Nagyon alacsony születési súlyú csecsemők plazma- és vörösvérsejt-zsírsavai, kizárólag kifejezett koraszülött emberi tejjel táplálva

Absztrakt

Az ARA (C20: 4ω6) és a DHA (C22: 6ω3) a szülő esszenciális FA, az LLA (C18: 2ω6) és az LNA (C18: 3ω3) lánc megnyúlásával és deszaturációjával nyert domináns LCP. Az LCP feltételesen elengedhetetlen lehet a koraszülöttek számára (1–3). Az ARA szintje a magzat növekedésével (4) és a csecsemőkorban (5) társult. A DHA-hoz rendelt koraszülöttek korai látásélessége jobb, mint a kontroll csecsemőké (1-3). Az anyatejjel táplált koraszülöttek DHA-értéke magasabb, és (6) vagy nem (7) lehet jobb a látásélességük. Úgy gondolják, hogy a tápszerrel táplált csecsemők szoptatott csecsemők jobb neurodevelopmentális teljesítményét az emberi tejben lévő LCP okozza (8, 9). Továbbá, a hirtelen csecsemő halála miatt elhunyt és szoptatott csecsemők agyában talált magasabb LCP-koncentráció összehasonlítva a hasonló palackos csecsemőkkel, azt mutatja, hogy strukturális különbségek vannak a DHA-val táplált csecsemők központi idegrendszerében (10, 11 ) .

MÓD

Tárgyak. A vizsgálatra alkalmas betegek mentesek voltak veleszületett rendellenességektől, idő előtt születtek, születési súlyuk 750 és 1750 g között volt. A csecsemőket SGA vagy AGA definiálta Kloosterman méhen belüli görbéi alapján (17). Valamennyi csecsemőt néhány órányi életkor kezdte meg az emberi tej etetésével, és az enterális táplálkozást naponta előrehaladták, amint a klinikai körülmények megengedték. Amíg OMM-je rendelkezésre nem állt, a csecsemők emberi tejet kaptak egy donor nőtől, aki a lehető legközelebb állt a páciens szülésének időpontjához és kb. Azonos hosszú terhesség után. Ez az olaszországi Trentóban, az Ospedale Santa Chiara újszülött intenzív osztályának rutinszerű etetési gyakorlatát jelenti. Engedélyt kaptak a donor nőktől az anyatej adományozásához, valamint a vizsgálatba bevont csecsemők szüleitől a donor tejének elfogadásához és a vérmintavételhez (minden alkalommal 0,7 ml). A fizikális vizsgálat alapján minden donor betegségtől mentes volt, és kórtörténetet és vérvizsgálatot nyertek a hepatitis B vírusról, a citomegalovírusról és a HIV-ről.

Az intravénás folyadékokat 5% -os szőlőcukor formájában csak akkor kezdték meg, ha a kicsi csecsemő gyomor-bélrendszeri toleranciája nem tette lehetővé az elegendő folyadékbevitelt, vagy ha a vércukorszint 2,5 mmol/l alá csökkent. A betegek egyike sem kapott parenterális táplálást. Ha a csecsemő édesanyja a heti emberi szükséglet legalább 75% -át produkálta (az élet első hete után), és a beteg egy donor nőtől kapta a maradék tejet, akkor a beteget OMM-táplált csecsemőnek tekintették. Abban az esetben, ha az anya nem képes elegendő mennyiségű anyatejet termelni, a beteg továbbra is ugyanazt a donor emberi tejet kapta, ameddig rendelkezésre állt, és a beteget PHM-vel táplált csecsemőnek minősítették. Minden csecsemő legfeljebb két nőtől kapott tejet, beleértve a saját anyját is.

A plazma FA C8-tól C24 szénatomig terjedő adatait molszázalékban (mivel a százalékos értékek jobban tükrözik a plazma lipidek FA-összetételét) és abszolút plazmakoncentrációkban számolják (ez jobban jelezheti az étrendi lipidek beáramlását/kiürülését). A számítások magukban foglalták az egyes FA válaszreakcióit, az FA metilésztereinek metilrészének hozzájárulását és az FA mennyiségi meghatározását a belső standardokkal. Mivel az FA mólszázalékban és mikromol/l-ben van megadva, úgy döntöttünk, hogy csak a főbb FA-ra mutatjuk be az adatokat. A kisebb FA-ra vonatkozó adatok a szerzőktől kérésre rendelkezésre állnak.

RBC PL FA összetétele. A vörösvértestet a plazmától való elválasztás után háromszor izotóniás EDTA-oldattal (pH 7,35) mossuk, majd izotóniás pirogallol-oldattal szuszpendáljuk ~ 50% -os végső hematokritig, nitrogénnel átöblítjük és -70 ° C-on tároljuk az elemzésig. A lipideket a sejtekből Folch módszerének módosításával extraháltuk, és a PL-t amino-propil-kötött fázisú oszlopokkal választottuk el (21). Az FA metil-észtereit az extrahált PL 14% -os bór-trifluoriddal készült metanolban végzett metil-észterezésével kaptukáris gázkromatográfiával elválasztva, nempoláris oszlop alkalmazásával (50 m × 0,25 mm CP-Sil 5 CB, 0,12 μm filmvastagság; Chrompack, Middelburg, Hollandia), amint arról korábban beszámoltunk (22) .

Statisztikai analízis. A klinikai adatokat a csoport átlagának ± SD, az FA adatokat pedig a ± SEM átlagnak adják meg. A szignifikanciát minden teszt esetében 0,05-re állítottuk be. Ismételt mérések varianciaanalízisét alkalmaztuk a vizsgálati időpontok (faktorok) FA-adatokra (függő változó) gyakorolt hatásának értékelésére. Az időpontok között szignifikáns különbséget értek el a Tukey-val post hoc teszt. A számításokat a Systat 5.2 változatú statisztikai csomag felhasználásával végeztük.

Etikai megfontolás. A projektet a helyi etikai és tudományos bizottságok jóváhagyták. A vizsgálatban részt vevő csecsemők mindkét szülőjétől írásbeli beleegyező nyilatkozatot kaptak. Csak azokat a csecsemőket keresték meg és kérték fel a vizsgálatban való részvételre, akiknek az anyja úgy döntött, hogy szoptat.

EREDMÉNYEK

A tejmennyiség, a zsírbevitel és a fő étrendi FA bevitele nem különbözött az AGA és az SGA csecsemők, illetve az OMM-et vagy PHM-et tápláló csecsemők között a vizsgálat során bármikor (az adatokat nem közöljük).

Az étrend hatása a plazmára és az RBC PL FA-ra. A plazma PL és a plazma PL számos FA komponensének koncentrációja jelentősen megváltozott a vizsgálati időszak alatt (3. táblázat). Az összes PL zsinórszintje szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a d 7, 14 és 28 szintje. A telített FA százalékos aránya a születéskor szignifikánsan magasabb volt, mint a későbbi időpontokban. A PL LLA a születés után jelentősen és szignifikánsan emelkedett (mind százalékban, mind koncentrációban), a plazma PL ARA százaléka a születéskor 15,99 ± 0,51-ről d30-ra 10,30 ± 0,22-re csökkent. A plazma PL ARA-koncentrációja szintén d 7-ről d 28-ra csökkent a tanulmány. A DHA stabilabb volt mind százalékban, mind koncentrációban d 7-től kezdődően.

Az LLA és az LNA megnövekedett százalékos arányát, az ARA és DHA csökkenésével együtt az RBC PL-ben is megfigyeltük (4. táblázat). A DHA moláris százalékos aránya az RBC PL-ben d 7, 14 és 28 napon szignifikánsan alacsonyabb volt, mint születéskor. A DHA 3,26 ± 0,14 mol% volt születéskor, és 2,73 ± 0,13 mol% volt d 28-on, o = 0,018.

A diéta hatása SE-re, TG-re és FFA-ra. A plazma TG (5. táblázat) és az SE (6. táblázat) FA-összetétele szintén növekvő LLA-szintet és az ARA és DHA alacsonyabb százalékos arányát mutatta születéstől d-ig. A TG DHA (mol%) a vizsgálat végére körülbelül 25% volt A születési érték és a d 7 értékének körülbelül 40% -a. Az ARA szintén 2-szerese volt. ARA és DHA aránya a plazma TG-ben születéskor 1,1: 1 (1,91 ± 0,16ellen 1,68 ± 0,19 mol%), 4 hét múlva pedig 2,6: 1 (1,02 ± 0,05) ellen 0,40 ± 0,03 mol%). A telített FA-dózis születésétől kezdve csökkent. Az LLA százalékos aránya a 28. napon több mint kétszerese volt a születéskorinál, az LNA nem változott, de az ARA és a DHA a 4 hetes vizsgálati periódus alatt folyamatosan csökkent. Nem találtunk különbséget a plazmában vagy az RBC FA-ban az AGA és az SGA csecsemők, illetve az OMM-et vagy PHM-et tápláló csecsemők között a vizsgálat során bármikor (az adatokat nem közöljük).

VITA

A plazma és az RBC FA időváltozásaira vonatkozó tanulmányok viszonylag nagy koraszülötteknél vagy anyatejjel táplálkozó koraszülötteknél állnak rendelkezésre. E tanulmányok többsége azt mutatja, hogy az anyatej a tápszeres táplálástól eltérően biztosítja a hosszú láncú többszörösen telítetlen FA állandó plazma- és RBC-szintjét (12, 13, 23), míg más jelentésekben a plazma LCP stabilizálás előtt a kötél vérszintje alá csökken (24, 25) .

A kizárólag koraszülött anyatejjel táplált nagyon kicsi koraszülötteknél nem állnak rendelkezésre megbízható információk, mivel a teljes parenterális táplálkozás változó hosszúságú alkalmazásának elterjedt politikája hiányzik (26). Ezen túlmenően, amikor jelentős enterális táplálás kezdődik, amely néha a születéstől számított napok vagy hetek után következik be, a kis csecsemő gyakran változó mennyiségű tápszert kap az anyatejjel együtt. Az anyatej ebben az időpontban (2 vagy 3 hét születés után), ha „frissen” táplálkozik, elveszítheti az összetett előnyök egy részét, amelyek jellemzőek a „koraszülött” emberi tejre, vagy fagyasztva tartva, és összegyűjtve egymás után etetik, nem eredményezheti a „fiziológiás” FA-bevitelt, mert az emberi tej FA-összetétele a laktáció előrehaladtával változik (27, 28) .

Kis koraszülötteket etethettünk, amíg a beteg OMM elérhetővé nem vált, emberi tejet kaptunk egy nőtől, aki körülbelül azonos terhességi idő után szült. Vizsgálatunkban tizennégy csecsemőt kizárólag OMM-jükkel tápláltak az élet első hete után, és nyolcat továbbra is adományozott PHM-vel tápláltak.

Úgy döntöttünk, hogy az FA táplálkozási adatait mind napi bevitelként, mind FA százalékként mutatjuk be. Úgy érezzük, hogy a testbe jutó egyedi FA abszolút mennyisége (különösen az LCP esetében) informatívabb lehet, mint az étrend tényleges százalékos összetétele. Mivel a születés után nagyobb mennyiségű tejet toleráltak, és mivel a koraszülött emberi tej zsírtartalma postnatálisan nőtt, a FA nagy részének bevitele is emelkedett. A fő LCP bevitele azonban az élet első hete után meglehetősen állandó maradt. Ezt a megállapítást a magasabb tejbevitel és a magasabb tejzsírtartalom magyarázza d 28-án, mint a d 14-en, valamint az LCP koncentrációjának csökkenése az emberi tejben a laktáció előrehaladtával.

A meglehetősen állandó ARA és DHA bevitel ellenére a kis koraszülött csecsemő plazma lipidjei progresszív ARA és DHA csökkenést mutattak a vizsgálati időszak alatt. A plazma lipidekben a telített FA csökkent, valószínűleg a plazma lipidszintjének csökkenése következtében de novo ezen nem esszenciális FA szintézise nem lipid prekurzorokból, az FA domináns forrása a méhben (29) Az LLA és az LNA jelentős növekedése a plazma lipidekben az élet első 4 hétében azzal magyarázható, hogy az LLA-t (és talán az LNA-t) a placenta csak kis mennyiségben látja el (30), de hozzájárul a az FA tejben. Ezzel szemben az LCP előnyösen az anyától a magzathoz kerül, bár az átadás mechanizmusa egyelőre ismeretlen. Feltételezték, hogy a-fetoproteint (31) tartalmaz, amely nagy affinitást mutat az LCP iránt (32). Ezeket a mechanizmusokat megszakítja a koraszülés és az LCP könnyebb szállítása az újonnan született végek felé. Emberi tejet tápláló „nagy” koraszülötteknél (12, 13) vagy kis koraszülötteknél, akiket valamivel a születés után vizsgáltak (14), viszonylag állandó plazma LCP-t találtak. Ezen eredmények alapján arra a következtetésre jutottak, hogy az emberi tej etetése fenntarthatja a plazma LCP szintjét.

Adataink azt mutatják, hogy kis koraszülötteknél, akik nagy mennyiségű koraszülött anyatejjel táplálkoznak elegendő energia bevitel mellett, a köldökzsinór LCP szintje nem marad fenn. Hangsúlyozni kell azonban, hogy a pácienseinktől eltérően a magzat a terhesség utolsó trimeszterében növekvő DHA-szintet mutat (33, 34). A születés utáni csökkenő plazma LCP-szintek, amint azt ebben a tanulmányban megállapítottuk, vagy a szövetek aktív felvételét jelentheti (a vizsgálatban szereplő összes csecsemő az élet második hétére hízott), vagy pedig az új egyensúly iránti tendenciát jelentheti a viszonylag a méhen belüli élet során elért magas LCP szöveti szint és az alacsonyabb emberi tejes százalék, amely esetleg korlátozott mennyiségű LCP-t tartalmaz. Ezeknél a csecsemőknél azonban nem áll rendelkezésre információ a szöveti LCP-szintekről, és hogy vajon az étrendi körülmények között bekövetkezik-e az LCP aktív szövetszintézise, vagy a LCP teljesen funkcionális szövetfelvétele megkímélné-e a szervek kimerülését, továbbra is erősen spekulatív.

A plazma TG volt a leginkább érintett ebben az 1 hónapos vizsgálatban. A DHA (molszázalék) a vizsgálat végére a születési érték körülbelül 25% -a volt, és bár születésekor az ARA/DHA arány 1,1: 1 volt, 4 hét után 2,6: 1 lett. A magzati plazma TG feltételezett placenta-máj eredetének fényében a születéskori összetétel arra utal, hogy a DHA a magzathoz körülbelül ugyanolyan arányban juttatható el, mint az ARA. A d 28-as magasabb arány vagy étrendhiányra, vagy a DHA nagyon aktív szövetfelvételére utalhat. Harmadszor: a máj hatékonyabban szintetizálhatja az ARA-t, mint a DHA; Az oxidációs sebesség különbségei kevésbé valószínű magyarázatnak tűnnek.