A propolisz, a méhpempő, a méhpollen és a Ronozyme-kiegészítés hatása a japán fürjek (Coturnix Coturnix Japonica) étrendjében a sárgája lipidperoxidációjára

Yılmaz S 1 *, Tatli Seven P 2, Kaya E 1

1 Biokémiai Tanszék, Állatorvos-tudományi Kar, Firat Egyetem, Elazig, Törökország.
2 Állat-táplálkozási és táplálkozási betegségek tanszéke, Állatorvos-tudományi Kar, Firati Egyetem, Elazig-Törökország.

Seval Yilmaz,
Professzor, Állatorvos-tudományi Kar,
Biokémiai Tanszék, Firat Egyetem, Elazig, Törökország.
Tel .: +90 5363533228
E-mail: [email protected]

Fogadott: 2017. május 29 .; Elfogadott: 2017. június 21 .; Közzétett: 2017. június 22

Idézet: Yılmaz S, Tatli Seven P, Kaya E (2017) A propolisz, a méhpempő, a méhpollen és a Ronozyme-kiegészítés hatása a japán fürjek (Coturnix Coturnix Japonica) étrendjében a sárgája lipidperoxidációjára. Int J Vet Health Sci Res. 5 (5), 183-189. doi: dx.doi.org/10.19070/2332-2748-1700037

Ez a tanulmány a propolisz, a méhpempő, a méhpollen és a Ronozyme-kiegészítés lehetséges hatásait fedezi fel olyan étrendekben, amelyek előnyösek lehetnek a japán fürjek (Coturnix coturnix japonica) számára. Összesen százhatvan japán fürjet használtunk 43 napos korban, és véletlenszerűen felosztottuk őket 4 ismétlődő csoportba, amelyek mindegyike 32 állatot tartalmazott. A kísérleti csoportok az alábbiak szerint: a kontrollcsoportot bazális étrenddel etették, a méhpempő-csoportot 500 mg/kg-os étrenddel adták a vízhez, a propolisz-csoportot szájon át egy 4 g/kg-os étrenddel kiegészített bazális étrenden, 1 g/kg étrenddel kiegészített bazális étrendet szájon át táplálták, a Ronozyme csoport 74 napig szájon át 1 g/kg diétával kiegészített bazális étrendet táplált. A sárgája malondialdehid (MDA) szintjét találtuk a legmagasabbnak a kontroll, méhpempő és Ronozyme csoportokban, összehasonlítva a méh pollen és propolisz csoportokkal (p

Teljes szöveg -HTML

Malondialdehid; Tojássárgája; Fürj; Méhszurok; Méhpempő; Méh pollen; Ronozyme.

A tojások magas tápértékűek, és az emberi szervezet fenntartásához és normális működéséhez számos szükséges összetevőt tartalmaznak [1].

A szabad gyökök által történő lipid oxidáció a tojások minőségromlásának egyik elsődleges mechanizmusa. A membrán-foszfolipidek rendkívül telítetlen zsírsav-frakciójában kezdődik, amely hidroperoxidok képződéséhez vezet, amelyek hajlamosak további oxidációra vagy bomlásra olyan másodlagos reakciótermékekként, mint a rövid láncú aldehidek, ketonok és más oxigénezett vegyületek, amelyek káros hatással lehetnek a lipidekre, pigmentek, fehérjék, szénhidrátok, vitaminok és az általános minőség az íz, a szín és a tápérték csökkenésével és az eltarthatóság korlátozásával [2]. A malondialdehid (MDA) az egyik legfontosabb lipidperoxidációs termék. Ez az aldehid a zsírsavak lipidperoxidációja során keletkezik három vagy több kettős kötéssel [3].

A tojások és a hús oxidatív stabilitásának étrendi antioxidáns dúsítással történő javítására irányuló vizsgálatok [2, 4] fordított összefüggést tárnak fel az étkezési antioxidáns szintje és a sárgájában, a húsban található MDA-tartalom között, amely egy baromfitermékekben található lipidperoxidációs mutató. Korábban szintetikus antioxidánsokat használtak abból a célból, hogy megakadályozzák a lipid-oxidációt láncot hordozó peroxicsoportok eltávolításával vagy a lipidgyökök képződésének csökkentésével [5]. Az elmúlt évtizedben erőteljes tendencia mutatkozik a természetes eredetű szerves antioxidánsok felhasználására az állatok egészségének és termékeinek oxidációval szembeni védelme érdekében [6]. Ennek eredményeként jelentős érdeklődés merült fel a természetes kiegészítők használata iránt, amelyek alternatívaként szolgálhatnak a szintetikus kiegészítőkkel a tojás minőségének javítása céljából [7-9].

