5./6. nephrectomia magas sótartalmú étrenddel és nitrogén-oxid-szintáz gátlással kombinálva krónikus vesebetegség kiváltására a Lewis patkányban

Arianne van Koppen

Nefrológiai és magas vérnyomás osztály, Utrechti Egyetem Orvosi Központ

Marianne C. Verhaar

Nefrológiai és magas vérnyomás osztály, Utrechti Egyetem Orvosi Központ

Lennart G. Bongartz

Nefrológiai és magas vérnyomás osztály, Utrechti Egyetem Orvosi Központ

Jaap A. Joles

Nefrológiai és magas vérnyomás osztály, Utrechti Egyetem Orvosi Központ

Absztrakt

Bevezetés

A CKD progresszív jellege, az azt követő végstádiumú vesebetegség, valamint a kapcsolódó kardiovaszkuláris morbiditás és mortalitás miatt egyre növekvő népegészségügyi probléma 1. A CKD progressziójának lassulása ezért kiemelt egészségügyi prioritás. Mivel a CKD-t a homeosztázis összetett rendellenességei jellemzik, integratív állatmodellekre van szükség a CKD fejlődésének és progressziójának tanulmányozásához. A vese különböző sejttípusok széles skálájából áll, amelyek kölcsönhatásba lépnek egymással. Ezt a bonyolultságot nem lehet utánozni in vitro.

A veseelégtelenség előrehaladását a vizelet (a fehérje és a kreatinin mennyiségének mérésére), a vér (plazma karbamid és kreatinin) és a szisztolés vérnyomás gyűjtésével követik nyomon. Tisztában vagyunk azzal, hogy a hipertónia kialakulása pontosabban követhető, ha a farok mandzsetta pletizmografia helyett telemetriát alkalmazunk. Kreatinin-clearance kiszámítható, de hajlamos alábecsülni a GFR csökkenését a patkányok 16-os kiterjedt tubuláris kreatinin-szekréciója miatt, hangsúlyozva az arany standard módszer fontosságát a vesefunkció meghatározására inulin és PAH-clearance alapján 17, 18, 19. Koeners és mtsai. leírta a teljes eljárást 20. Az inulin és a PAH clearance-ét a vizeletmintában (U), a vizelet áramlási sebességében (V) és plazmakoncentrációjukban (P) számítják ki. Korábban a GFR és az ERPF jelentős csökkenését mutattuk ki ebben a modellben a klasszikus clearance technológia alkalmazásával, míg ez kevésbé mutatkozott meg a plazma kreatinin, a plazma karbamid vagy a kreatinin clearance változásaiból 13 .

1. ábra: Az L-NNS időtartama, a magas sótartalmú étrend, az UNX és az SNX. A vesefunkció és a befejezés időpontjának meghatározására szolgáló hosszanti méréseket jelezzük. Ha az SNX után hosszabb követésre van szükség, az idő múlásával 6% NaCl-diéta folytatható.

2. ábra: A mellékvese disszekciója. A mellékvese eltávolítása nélkül, anélkül, hogy megzavarná, helyezzen csipeszeket a zsírba a vese és a mellékvese között, és haladjon az éroszlop felől felfelé, amint azt a piros vonal jelzi. Ábra a Grey's Anatomy of the Human Body 20. amerikai kiadásából, 1918-ból.

3. ábra Szubtotális nephrectomia. A vörös vonalak a vágóéleket jelzik. Ábra a Gray's anatomy of the Human Body 20. amerikai kiadásából, 1918.

4. ábra. Az eltávolított veseszövet százalékos aránya subtotal nephrectomia után két különböző kísérletben. Exp 1; n = 16, exp 2; n = 23.

5. ábra. A veseelégtelenség kialakulása CKD patkányokban az SNX után 6 héttel (s szaggatott vonalak n = 5) szemben az egészséges kontrollokkal (p szaggatott vonalak n = 5) és a CKD patkányok SNX után 12 héttel (£ n = 8), az egészséges kontrollok után ( n = 8). A CKD patkányok L-NNS-t kaptak a 4. hétig, és magas sótartalmú étrendet kaptak az 1. héttől a befejezésig (ez nem látható grafikonon). Az SNX hipertóniát vált ki (farokpletizmográfiával mérve) (A), urémia (B), anémia (C) és proteinuria (D) és a GFR jelentős csökkenése (E) és az ERPF (F) 13. * A jelzett p 21 lehetővé teszi a beadott donorsejtek sejtkövetését a befogadó (nonGFP +) patkányban. A Lewis patkány viszonylag ellenáll a vesekárosodás kialakulásának, és a CKD fejlődése lassú más 22, 15 törzsekkel összehasonlítva. Ezért ötvöztük a vesetömeg 5/6-os részének eltávolítását NO-kimerüléssel és magas sótartalmú étrenddel, mivel ez hasonlít az emberi CKD számos aspektusához, például a magas sótartalomhoz és az endothel diszfunkciójához. Az olvasóknak szem előtt kell tartaniuk, hogy az 5/6-os nephrectomia és a magas sótartalmú étrend és/vagy NO-kimerülés kombinálásának szükségessége a kísérletekhez használt patkányok törzsétől függ.

