MÉH VENOM AZ ELHÍZÁSHOZ

Mi az elhízás?
Ez egy olyan orvosi állapot, amely akkor merül fel, ha egy személynek további súlya van tárolt zsír formájában, amely hatással lehet az egészségi állapotra. Az elhízást összetett betegségnek nevezhetjük, mivel különféle problémákba bonyolódhat, például bizonyos rákos megbetegedések, magas vérnyomás, cukorbetegség és szívbetegségek. Tehát ez nem csak kozmetikai tényező.

Sok ember számára nagyon nehéz elkerülni az elhízást, és ez annak köszönhető, hogy egy örökletes tényező kombinálódik a helytelen étrenddel és az inaktív életmóddal. Az elhízás más alanyai esetében örökletes okok nélkül a viselkedés megváltoztatja a megnövekedett fizikai aktivitást, az étrend változásai és bizonyos gyógyszerek segíthetnek a fogyásban. A súlycsökkentő rendszert és a vényköteles gyógyszereket általában krónikus elhízással küzdő embereknek szánják.

Hogyan lehet kimutatni az elhízást?
Normális esetben a BMI eszközt használják az ember súlyának nem, életkor, súly és magasság szerinti felmérésére. A 25 feletti BMI-index azt jelzi, hogy az ember túlsúlyos, míg 30 felett azt jelzi, hogy az ember elhízott.

A test alakját és súlyát a zsír, a derék és a magasság, valamint a derék és a csípő méretarányának megoszlása határozza meg. Egy elhízott embernél ízületi gyulladás és metabolikus szindróma is kialakulhat. A metabolikus szindróma alatt különböző kérdések jelentkeznek, például a II-es típusú cukorbetegség és a magas vérnyomás.
A
Milyen tényezők vezetnek az elhízáshoz?Számos tényező vezethet elhízáshoz a férfiaknál és a nőknél, és ezek az alábbiak:

További kalóriák fogyasztása hosszú ideig
Inaktív életmód vezetése
Nem alszik eleget
Az endokrin rendellenességek jelenléte
Súlygyarapodás bizonyos gyógyszerek miatt
Elhízás gén

Az elhízott személynek orvoshoz kell fordulnia, és megfelelő testvizsgálaton kell átesnie, mielőtt bármilyen gyakorlatot vagy bármilyen gyógyszert használna.

Hogyan kezelik az elhízást?
A hivatásos orvos fizikális vizsgálat után elvégez néhány vizsgálatot. Fontos figyelembe venni egy elhízott ember egészségi állapotát, majd megfelelő diagnózist felállítani. Ez végül hosszú távon sokkal könnyebbé és hatékonyabbá teszi a kezelési folyamatot.

Sok orvos erős gyógyszereket ajánl az elhízott embereknek, amelyek segítenek a fogyásban, de károsítják más szerveket, például a vesét és a májat. Ezek a gyógyszerek természetellenesen segítenek abban, hogy az ember megszabaduljon a felesleges zsírtól. Amit egy elhízott embernek meg kell tennie, az az; kezdje el a napi testmozgást és egészséges étrendet tartson, majd válasszon egy természetes gyógyszert, amely segít megszabadulni a felhalmozott zsírtól.
A méhméreg különféle alapvető összetevőket tartalmaz, amelyek különböző egészségügyi körülmények között hasznosak. Megfigyelték, hogy a megfelelő adagolási renddel rendelkező méhméreg segíthet megszabadulni az elhízástól. És a legjobb az, hogy gondosan alkalmazva nincsenek mellékhatásai ennek a kezelésnek.

A méhméreg az adipogenezis gátlásával elnyomja a preadipocyták és a magas zsírtartalmú étrend okozta elhízás differenciálódását.

