Az elhízással kapcsolatos koenzimek ultragyors egyidejű detektálása egerekben mikrochip elektroforézissel, LIF detektorral

Add hozzá Mendeley-hez

koenzimek

Absztrakt

A hepatikus acil-koenzim A szintetáz (ACS), a karnitin-palmitoil-transzferáz-I (CPT-I) és az acetil-koenzim A karboxiláz (ACC) koenzimek, amelyek az elhízás genetikai típusához kapcsolódnak állatmodellekben. Ez a cikk mikrochip elektroforézis (ME) alkalmazásáról számol be lézer-indukált fluoreszcencia (LIF) detektorral, amely reverz transzkriptáz-polimeráz láncreakción (RT-PCR) alapul, ezen koenzimek (ACS, CPT-I) amplifikált DNS-fragmenseinek kimutatására. és ACC) az egerekből kivont mRNS-ben. Az 50 és 2652 bp közötti DNS-fragmenseket jól feloldottuk ezzel az eljárással, futó pufferrel (1 × TBE), 0,5% polivinil-pirrolidonnal (Mr 1 000 000) bevonó gélként és 0,7% polietilén-oxiddal (Mr 8 000 000) mint szitáló gél pH-ján 8,30 . A három RT-PCR termék szétválasztását ME egyetlen egyszeri futtatással érte el 17 másodpercen belül programozott térerősség-gradiensek (PFSG) alkalmazásával (470 V cm -1 -1 9 másodpercig, 205,8 V cm -1 1 2 másodpercig, 411,6 V cm −1 4 másodpercig, 117,6 V cm −1 2 másodpercig és 470,4 V cm −1 8 másodpercig). Megállapították, hogy az ME-PFSG módszer négyszer gyorsabb, mint az állandó mezőt alkalmazó módszer, és 138-szor gyorsabb, mint a födémgél elektroforézis. Ezenkívül a C57BL/6J egerekben az elhízással kapcsolatos koenzimek amplifikált RT-PCR termékeit csak szubmikro literes minták felhasználásával elemezték.

Előző kiadott cikk Következő kiadott cikk

Kulcsszavak

Ajánlott cikkek

Cikkeket idézve

Cikkmérők

  • A ScienceDirectről
  • Távoli hozzáférés
  • Bevásárlókocsi
  • Hirdet
  • Kapcsolat és támogatás
  • Felhasználási feltételek
  • Adatvédelmi irányelvek

A cookie-kat a szolgáltatásunk nyújtásában és fejlesztésében, valamint a tartalom és a hirdetések személyre szabásában segítjük. A folytatással elfogadja a sütik használata .