Az 5/6-os nephrectomiát egylépéses eljárás helyett kétlépcsős eljárásban hajtottuk végre, mivel ezt kevésbé megterhelőnek tekintik az állat számára, kevésbé jár a műtéttel kapcsolatos mortalitással, és állatkísérleti bizottságunk ezt preferálja. A laparatomia helyett a szélső metszést részesítettük előnyben a vesék elérésében, mivel a laparotomia nagyobb kockázattal jár a sebfertőzésben, az öltések fellazulásában, a szubkután sérvben és a belekhez tapadásában, mint a szárny metszésében. Továbbá, ha a kísérleti tervezés laparotómiás beavatkozást foglal magában - amint ez a csontvelő sejtjeinek a maradék vese veseartériájába történő beadására vonatkozó kísérleti tanulmányaink esetében is - nem előnyösebb az SNX-re végző laparotómiák, mivel kerülni kell az ismételt laparotómiákat.

Az 5/6-os vese tömegének műtéti eltávolítását követően számos kritikus probléma léphet fel. Az UNX során nehézségeket okozhat a vese stabilizálása, mivel a környező zsír könnyen leválik. Két módszer használható a vese expozíciójára. 1) Használjon kisebb csipeszeket, hogy megkapja a vesereket, óvatosan haladva lefelé a vese alsó pólusától az erek felé, és óvatosan húzza meg, amíg stabilizálni tudja a vesét. 2) Tompa csipesszel óvatosan húzza ki a vesét a hasból. Amikor a vese ki van téve, gézzel lehet megállítani az ezen eljárás során előforduló vérzést. A vérzés megelőzése érdekében kezdje el húzni a zsírt a vese alsó pólusánál, ahol a zsír erősen kapcsolódik a veséhez.

Fontos, hogy helyet teremtsünk a veseér és a vese körüli csomó között, hogy megakadályozzuk a vérzést a vese eltávolítása után, mivel a csomó a beérkező véráramlás miatt lecsúszhat a veseérekről, gyorsan megtöltve a hasat vérrel. A vér eltávolítására géz használható, és nyomást kell alkalmazni a vérzés megállítására. Csipesszel fogd be a vesét, és tegyél egy új ligatúrát. Ha a vese erek nem vezethetők vissza, tartsa fenn a nyomást, amíg a vérzés le nem áll. Adjon hozzá 1 ml fiziológiás sót a hasüregben lévő vérzés miatti kiszáradás megelőzésére, és várjon körülbelül 5 percet, mielőtt bezárja az izom- és bőrréteget. Különösen gondosan figyelje a patkányokat a következő napokra. Amikor a szalag még mindig a helyén van a vese eltávolítása után, de a vese erek véreznek, a kötés hosszú végeivel le lehet kötni az ereket.

Ha a pólusok boncolása után, annak ellenére, hogy nyomás nehezedik a gél habpárnákra, ha a vérzés továbbra is fennáll, ez valószínűleg egy nagy veseartéria vagy a vese medencéjének sérülése miatt következik be. Ezt a vérzést úgy lehet megállítani, hogy új gélhabos párnákat helyezünk a sebre, ügyelve arra, hogy a maradék felemelése közben ne mozduljon el a habpárna, mivel a nagyobb edények közel vannak a hilumhoz, és hosszabb ideig várakozzunk.

A vér a vizeletben a műtét utáni 2 napig nyomon követhető. Amikor a vesemedence sérült, vagy ha egy nagy veseedény továbbra is vérzik, akkor a hematuria tartósan nyomot fog mutatni. A műtét után tartósan hematuriás patkányokat meg kell semmisíteni, mivel a vérzést nem lehet megállítani. Ha a hematuria a műtét után egy későbbi időpontban figyelhető meg, amely akár 2 héttel is előfordulhat a műtét után, a patkányt szintén meg kell eutanizálni, mivel a vér alvadt a vesemedencében, és végül eltömíti az uretert és a hólyagot, ami elzáródáshoz vezet.