Az adlay, a hajdina és az árpa hatása a transzitációs időre és az antioxidáns rendszerre az elhízás okozta patkányokban

Jung Yun Kim

1 Élelmezési és táplálkozási osztály, Bucheon Egyetem, Bucheon 420-735, Korea.

Bo Kyung Son

2 Élelmezési és Táplálkozási Tanszék, Hanyang Egyetem, 17 Haengdang-dong, Seongdong-gu, Szöul 133-791, Korea.

Énekelte Sun Lee-t

2 Élelmezési és Táplálkozási Tanszék, Hanyang Egyetem, 17 Haengdang-dong, Seongdong-gu, Szöul 133-791, Korea.

Absztrakt

Bevezetés

Az Adlay (Coix lacryma-jobi) (AD) széles körben elterjedt, mint egészséges táplálékkiegészítő [1,2]. Az AD fogyasztása hatékonyan csökkenti a szérum koleszterinszintet, a triglicerideket és az alacsony sűrűségű lipoprotein koleszterint, növeli a nagy sűrűségű lipoprotein koleszterint, csökkenti a máj lipidjeit, megakadályozza a zsírmájat és növeli a lipid kiválasztást [3]. A hajdina (Fagopyrum esculentum) (BW) nagy mennyiségben tartalmaz fehérjét, keményítõt és vitaminokat. A BW fehérjéi jól kiegyensúlyozott, magas biológiai értékű aminosavakból állnak, és a BW kiváló szemcse-kiegészítő [4]. Ezenkívül a BW több rutint tartalmaz, mint a legtöbb növény, amely antioxidáns, vérzéscsillapító és ereket védő tulajdonságokkal rendelkezik [5]. Az árpa (Hordeum spp.) Bioaktív vegyületei, például a β-glükánok és a tokolok miatt megújult érdeklődésre számíthat a funkcionális élelmiszerek összetevőjeként [6,7]. Az árpának nagy a genetikai variációja a fajták között, és fontos genetikai tulajdonság az amiláz-amilopektin arányban változó genotípusok jelenléte [7]. A nyálkás árpa (GB) további oldható rostot tartalmaz, amely érdekes lehet a glükóz és a lipid anyagcsere szempontjából [8].

Számos jelentés kimutatta, hogy a teljes kiőrlésű gabonák táplálkozási szempontból összehasonlíthatók, vagy akár felülmúlják a fehér rizst (WR) [9]. A teljes kiőrlésű gabonák olyan mikroelemeket is tartalmaznak, mint az E-vitamin, a folát, a fenolsavak, a cink, a vas, a szelén, a réz, a mangán, a karotinoidok, a betain, a kolin, a kén aminosavak, a fitinsav, a ligninek, a lignánok és az alkil-rezorcinok, amelyek mindegyike potenciálisan tartalmazhat antioxidáns hatások [9]. A korpafrakció azonban fontosabb szerepet játszik a gabona feldolgozása során felszabaduló csíra miatt.

Általában a teljes kiőrlésű gabonák általában javítják az állatok antioxidáns státuszát, és ez a hatás erősebbnek tűnik az oxidatív stressz körülményei között (magas zsírtartalmú étrend, hiperkoleszterinémiás és Apo E-hiányos egerek) [10]. A jelen vizsgálatban magas zsírtartalmú étrendet alkalmaztak elhízás kiváltására patkányokban. Különböző szemű étrendeket fogyasztottak annak érdekében, hogy megfigyeljék a kísérleti szemek hatását a magas zsírtartalmú étrend által okozott oxidatív stresszre. A kísérleti gabonafélék közül a WR a koreaiak alapvető étele. Jelen vizsgálatot az AD, BW és GB táplálkozási minőségének értékelésére és összehasonlítására végeztük, különös tekintettel a rostokra és az antioxidáns komponensekre. Az étrendi rostok és a fenolos vegyületek, amelyek nagy mennyiségben vannak teljes kiőrlésű gabonákban, serkentik az emésztést azáltal, hogy fokozzák az epében gazdag epesavak emésztésében és szekréciójában részt vevő enzimek aktivitását [11].

Megvizsgáltuk azt is, hogy ezek a szemek hogyan befolyásolják a táplálék gyomor-bél traktusban való tartózkodásának időtartamát és a májenzim aktivitását a különböző szemcsekombinációval etetett patkányokban. Bár minden gabona lipid- és kalóriatartalma eltérő, természetes szemeket használtunk, mivel a tanulmány célja az volt, hogy megmérje a gyakran fogyasztott természetes szemek hatását.