A méhpempő vitaminokat, ásványi anyagokat, enzimeket és antibiotikum-összetevőket is tartalmaz. A méhpempő számos farmakológiai aktivitást mutat be, beleértve a daganatellenes, antimikrobiális, antioxidáns, értágító és hipotenzív aktivitást, valamint növekedést serkentő és fertőzésmegelőző, antihiperkoleszterinémiás és gyulladáscsökkentő tevékenységeket.

A propolisz (méhragasztó) egy természetes gyantás kaptártermék, amelyet a méhek növényekből gyűjtöttek össze, különösen virágból és levélrügyből. A propolisz általában 30% méhviaszt, 5% pollent, 50-55% gyantás anyagot és 15% illóolajat tartalmaz [10]. A propolisz sokféle biológiai aktivitást mutatott: antimikrobiális aktivitás különböző baktériumok és élesztő, paraziták ellen; antioxidáns, citotoxikus és potenciális daganatellenes aktivitás, antipsoriatikus, gyulladáscsökkentő és fájdalomcsillapító hatás, elhízás és hepatoprotektív hatások [11, 12].

A méh pollen egy virágszerű virágpor által termelt porszerű anyag, nektárral és méh váladékkal keverve, amelyet a mézelő méhek gyűjtenek össze. A pollent nevezik az egyetlen tökéletesen teljes tápláléknak, és a méh pollenjének fő biológiai összetevői a fenolsav-származékok és a polifenol-vegyületek, főleg a flavonoid-glikozidok. A flavonoidok úgynevezett másodlagos növényi vegyületek, amelyek eltérő fontos fiziológiai és farmakológiai aktivitással bírnak. Különböző biológiai tulajdonságokkal rendelkeznek, mint például antioxidáns, öregedésgátló, rákellenes, gyulladáscsökkentő, antiaterosclerosisos, kardioprotektív hatásúak és javítják az endothel funkcióját [13, 14].

A Ronozyme® ProAct étrendbe való beépítése hozzájárul a takarmányköltségek csökkentéséhez anélkül, hogy rontaná a teljesítményt. A fehérje minden állatállomány-étrend egyik legdrágább összetevője, de elengedhetetlen a növekedéshez. A kihívás tehát a fehérje lehető leghatékonyabb felhasználása a takarmányozási költségek csökkentése érdekében, az állatok egészségének veszélyeztetése nélkül. A proteázok olyan enzimek, amelyek lebontják a fehérjemolekulákat az állatok számára szükséges aminosavakká és peptidekké. A kifejezetten állati étrendbe való beépítésre kifejlesztett Ronozyme jelentősen növeli a fehérje emészthetőségét. Kiegészíti a takarmányban természetesen előforduló proteázokat, és jelentősen növeli az aminosav- és peptidellátást az állatok teljesítményének javítása érdekében. Javítja a fehérjeforrások és gabonafélék sokféle emészthetőségét, lehetővé téve az étrend költségeinek megtakarítását [15].

Ezt a kísérletet arra használták, hogy megvizsgálják a méhpempő, a propolisz, a méhpollen és a Ronozyme-kiegészítés japán fürjek (Coturnix coturnix japonica) étrendjében a sárgájában lévő MDA tartalmára gyakorolt hatását.

Anyagok és metódusok

Összesen százhatvan, 43 napos japán fürjet használtunk fel, és 4 ismétlődő csoportba osztottuk, amelyek mindegyike 32 állatot tartalmazott. Az összes madarat 40 × 32 cm belső méretű ketrecbe helyezték. A kísérleti csoportok a következők: Az 1. csoportba (kontroll) egy alapdiétát adtak. A 2. csoportot 500 mg/kg dietroyaljelly-vel adtuk a vízhez [16]. A 3. csoport 4 g propolisz/kg étrenddel kiegészített bazális étrendet etetett. A 4. csoportba 1 g méh pollen/kg táplálékkal kiegészített bazális étrendet adtak [17]. Az 5. csoport 1 g Ronozyme/kg étrenddel kiegészített bazális étrendet etetett. A kísérletet 74 napig folytattuk.

Az étrend összetevőit és kémiai összetételét az 1. táblázat mutatja be. A takarmány-összetevők (szárazanyag, nyersfehérje, éterkivonat és hamu) kémiai összetételét szárított mintákként AOAC [18] eljárásokkal elemeztük. A kukorica- és szójabab-alapú takarmányokat izonitrogénnek és izoenergikusnak állítottuk össze az NRC [19] ajánlása szerint. Valamennyi csoportot azonos környezeti körülmények között tartottuk. A takarmányt és a vizet ad libitum adták.

