, hogy a F. velutipes magas zsírtartalmú étrendben lévő hörcsögökben szabályozzák a lipidek anyagcseréjét és az antioxidáns aktivitást.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Vegyszerek

A koleszterint, az LDL-C-t, a HDL-C-t és a trigliceridet az ICN Biomedicals, Inc.-től (Irvine, CA) szereztük be. A biológiai vizsgálati készleteket, beleértve a triglicerid készletet, a koleszterin készletet, az LDL-C készletet és a HDL-C készletet, a Teco Diagnostics (Anaheim, Kalifornia) gyártja. Az acetonitrilt (LC fokozat, tisztaság 99%) a Tomowa Chemical Co. (Taichung, Tajvan) biztosítja. Hiteles oxál-, citrom-, almasav, α-α, difenil-pikrilhidrazil (DPPH), szabad gyökök, linolsav, butilezett hidroxi-anizol (BHA), rutin, kvercetin és dekánsav a Sigma Chemical Co.-tól (St. Louis, MO). ). Az etilén-diamin-tetraecetsavat (EDTA) a Mallinckrodt Co. (Hazelwood, MO) cégtől szerzik be. A foszfotungstinsavat a J. T. Baker Chemical Co. (Phillipsburg, NJ) cégtől szereztük be.

2.2. Anyag

Flammulina velutipes A jelen tanulmányban felhasznált anyagot a tajvani taichungi Taishen Mushroomtól vásároltuk. A kísérleti eljárások a következők. (1) FVP: 300 g friss F. velutipes forró levegő szárítóval 45 ° C-on 48 órán át szárítottuk, majd őrlőgéppel porítottuk a későbbi felhasználás céljából. (2) FVE: 300 g friss F. velutipes főztük 600 ml forrásban lévő vízben 5 percig, 6 adagban, majd eltávolítottuk. A fehérítő vizet betöményítettük (3,8 Brix) és fagyasztva szárítottuk későbbi felhasználás céljából. (3) A kísérleti állateledelek összetevőit az 1. táblázat tartalmazza.

2.3. Kémiai jellemzés

2.3.1. Az étrendi rost meghatározása

Az étrendi rostokat AOAC módszerrel elemeztük [10]. 1 g mintát használunk oldhatatlan és oldható rostok vizsgálatához.

2.3.2. A poliszacharid meghatározása

A Liu és munkatársai által leírt módszer módosított változatát alkalmaztuk. [11]. 3 mg/ml mintaoldatot készítettünk 0,15 M NaCl-dal gélszűréses kromatográfiához; a kromatográfia oszlop térfogatát 5 mg/ml kék dextránnal mértük, amikor meggyőződtünk arról, hogy a kimosó folyadékban nincs cukorreakció. Az oldat 280 nm-es abszorbanciáját UV/VIS detektorral (UA-6, ISCO, USA) detektáltuk, majd frakciógyűjtővel (Retriever TM 500, ISCO, USA) gyűjtöttük össze. Mindegyik 2,5 ml-t kémcsőbe gyűjtöttük.

Az összegyűjtött minták összes cukorát fenol-kénsav színezéssel mértük, és a fehérje standardot használtuk a poliszacharid molekulák molekulatömegének előzetes mérésére. A kromatográfiás körülményeket az alábbiak szerint írjuk le: oszlop: Pharmacia oszlop (1,6 × 90 cm), gél: Sephacryl S-400-HR (Sigma Chemical Co., USA), mozgófázis: 0,15 M NaCl, minta koncentráció: 10 mg/ml és áramlási sebesség: 0,5 ml/mg, 2,5 ml/perc.

2.3.3. A mikoszterin meghatározása

A mikoszterint Feng és munkatársai által leírt módszerrel elemeztük. [12]. 5 g mintát 1: 10 (v/v) arányban kevertünk normál hexánnal 2 órán át reflux extrakcióval; ezt az eljárást kétszer megismételtük. A maradékokat ezután 1: 10 (v/v) arányban metanolos oldószerrel keverjük 1 órán át visszafolyató hűtő alatt. A leszűrt oldatokat egyesítjük, majd dekompresszióval bepároljuk, amíg meg nem száradnak. Belső standardot (1 ml 1 mg/ml 5-kolesztán) adunk hozzá, és szobahőmérsékleten 20 órán át szappanosítjuk, majd 25 ml kloroformmal összekeverjük és kétszer extraháljuk. Az alsó réteget ezután vettük, és a víz eltávolításához 2 g vízmentes nátrium-szulfáttal összekevertük, majd leszűrtük; a leszűrt oldatot 40 ° C-on dekompresszióval betöményítettük, amíg száraz nem volt. Összesen 100 μL BSTFA + TMCS-t (99 + 1) adtunk a koncentrátumhoz, és a reakciót 2 órán át hagytuk folytatni 70 ° C-on. A mikoszterintartalmat GC-FID és GC-MS módszerrel mérjük.

2.4. Antioxidáns képességvizsgálat

2.4.1. DPPH radikális elszívó képesség

A gyökfogó képességet Shimada et al. [13]. 1 ml mintát összekevertünk 4 ml metanollal, majd egyenletesen összekevertük 1 ml 0,2-vel μM DPPH metanolos oldat. Ezután a minták 30 percig pihentek, mielőtt spektrofotométerrel megmérnék az abszorbanciájukat 517 nm-en. A takarító hatás kiszámításának képlete a következő: