Az anyák elhízási programjai csökkentették az agyalapi mirigyben a leptin jelátvitelt, és megváltoztatták a GH/IGF1 tengely működését, ami megnövekedett zsírbetegséghez vezetett felnőtt utódokban.

Egyformán járult hozzá ehhez a munkához: Nuermaimaiti Tuersunjiang, John F. Odhiambo

programjai

Szerepek konceptualizálás, formális elemzés, vizsgálat, módszertan, projekt adminisztráció, vizualizáció, írás - eredeti tervezet

Jelenlegi cím: Mikrobiológiai és Molekuláris Genetikai Tanszék, Kaliforniai Egyetem Irvine, Irvine, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

Egyformán járult hozzá ehhez a munkához: Nuermaimaiti Tuersunjiang, John F. Odhiambo

Szerepek Adatkúra, formális elemzés, vizsgálat, módszertan, projekt adminisztráció, vizualizáció, írás - eredeti vázlat, írás - áttekintés és szerkesztés

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

Szerepek Formális elemzés, vizualizáció

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

Szerepek konceptualizáció, finanszírozás megszerzése, írás - áttekintés és szerkesztés

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

Szerepek konceptualizáció, adatkezelés, finanszírozás megszerzése, vizsgálat, projekt adminisztráció, írás - eredeti vázlat, írás - áttekintés és szerkesztés

Affilációs központ a magzati programozás tanulmányozására, Állattudományi Tanszék, Wyomingi Egyetem, Laramie, Wyoming, Amerikai Egyesült Államok

  • Nuermaimaiti Tuersunjiang,
  • John F. Odhiambo,
  • Desiree R. Shasa,
  • Ashley M. Smith,
  • Peter W. Nathanielsz,
  • Stephen P. Ford

Ábrák

Absztrakt

Fehérjekivonás és Western-blotolás

A fehérjét homogenizálással extraháltuk

100 mg hipofízis, a hipotalamusz ívelt magja és a májszövetek jéghideg lízispufferben, politron homogenizátor alkalmazásával. A homogenátumokat ezután centrifugáljuk, és a felülúszókat 2x standard SDS minta töltőpufferrel összekeverjük, majd 95 ° C-on 5 percig forraljuk. Körülbelül 50 μg fehérje-kivonatot különítettek el SDS-PAGE gélekben, és nitrocellulóz membránokba helyezték át immunoblotta céljából primer antitestekkel a leptin, OB-Rb, GH felszabadító hormon (GHRH), GH gátló hormon (GHIH, szomatosztatin), GH receptor ( GHR), IGF1, IGF-kötő fehérje 3 (IGFBP3), IGF1 receptor (IGF1R), 11 β hidroxi-szteroid-dehidrogenáz (HSD) 1, 11-β HSD2, Hexose-6-foszfát-dehidrogenáz (H6PD) és β-aktin. A membránokat megfelelő másodlagos antitestekkel inkubáltuk, majd fokozott kemilumineszcencia (Amersham Biosciences) és röntgenfilm expozíció segítségével tettük láthatóvá. A célfehérje sávsűrűségét ImageQuant TL szoftverrel (Amersham Biosciences) elemeztük, és a p-aktin sűrűségének megfelelően normalizáltuk a korábban leírtak szerint [30].

Statisztikai analízis

Az ismételt változókat az SAS (SAS Institute Inc., Cary, NC) PROC MIXED eljárásaival elemeztük, ismételt mérésekkel, beleértve a leptin, az ACTH és a kortizol elemzését a különböző időpontokban. A modell időt, kezelést és kölcsönhatásukat tartalmazta az ismételt mérésekhez. A PROC CORR-t használtuk az ACTH és a kortizol korrelációs elemzéséhez. A nem ismétlődő változók közötti különbségeket a PROC GLM által SAS-ban végzett varianciaanalízissel határoztuk meg, a modell kimutatásban szereplő kezeléssel. A különbségeket szignifikánsnak tekintettük P≤0.05, a tendenciákat P≤0.10. Az adatokat átlag ± SEM formában mutatjuk be.

Eredmények

Az ACTH plazma és a kortizol metabolizmusát szabályozó enzimek kortizol- és máj expressziója

Az ACTH plazmakoncentrációi hasonlóak voltak a CON és a MO utódok között mind az etetési kísérlet elején, mind annak végén (1A. Ábra). A boncoláskor azonban szignifikáns növekedés volt tapasztalható (P 0,10).

a, b, c Azt jelenti, hogy ± SEM különbözõ szubindexekkel különbözik (P 2. ábra. A 11βHSD1 (A, C), 11βHSD2 (B, D) gén- és fehérje expressziója és a H6PD (E) fehérje expressziója a CON nyitott rudak, n = 6) és MO (szilárd rudak; n = 6) felnőtt hím F1 utódok.

# A ± SEM jelentése különbözni szokott (P 3. ábra. A GH és a leptin receptor (OB-Rb) lokalizációja a paraffinba ágyazott hipofízis szakaszokon kettősen jelölt immunfluoreszcens mikroszkóppal.

GH (zöld) pozitív sejtek (A); OB-Rb (vörös) pozitív sejtek (B); és egyesített képek a GH és OB-Rb-t expresszáló sejtekhez (C), amelyek szomatotrópokban ko-lokalizációt mutatnak.

A GH/IGF1 tengely alkatrészeinek és szabályozóinak kifejezése

Meghatároztuk a hipotalamusz GHRH és GHIH peptidjeinek fehérje expresszióját, és ezekben a peptidekben egyik sem mutatott szignifikáns különbséget (P> 0,10) a CON és MO felnőtt utódokban. Továbbá a GHRH/GHIH aránya nem különbözött a MO és CON csoportok között (az adatokat nem mutatjuk be). Ugyanakkor mind az mRNS, mind az OB-Rb fehérje expressziója az agyalapi mirigyben csökkent (P 0,05) a máj IGFBP3 mRNS vagy fehérje expresszióban találtak (4E és 5E. Ábra).

* A ± SEM jelentése különbözik (P 5. ábra: OB-Rb (A) és GH (B) fehérje expressziója agyalapi mirigyben, valamint GHR (C), IGF1 (D) és IGFBP3 (E) a CON májmintáiban (nyitott rudak, n = 6) és MO (szilárd rudak; n = 6) felnőtt hím F1 utódok.

Tárgyterületek

A PLOS tárgyterületeivel kapcsolatos további információkért kattintson ide.

Szeretnénk visszajelzését. Van-e értelme ezeknek a tárgyköröknek a cikk számára? Kattintson a célra a helytelen Tárgy mellett, és tudassa velünk. Köszönöm a segítséget!

A tárgykör "Növekedési hormon" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Leptin" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Agyalapi mirigy" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Kortizol" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Elhízottság" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Fehérje kifejezés" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Kiválasztás" alkalmazható erre a cikkre? igen nem

Köszönjük a visszajelzést.

A tárgykör "Zsírszövet" alkalmazható erre a cikkre? igen nem