Módosított rizskorpa, amely előnyös az egerek fogyásának, mint a ciszplatin fő és akut mellékhatásának

Patológiai és molekuláris orvoslás tanszékek, McMaster Egyetem, Egészségtudományi Kar, Ontario, Kanada

A levelezés szerzője: Yuzo Endo, Egészségtudományi Kar Patológiai és Molekuláris Orvostudományi Tanszék, FHS-3N11, McMaster University, 1200 Main Street West, Hamilton, Ontario, L8P 3Z5, Kanada (fax +1 (905) 308 8372, e -A mail [email protected]). Keresse meg a szerző további cikkeit

Patológiai és molekuláris orvoslás tanszékek, McMaster Egyetem, Egészségtudományi Kar, Ontario, Kanada

A kísérleti protokollt a kanadai Ontarióban, a McMaster Egyetem Állatkutatási Etikai Testülete hagyta jóvá és az alábbiak szerint. A Charles River Canada-ból vásárolt BALB/c nőstény (4 hetes) egereket egy hétig akklimatizálják. Megmértük és hét öt csoportra osztottuk, az egyes csoportokon belüli súlykülönbségek minimális változásaival összhangban. Az összes vizsgált egér átlagos súlyát (17,43 g standard eltéréssel ± 0,51 g) a jelen kísérlet elején a testtömeg 100% -ának neveztük. Öt egeret helyeztek el minden standard metabolikus ketrecben, egy hagyományos, légkondicionált helyiségben. Ingyenes hozzáférést biztosítottak a laboratóriumi chow-hoz (LabDiet®) és a vízhez. A fény és a sötétség ciklusa 12 óra volt.

A ciszplatint és a dimetil-szulfoxidot (DMSO) Sigma Aldrich-től (Oakville, Ontario, Kanada) szereztük be. Mivel a ciszplatin kevésbé oldódik vízben vagy foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS), a ciszplatin (0,1% V/V) szolubilizálásához DMSO-t használtak.

A jelen kísérletben alkalmazott módosított rizskorpa jellemzői a következők voltak. A rizskorpa zsírtalanított kivonatát glikozidázokkal, például amilázzal, galaktozidázzal és a Shiitake gombából származó glükuronidázzal történő emésztéssel módosították.lentis edodes) micélium. A módosított rizskorpa végterméke vízoldékony volt. Poliszacharidokból, például főként arabinoxilán-hemicellulózból és a Lowry módszerével meghatározott fehérjéből (13,2%) állt. et al. (1951). A japán tokiói Daiwa Pharmaceutical Company gyártotta és Észak-Amerikában MGN ‐ 3 (Ghoneum 1998) néven értékesítette. A termék (5560914 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom) kedves ajándék volt Dr. Hiroaki Maeda, a Daiwa Pharmaceutical Company cégtől.

Egy héttel a ciszplatin beadása előtt módosított rizskorpát adtak be két egércsoportnak naponta 0,1 ml térfogatú 10 mg/ml módosított rizskorpa (száraz tömeg) vízben való koncentrációjával vagy intraperitoneális injekcióval térfogatban. 0,1 ml módosított rizskorpa azonos koncentrációjú foszfáttal pufferolt sóoldatban. Egérenként 1 mg módosított rizskorpa dózisát az emberi felhasználásra ajánlott adagtól (50 mg/kg) számítottuk. Egy ciszplatin lövést adtunk 0,1 ml térfogatban 15 mg/kg ciszplatin koncentrációban, foszfáttal pufferolt sóoldatban, amely vivőanyagként intraperitoneálisan vivőanyagként tartalmazott 0,5% DMSO-t. Két egércsoport kapott vizet vagy intraperitoneálisan foszfáttal pufferolt sóoldatot, majd egy hét múlva ciszplatint adtak mindkét csoportnak. Az egereknek csapvizet adtak orális beadásra, és az egereket foszfáttal pufferolt fiziológiás sóoldattal, DMSO-val vagy anélkül, ciszplatin vivőanyagaként, intraperitoneális adagolási csoportként három külön kontroll csoportnak jelöltük. Az egyes egerek testtömegét naponta ellenőriztük. Összehasonlítva az összes egér átlagos tömegével a kísérlet kezdetén, tetszőleges 100% -nál, az egyes egerek testtömegének százalékos arányát ábrázoltuk.

A cisplatin intraperitoneális injekciója után a fogyás másnap következett be mindkét csoportban módosított rizskorpa beadásával és anélkül. A ciszplatin-kezelést követő 5. napon a legnagyobb súlycsökkenést mindkét csoportban megfigyeltük módosított rizskorpával vagy anélkül, orálisan, valamint intraperitoneálisan. A súlycsökkenés legnagyobb része ciszplatint kapott egereknél történt, módosított rizskorpa beadása nélkül. Noha a testsúlycsökkenés a cisplatin-kezelés csoportjaiban az egerek szokásos testtömegének 20% -ához közelít, úgy tűnik, egyetlen egér sem pusztult el, és egyik sem mutatott hasmenést vagy rektális vérzést, amelyek mind a ciszplatin gyakori mellékhatásai. Ábra szerint Az 1. és 2. ábrán az egerek súlygyarapodása ugyanazon a napon kezdődött, miután mindkét csoportban lövést adtak a ciszplatinról, és az orálisan és intraperitoneálisan módosított rizskorpát kapott egerek súlygyarapodási üteme gyorsabb volt, mint a kontrollcsoportoké.