Bevezetés
Az elhízás túlzott vagy rendellenes zsírfelhalmozódás következménye. A hipertrófia és az adipocita hiperplázia meghatározó tényezője ennek az egészségi állapotnak. Az adipociták megkülönböztetik más prekurzor sejteket vagy őssejteket, és ez a génexpresszió komplex mechanizmusa, amely különböző elhízással kapcsolatos betegségeket eredményez. A differenciálatlan fibroblasztot, a 3T3-L1 preadipocitát különböző klinikai vizsgálatokban alkalmazták; a differenciálódással és az adipogenezissel kapcsolatos. Ezeknek a sejteknek más a fekvésük az adipogén induktoroktól, mint a dexametazon, az IBMX (3-izobutil-1-metilxantin) és az inzulin.

A preadipocitáktól az adipocitákig terjedő differenciálódási szekvencia terminális differenciálódásból, mitotikus klonális tágulásból és összefolyásból áll. Az első szakaszban az következik, hogy az összefolyó sejtek a növekedés leállításának fázisává válnak. Később ezek a sejtek újraindítják ciklusukat, és az MCE fázis alatt 3-4-szer növelik a sejtek számát. Az ebben a sejtdifferenciálódási fázisban tapasztalt hiperplázia összefügg az adipogén transzkripciós faktorok termelésével.

Megjegyezzük, hogy a CCAAT/(C/EBPs) és a PPAR (peroxiszóma proliferátor-aktivált receptorok) y elősegíti az adipociták differenciálódási fázisát. Korai stádiumban a 3T3-L1 sejtek differenciálódása, a C/EBPδ és a C/EBPβ expressziója szignifikánsan megnövekedett egy hormonális indukció után, amely végül növeli a PPARγ és a C/EBPα expresszióját. A C/EBPδ nagyon fontos, hogy az MCE a differenciálódási szakaszban keletkezzen az adipogenezis korai szakaszában. A C/EBPβ génexpressziója meggyőzi a C/EBPα és a PPARγ expresszióját. A PPARγ és C/EBP család teljes aktiválása szabályozza a zsír felhalmozódását támogató különféle adipogén faktorok expresszióját.

Az AMPK (adenozin-monofoszfát-aktivált protein-kináz) az energia homeosztázis elsődleges szabályozójaként is ismert, és fontos célpontként szolgál az elhízás kezelésében. Az adipogenezis során az AMPK aktiválása a metabolikus enzimek inaktiválása révén szabályozza a lipid- és glükóz-anyagcserét. Az AMPK foszforilezése inaktiválja az ACC-t (acetil-koenzim, amely egy karboxiláz) és a HMGCR-t (3-hidroxi-3-metil-glutaril-koenzim, amely egy reduktáz), ami a koleszterin és a zsírsavak szintézisének megelőzéséhez és a zsírsavak fokozott oxidációjához vezet. Azt is megállapították, hogy az AMPK szabályozza az acil-CoA lipid bioszintézis és béta-oxidáció irányítását, amely a GPAT (glicerin-3-foszfát-aciltranszferáz) gátlásához vezet. Ezenkívül az AMPK-k foszforilezése megakadályozza az olyan adipogén transzkripciós faktorok expresszióját is, mint a PPARγ, C/EBPα, C/EBPδ és C/EBPβ.

A BV (méhméreg) különböző peptidek, fehérjék és más kis tömegű komponensek komplexusa, amely hatékony védekezési eszközként működik. A mézelő méh fájdalmas csípése ellenére méregét hosszú ideje használják, különböző formákban, fájdalom, betegségek, sőt daganatok kezelésére. Megállapították, hogy az érelmeszesedéses elváltozások gátlását a nem káros prosztata hiperplázia és gyulladáscsökkentő mechanizmus elnyomásával klinikai patkányokban a méhméreg.

A melittin a méhméreg talán leghasznosabb alkotóeleme, amely felelős a gyulladásgátló citokinek, az NF-κB jelút, a proaterogén fehérjék és az adhéziós molekulák visszaszorításáért és a magas zsírtartalmú kísérleti állatmodellekben az érelmeszesedés elváltozásának javításáért. Ezen felül makrofág infiltrációt, fibrotikus faktorokat, adhéziós molekulákat, gyulladásgátló citokineket és apamin gyengített lipideket figyeltek meg a zsír által indukált érelmeszesedéses kísérleti egerekben. Beszámoltak arról, hogy a méhméreg elhízásellenes hatást mutat. Gondosan meg kell vizsgálni a mögöttes mechanizmust. Ebben a klinikai kísérletben gondosan megvizsgálták a méhméreg elhízásellenes hatásait a 3T3-L1 preadipocytákban HFD által kiváltott elhízási modellekben.

Módszer
Olajvörös O-t, inzulint, DEX-et, IBMX-et és BVA-t, valamint egyéb vegyszereket a Sigma Chemical-tól (USA) szereztünk be. A penicillin-sztreptomicint, a szarvasmarha magzati szérumát, a szarvasmarha szérumot és a Dulbecco módosított sas táptalaját mind a Life Technologies-től (USA) szereztük be. Míg a β-aktin (C4; kat. Sz. Sc-47778) elleni antitestek, a C/EBPα (C-18; kat. Sz. Sc-9314) és a PPARy (E-8; kat. Sz. Sc-7273) ellenanyagok voltak. a Santa Cruz Biotechnology, Inc.-től, Amerikai Egyesült Államok. ERK, JNK, foszforstresszel aktivált protein kináz/Jun-amino terminális kináz, Phospho extracelluláris szignál által szabályozott kináz, foszfo-p38 MAPK, p38, AMPK, p-AMPK, ACC és p-ACC antitesteket a Cell Signaling Technology-tól szereztünk be, USA-ban, míg a torma-peroxidázzal konjugált antitesteket az Egyesült Államokbeli Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc. A SYBR Green Master Mix az Applied Biosystems-től (USA) került beszerzésre. A PPARγ, C/EBPδ, C/EBPα, C/EBPβ és GAPDH-t a koreai Bioneer cégtől kaptuk.

A 3T3-L1, Preadipocytákat a Koreai Cell Line Band-től (Korea) szereztük be, majd DMEM-ben tenyésztettük 10% BS, 100 ug/ml sztreptomicin és 100 NE/ml penicillin kiegészítéssel, 37 ° C hőmérsékletű inkubátorban és 5% szén-dioxid. Az adipocita differenciálódást 3T3-L1 sejtek tenyésztésével végeztük edényekben 2x105 sejt/ml sűrűséggel az összefolyásig. A teljes összefolyás szakaszában a lemezeket különböző koncentrációjú méhméreggel kezeltük. A második szakaszban, amely a differenciálódás 3. napján kezdődött, a sejteket 1 µ/ml inzulinnak tettük ki a DMEM-ben 10% FBS (v/v) és 1% PS tartalommal. A harmadik vagy utolsó szakaszban a sejteket 1% PS és 10% FBS tartalmú DMEM-be helyeztük - 3 nap múlva a táptalajt kicseréltük.

A sejtek életképességét MTT (3 - (4, 5-dimetil-tiazol-2-il) -2,5-difenil-tetrazolium-bromid) vizsgálattal értékeltük. A 3T3-L1 sejteket egy 96 lyukú lemezre helyeztük, és 72 órán át különböző koncentrációjú méhméreggel kezeltük őket 37 órán keresztül 37 ° C hőmérsékleten, nedvességtartalom és 5% szén-dioxid mellett. A kezelés befejezése után a sejteket 4 órán át MTT-oldattal festettük 37 ° C hőmérsékleten. Miután eltávolítottuk a felesleges reagenst, az oldhatatlan formazánt DMSO-ban oldottuk. A sejtek életképességét 570 nm-en számítottuk az Epoch mikrotérfogatú spektrofotométerrel.
A teljes RNS-t izoláltuk, és a sejteket egy Trizol-reagenssel homogenizáltuk, amelyet az Invitrogen-től (USA) szereztünk be. A cDNS-t a teljes RNS, a d16 primer és az AMV-RT izolálásával nyertük. A relatív génexpressziót valós idejű PCR-rel számítottuk, SYBR green PCR master mix segítségével. A C/EBPδ, PPARγ, C/EBPα és C/EBPβ gén Ct értékeit Gene Express Program segítségével normalizáltuk.

A megszerzett vérmintákat 1003xg-vel 15 percig normál hőmérsékleten centrifugáltuk, hogy szérummintákat állítsunk elő. Később -80 ° C-on tárolták őket további mérések elvégzése érdekében. Az LDL-koleszterin és a triglicerid szérumkoncentrációit enzimatikus módszerekkel határoztuk meg az USA-ból származó BioVision kereskedelmi készletekkel. További érintett folyamatok voltak: MTT assay, Oil Red O festés, Western blot elemzés, szövettani elemzés és statisztikai elemzés.

Eredmények
Ismeretes, hogy a differenciálódás folyamata során a 3T3-L1 sejtvonalban lipid és hiperplázia felhalmozódás lép fel. Ezeket a sejtvonalakat méhméreggel kezeltük, amelynek koncentrációja 1,25 ug/ml-től kezdődött és 40 ug/ml-ig terjedt MDO-ban vagy BS-ben. A sejtvonalak méhméreggel történő kezelése után a sejtek életképességét MTT (3- (4, 5-dimetil-tiazol-2-il) -2,5-difenil-tetrazolium-bromid) vizsgálattal értékeltük. Megállapították, hogy a méhméregnek nincs semmiféle hatása a sejtek életképességére a táptalajban, de a méhméreg 2,5 µg/ml és magasabb koncentrációk mellett csökkentette a sejtek életképességét.

Meghatároztuk a méhméreg gátló hatását a lipidfelhalmozódásra a méhméreggel és anélkül 9 napig kezelt adipocitákban. Észrevették, hogy a differenciálódás által kiváltott adipociták drámai módon, csaknem kétszeresére növelték a lipidek tárolását a differenciálatlan sejtekhez képest. Másrészt a méhméreg kezelés hatásosan csökkentette a lipidcseppek felhalmozódását, de dózisfüggő rendszerben.

Az olyan transzkripciós faktorok, mint a C/EBP család és a PPARγ, fontos szerepet játszanak az adipociták differenciálódásában és érésében. A méhméreg anti-adipogenezis hatását a differenciált adipocitákban Western blot analízissel és qRT-PCR-rel vizsgáltuk. Megállapítást nyert, hogy a PPARγ, C/EBPδ, C/EBPα és C/EBPβ mRNS-expressziója a differenciálódás által indukált adipociták során felfelé szabályozódott, összehasonlítva a differenciálatlan sejtekben megfigyeltekkel. A méhméreg kezelés segített a C/EBP család mRNS expressziójának csökkentésében, és csökkentette a PPARγ expressziót mind a fehérje, mind az mRNS szintjén.

A méhméreg MAPK útra gyakorolt hatásának vizsgálatához Western blot analízissel határoztuk meg a MAPK útvonalban részt vevő különböző tényezők fehérje expresszióját. Ezt a folyamatot differenciált adipocitákban végeztük. Megállapítottuk, hogy a JNK és az ERK foszforilációja csökkent, míg a p38 foszforilációja megnőtt a differenciálódás során, összehasonlítva a differenciálatlan kontroll sejtek eredményeivel. A JNK és az ERK foszforilációja szignifikánsan felülszabályozott a méhméreggel kezelt adipocitákban, míg a p38 foszforilációja jelentősen csökkent.

Ez a klinikai vizsgálat azt is feltárta, hogy a HFD (magas zsírtartalmú étrend) csoportba tartozó egerek teljes testtömege nőtt, összehasonlítva az ND (normál étrend) csoport testtömegével. Teljesen ellentétben a HFD csoporttal, a méhméreg injekció csökkentette az össztömeget, a súlygyarapodást és a zsírt. Az elhízást általában hiperplázia és a zsírszövet hipertrófiája jellemzi, ezért H és E festéssel megvizsgálták a méhméreg gátló hatásait. A H és E festés elemzési adatai azt mutatták, hogy az egerek HFD csoportja az epididimális zsírszövetben az adipociták hipertrófiáját jelezte, míg a méhméreggel kezelt csoport az adipociták visszafojtott hipertrófiáját mutatta.