Asztal 1:

1. táblázat: A kísérleti étrend összetevői és kémiai összetétele (g/kg).

Méhpempőt és méhpollent egy törökországi kereskedelmi cégtől nyertek. Méhpempő desztillált vízben feloldva, felhasználásig -20 ° C-on fagyasztva tartva. A méhpempő kémiai összetételét gázkromatográfia-tömegspektrometriás (GC-MS, Agilent GC 6890 gázkromatográf) elemzésekkel értékeltük (2. táblázat). Ronozyme-t kaptunk a DSM Nutritional Products Inc.-től. A pollent és a Ronozyme-ot homogén módon gondosan összekeverték az alap diétával. A propolisz mintákat a Karabük tartományból (Közép-Fekete-tenger) gyűjtötték. Ezután a propolisz mintákat a feldolgozásig sötétben szárítottuk. A mintákat egy hétig szobahőmérsékleten 100 ml 70% -os etanollal extraháltuk. Szűrés után az extraktumot vákuum-bepárlóval 45 ° C-on bepároljuk, majd felhasználjuk a kísérletben. A propolisz fő összetevőinek kimutatására GC-MS-t végeztünk az Agilent MSD 5973 tömegdetektorhoz kapcsolt gázkromatográffal elektronütközéses ionizáció alatt. A propolisz minta fő vegyületeit azonosítottuk és a 3. táblázatban soroljuk fel.

2. táblázat:

2. táblázat: A méhpempő kémiai összetétele a GC-MS segítségével.

3. táblázat:

3. táblázat: A propolisz kémiai összetétele a GC-MS szerint.

A kísérlet végén csoportonként 42 tojást (minden egyes ismétlésből 2 tojást) választottunk véletlenszerűen a sárgája MDA-koncentrációjának meghatározására. A sárgájából vett mintákat 1,15% KCl-dal 1: 10 arányban (tömeg/térfogat) keverjük, majd töredezett jégre homogenizáljuk. A homogenizátumokat 18 000xg (+ 4 ° C) hőmérsékleten 30 percig centrifugáltuk az MDA koncentrációk meghatározásához. A lipidperoxidáció markerének MDA-koncentrációját Placer és munkatársai [20] módszerével határoztuk meg a tiobarbitursavval végzett reakció alapján. A reagens koncentrációit (10%, w/v triklór-ecetsav és 0,168%, w/v TBA) egy üvegcsőben összekevertük. Az oldatot 20 percig melegítjük. A csapadékot 4000 g-vel 10 percig végzett centrifugálással eltávolítottuk. A kialakult MDA rózsaszínű komplexet hozott létre tiobarbitursavval, és az abszorbanciát 532 nm-nél leolvastuk. Az MDA-tartalmat nmol/ml-ben fejeztük ki.

Az összes tojást a kísérlet végén összegyűjtöttük, és a sárgáját MDA szintekkel értékeltük. A sárgája MDA-szintje a kontroll, méhpempő és Ronozyme csoportokban volt a legmagasabb, összehasonlítva a méh pollen és propolisz csoportokkal (p

1.ábra:

1. ábra A méhpempő, a propolisz, a méh pollen és a ronazyme-kiegészítés hatása a sárgája MDA szintjére.

Számos tanulmány számolt be az étrend-kiegészítők hatásáról, mint a tojások oxidatív stabilitásának javításáról. Egy tanulmányban az étrendnek a héjas tojások lipid oxidációjára gyakorolt hatásának vizsgálatára hűtőszekrényben történő tárolás során minden egyes alcsoportból 4 frissen gyűjtött tojást használtak, összesen 16 tojást minden egyes diétás kezelés során. Négy tojást, mindegyik étrendi kezelés különböző alcsoportjából, közvetlenül elemeztük a sárgája MDA tartalmát, míg a többit + 4 ° C-on tároltuk, hogy elemezzük 4 tojásból álló készletben, 30, 45 és 60 napos tárolás mellett. Az MDA képződésével mérve a lipid oxidáció mértéke a kezelések között különbözött, de a tárolási idővel nem változott. A sárgájában található MDA-koncentrációknak a táplálékban már kialakult MDA fogyasztásának és későbbi lerakódásának, vagy a tyúkok által az emésztés során az MDA in vivo termelésének és lerakódásának kellett lennie [8].