Anyagok és metódusok

Állatok és étrend

Hím Sprague-Dawley patkányokat (n = 40; életkor, 4 hét; súly, 50 g) a Samtakói Állatközpontból (Dél-Korea) szereztünk be. Valamennyi állatot gondozták az Országos Kutatási Tanács laboratóriumi állatok gondozására és felhasználására vonatkozó útmutatójának megfelelően.

Asztal 1

A fehér rizst, adlayt, hajdinát vagy nyálkás árpát tartalmazó kísérleti étrendek összetétele (egység/kg)

Az ásványi keverék (g/kg keverék) vízmentes kalcium-karbonátot 357, egybázisú kálium-foszfát 196-ot, kálium-citrátot, trikálium-monohidrátot 70,78, nátrium-kloridot 75,00, kálium-szulfátot 46,6, magnézium-oxidot 24, vas-citrátot 6,06, cink-karbonátot 1,65, mangán-karbonátot 0,63, réz-karbonát 0,3, kálium-jodát 0,01, vízmentes nátrium-szelenát 0,103, ammónium paramolibdát · 4H2O 0,00795, nátrium-metasillikát · 9H2O 1,45, króm-kálium-szulfát · 12H2O 0,275, ammónium-vanadát 0,0066, lítium-klorid 0,0174, bórsav 0,08145, nátrium-fluorid 0,0635 karbonát 0,0318 és porított szacharóz 221,026

Vitaminkeverék (g/kg keverék) nikotinsav 3,0, Ca pantotenát 1,6, piridoxin-HCl 0,7, tiamin-HCl 0,6, riboflavin 0,6, folsav 0,2, biotin 0,02, B12-vitamin (0,1% mannitban) 2,5, E-vitamin (500 NE/g) 15,0, A-vitamin (500 000 NE/g) 0,8, D3-vitamin (499 000 NE/g) 0,25, K1-vitamin (filokinon) 0,075 és porított szacharóz 974,655

WR, fehér rizs; AD, adlay; BW, hajdina; GB, nyálkás árpa

A patkányokat standard rozsdamentes acél ketrecekben helyezték el 24 ° C-on, páratartalom-szabályozott (60 ± 10%) helyiségben, 12 órás fény és sötét ciklus mellett (mesterséges fény 07: 00-19: 00 között). A patkányok ad libitum módon kaptak vizet és ételt. A kísérlet végén az összes patkányt egy éjszakán át megfosztották az élelemtől, és éteres érzéstelenítésben felölték őket. Minden patkány fő szervét összegyűjtöttük, jéghideg izotóniás sóoldattal mostuk, és a lemért szövetmintákat az elemzésig -70 ° C-on tároltuk.

Élelmi rostok mérése

A szemeket három térfogat citrom pufferben (pH 5,5) 2 órán át folyamatos keverés közben 55 ° C-os vízfürdőben áztattuk, ioncserélt vízzel mostuk, fagyasztva szárítottuk, őröltük, hogy 80 mesh szitán (150 µm) átmenjen, és hexánnal zsírtalanítva. A gabonából származó élelmi rostot AOAC módszerrel elemeztük, módosításokkal. Oldható (SDF) és vízben oldhatatlan élelmi rostot (IDF) készítettünk. Száz g zsírtalanított szemport összekevertünk 500 ml foszfátpufferrel (pH 6,0), és hőstabil α-amilázzal (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA) kezeltük 95 ° C-on 15 percig rázással. 5 percenként. A mintákat ezután lehűtöttük, pH-ját 7,5 ± 0,2-re állítottuk be 0,275 N NaOH-val, amiloglükozidázzal (Sigma Chemical) emésztettük 60 ° C-on 30 percig, majd a pH-t 0,325 M HCl-dal 4,0-4,6-ra állítottuk. A proteinek és a keményítő eltávolításához a mintákhoz proteázt (Sigma Chemical) adtak. Ezt követően a mintákat 60 ° C-on reagáltattuk 30 percig, és egy éjszakán át 95% -os etanollal kicsapattuk szobahőmérsékleten.

Ezután üvegszűrőn szűrjük át. A maradék maradék az IDF, a szűrlet pedig az SDF. Az emésztetlen fehérje- és hamutartalom elemzése után az IDF-tartalmat a maradék értékeként határoztuk meg, amelyből kivontuk a fehérje és a hamutartalom mennyiségét. Ami az SDF-et illeti, a tégelyen leszűrt maradék folyadékot 90% -os etanol hozzáadása után hagytuk, majd újra szűrtük, és etanollal és acetonnal mostuk. Ezután a maradékokat ugyanazon módszerrel kezeltük, mint az IDF, az SDF mennyiségi meghatározásához. Az összes élelmi rostot (TDF) meghatároztuk az IDF és az SDF hozzáadott értékeként.

A béltranzit idő mérése

A béltranzit idejét úgy figyeltük meg, hogy minden étrendben ragyogó kék színezéket (0,5%) vettünk fel, mint felszívhatatlan markert. Az állatok a szokásos táplálékból 16:00 és 19:00 között 3 órás absztinencia után azonnal fogyasztották a markertartalmú étrendjüket annak biztosítására, hogy ezen éjszakai állatok táplálékfogyasztási szokásai ne sérüljenek. A marker-tartalmú étrendeket 19: 00-kor adták meg. Az első színes székletpellet megjelenési idejét ezt követően rögzítettük. Ezt az aktivitást egész éjjel másnap reggelig figyeltük az első színes pellet megjelenéséig. Fehér szűrőpapírlapokat terítettek a ketrecek alá, hogy megkönnyítsék a kék színű ürülék könnyű azonosítását.

A máj tiobarbitursav-reaktív anyagának mérése

A máj tiobarbitursav-reaktív anyagának (TBARS), elsősorban a malondialdehidnek (MDA) [14] a lipid-peroxid-termékeinek koncentrációját Sinnhuber és Yu [15] -ből módosított módszerrel mértük tiobarbitursavval, 1,1,3,3 -tetraetoxi-propán (Aldrich Chemical Co., Szöul, Korea) standardként. A TBARS értékeket nmol/mg fehérje értékben fejeztük ki. A fehérje meghatározást Bradford módszerrel [16] végeztük, szarvasmarha szérum albumint (Sigma Aldrich Korea Ltd., Szöul, Korea) használva standardként. Az összes vizsgálatot három példányban hajtottuk végre Beckman-Coulter DU 400 spektrofotométerrel (Fullerton, CA, USA).

A máj antioxidáns enzim aktivitásának mérése

A szuperoxid-diszmutáz (SOD, EC 1.15.1.1) aktivitását kereskedelmi készlet (OXIS International Inc., Beverly Hills, Kalifornia, USA) segítségével mértük. A módszer az 5, 6, 6a, 11b-tetrahidro-3, 9, 10-trihidroxi-benzo [c] fluor vizes lúgos oldatában bekövetkező autoxidáció sebességének SOD által közvetített növekedésén alapszik, és így 525-nél maximális abszorbanciájú kromofor keletkezik. nm.

A glutation (GSH) szintet, a glutation peroxidáz (GPx, EC 1.4.1.9), a glutation S-transzferáz (GST, EC 2.5.1.18) és a glutation reduktáz (GR, EC 2.5.1.18) aktivitást egy kereskedelmi készlettel (OXIS International) mértük. ). A GSH mérés két lépésben zajló kémiai reakción alapul. Az első lépés szubsztitúciós termékek (tioéterek) képződéséhez vezet egy szabadalmaztatott reagens, 4-klór-1-metil-7-triflurometil-kinolinium-metil-szulfát és a mintában található összes merkaptán között. A második lépés a β-elimináció, amely lúgos körülmények között megy végbe. A reakciót 30% NaOH közvetíti, amely a GSH-val kapott szubsztitúciós terméket (tioétert) kromofór-tionzá alakítja, amelynek maximális abszorbancia hullámhossza 400 nm-nél van. A GPx aktivitás vizsgálata a c-GPx aktivitás közvetlen mérésén alapul. Az oxidált glutationt (GSSG), amelyet egy szerves peroxid c-GPx általi redukciójával állítottak elő, a GR redukált állapotába visszanyeri. A NADPH NADP + -vá történő oxidációja az abszorbancia csökkenésével jár 340 nm-en.

Statisztikai analízis

2. táblázat

A fehér rizs, az adlay, a hajdina és a nyálkás árpa élelmi rosttartalma