A lipidoxidáció mértékét általában a 2-tiobarbitursav (TBA) és az MDA reakcióján alapuló vizsgálattal határozzuk meg savas pH-n történő melegítés közben. Tapasztalt kutatók arra figyelmeztettek, hogy ez a vizsgálat félrevezető eredményeket adhat, mivel a képződött TBA-MDA komplex mellett más vegyületek is hozzájárulnak, és ezért gyakran használják a „tiobarbitursav-reaktív anyagok” (TBARS) kifejezést [24]. A TBA reaktivitását számos tényező befolyásolhatja, ideértve az MDA mint artefaktum képződését a vizsgálat során végzett elemzés során és az MDA előfordulását különböző kötött formákban [25]. A jelen vizsgálatban alkalmazott spektrofotometriai módszer lényegesen javítja a mérések megbízhatóságát, mivel a TBA-MDA komplex alkalmazott harmadik rendű derivált spektrális elemzése kiküszöböli az egyéb reaktív vegyületek potenciális interferenciáját, míg a minta előkészítési eljárás gátolja az in vitro lipid oxidációt maga a vizsgálat.

A méhpempő és a Ronozyme étrendi bevitele nem befolyásolta a sárgája MDA koncentrációját. Hasonlóképpen, Yalçın és munkatársai [26] azt találták, hogy az élesztő autolizátum-kiegészítés nem befolyásolja a tojások MDA-koncentrációját. Zhang és munkatársai [27] azonban arról számoltak be, hogy az S. cerevisiae táplálékkiegészítése javította a brojlerhús oxidatív stabilitását, és felvetették, hogy ez annak köszönhető, hogy a S. cerevisiae-ben jelen lévő néhány antioxidáns tényező elmozdítja az oxidatív zsír- vagy zsírsavprofilt a hús.

Az élő szervezetek képesek alkalmazkodni az oxidatív stresszhez azáltal, hogy előidézik az antioxidáns enzimek szintézisét és károsító eltávolító/helyreállító enzimeket [28]. Megállapították, hogy a sárgájában az MDA szint szignifikánsan magasabb volt a kontroll csoportban a méh pollen és a propolisz csoporthoz képest. Ahmad és munkatársai [29] a megnövekedett telítetlen zsírsavbevitel következtében a keringő trigliceridek csökkenéséről számoltak be a madarakban, ami csökkentheti a lipidek rendelkezésre állását a sárgája képződéséhez. Beszámoltak arról is, hogy a telítetlen zsírsavak befolyásolhatják a keringő ösztradiolt, és felvetették, hogy az étrendben telítetlen zsírsavak megváltoztathatják a madarak hormonális anyagcseréjét. Galal és munkatársai, [30] beszámoltak arról, hogy a tojáshéj minőségét jelentősen befolyásolta a propolisz pótlása, míg a tojáshéj százalékát és vastagságát szignifikánsan növelte a tojás, amelyet 100 és 150 mg propolist tartalmazó táplálékkal táplált tyúkokból állítottak elő. Tatli Seven [31] arról számolt be, hogy hőterhelés esetén a propolisz pótlása jelentősen megnövelte a tojóhéj vastagságát és a tojáshéj súlyát a tojótyúkoknál. Ennek oka lehet a kalcium emészthetőségének és felszívódásának javulása, amely a propoliszban található savszármazékokból, például benzoesavból, 4-hidroxi-benzoesavból származik.

Jelen tanulmányban a sárgája MDA szintjének növekedése a kontrollcsoportban bizonyíthatja az oxidatív stresszt. A jelenlegi vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a propolisz és a méh pollen kiegészítése a fürj diétánál sokkal jobban javult, mint a méhpempő és a Ronozyme lipidperoxidációhoz való kiegészítése. Ennek oka lehet a méhpempő és a propolisz erősebb antioxidáns tartalma, mint a méhpempőé és a Ronozyme, valamint annak antiimmun tulajdonságai. A méh-propolisz és/vagy pollen étrendbe való felvétele csökkentette a lipid oxidációját és meghosszabbította a tojás eltarthatóságát, ha a propolisz és a méhek pollenjei telítetlen zsírsav-összetételűek voltak, amelyeket rétegek fogyasztanak. Ennek oka lehet a mézelő méhészeti termékek antimikrobiális és immunstimuláló hatása.

Az antioxidánsok alternatívájaként használt propolisz és méh pollen pozitív hatással volt a lipid peroxidációra. Ezért a propolisz és a méh pollen tojás-promóterként ajánlható a fürjtermelésben. Használhatók a lipid-oxidáció megelőzésére. Megnyitja a méh pollen és a propolisz takarmány-adalékként való felhasználását a baromfi teljesítményének javítása érdekében. Összefoglalva, a jelen tanulmány azt sugallta, hogy a méh pollenje és a propolisz étrend kiegészítése potenciálisan védő aktivitást gyakorolhat a lipidperoxidációra. A propolisz és a méh pollen adalékként használható a baromfi adagjában, az antioxidáns kapacitás miatt.