A ciszplatint (15 mg/kg) intraperitoneálisan, nyolcadik napon intraperitoneálisan kapó egerek testtömegének csökkentett százalékos profiljának összehasonlítása (nyitott téglalapok) vagy módosított rizskorpa (1 mg/nap) orális bevitele nélkül az első nap óta (zárt téglalapok) ). Az ordinát egértömegének száz százaléka a kísérlet elején felhasznált egész egerek átlagos tömegét jelenti (17,43 g ± 0,51 g). A kontroll nem jelent sem ciszplatin, sem módosított rizskorpa kezelését. Az abszcissza kísérleti napokat mutat a módosított rizskorpa beadásának kezdetétől számítva. Az egerek testtömegének csökkentett százaléka statisztikailag szignifikáns különbségeket mutat a módosított rizskorpa orális bevitelével és anélkül történő csoportok között a testtömeg maximális csökkentésének pontján és a késői gyógyulási fázisban. Bars = minden csoportban öt egér átlagos és standard hibája. § P

A ciszplatint (15 mg/kg) intraperitoneálisan, nyolcadik napon intraperitoneálisan kapták az egerek egerek tömegének csökkentett százalékos arányának profilja (nyitott háromszögek) vagy az első nap óta módosított rizskorpa (1 mg/nap) intraperitoneális beadása nélkül (zárt háromszögek) ). Az egér tömegének százaléka az ordináta a kísérlet elején használt egész egerek átlagos tömegét jelenti (17,43 g ± 0,51 g). A kontroll nem jelent sem ciszplatin, sem módosított rizskorpa kezelését. Az egerek testtömegének csökkentett százaléka statisztikailag szignifikáns különbségeket mutat a módosított rizskorpa intraperitoneális beadásával és anélkül történő beadása után a csoportokban a ciszplatin-kezelés utáni redukciós fázisban és a helyreállítási szakaszban. Bars = minden csoportban öt egér átlagos és standard hibája. § P

Az egerek súlycsökkenésének súlyossága a ciszplatinnal dózisfüggő volt (az adatokat nem mutatjuk be). Az orálisan és intraperitoneálisan alkalmazott módosított rizskorpa gyorsított védelmet mutatott az egerek ciszplatin okozta súlyos testsúlyvesztése ellen. Az 1. ábra statisztikailag szignifikáns különbséget mutat a ciszplatin miatti súlycsökkenés görbéje között a módosított rizskorpa orális beviteli csoportjában és a vízbeviteli csoportban mért ANOVA-analízissel (P Zielen et al. (1996). Annak biztosítására, hogy ez az ELISA rendszer érvényes legyen, A 3. ábra a módosított rizskorpa elleni egér poliklonális antitestek titereinek szignifikáns különbségét mutatja be a módosított rizskorpa (+) vagy (-) emésztésével a proteináz K által polipeptidek esetében. Az ELISA-leolvasóval peroxidázzal konjugált nyúl ellenanyagot kaptunk egér IgG antitestekkel szemben, mint optikai sűrűség 492 nm hullámhosszúságú második ellenanyagát az ELISA leolvasóval a Medical Biological Laboratories-tól (Nagoya, Japán). Ezek az adatok lehetővé tették a módosított rizskorpa polipeptidjeinek, valamint a poliszachahridvegyületek kimutatását a Covalink mikrotiterlemezen.

Az általunk nevelt módosított rizskorpa elleni poliklonális antitesteket ELISA-val teszteltük Covalink mikrotiter lemezek segítségével. A módosított rizskorpát a proteináz K-vel emésztettük a fehérje-antigének eltávolítása érdekében. A bal hisztogram (-) teljes módosított rizskorpa elleni poliklonális antitestek titerét mutatja proteináz K emésztés nélkül, és jelzi mind a fehérje, mind a poliszacharid antigénekét a módosított rizskorpában. A középső hisztogram (+) a módosított rizskorpa elleni poliklonális antitestek titerét mutatja a proteináz K emésztése után, és csak a módosított rizskorpában lévő poliszacharid antigénekét mutatja.

Összefoglalva a módosított rizskorpa immunreaktív anyagainak felszívódási adatait az egér szérumban a módosított rizskorpa orális bevétele után, az orális bevitel előtti és 1 óra utáni OD-értékek azonosak, jelezve, hogy a módosított rizskorpa immunreaktív anyagai nincsenek a szérumban, majd Az OD-érték csökkenése, jelezve, hogy az egér szérumában 2 és 3 órával a módosított rizskorpa orális bevitele után jelen van. Az MRB elleni poliklonális antitestek szérum titerének csökkenése statisztikailag szignifikáns volt (Wilcoxon teszt P

Beszámoltak arról, hogy a zsírtalanított rizskorpa hemicellulóz növeli a perifériás vér limfocitaszámát patkányokban, és hogy a segítő/indukáló T-sejtek és a szuppresszor/citotoxikus T aránya csökkenést mutatott azoknál a patkányoknál, akik 10% hemicellulóz-étrendet kaptak (Takenaka & Itoyama 1993). A rizskorpából kivont módosított arabinoxilánról kimutatták, hogy fokozza a természetes gyilkos sejtek aktivitását az emberben a módosított rizskorpa (MNG-3) orális bevitele után (Ghoneum 1998). A rizskorpából etanollal kivont α-glükán erős tumorellenes aktivitással rendelkezik (Takeo et al. 1988), míg a gombából származó β-glükánhoz tartozó különféle poliszacharidok, mint pl Lentinus, Schizophyllum és Grifola, daganatellenes hatásokkal szemben érzékenyek (Borchers et al. 1999).

Ezek a jelentések nem mutatták ki, hogy a bélben lévő szérum rizskorpa komponensei felszívódtak volna. Ez az első bizonyíték arra, hogy a módosított rizskorpa immunreaktív komponensei polipeptidek és poliszacharidok szempontjából határozottan felszívódtak a bélből a vérbe a módosított rizskorpa orális bevitele után.

Korábban beszámoltak arról, hogy a módosított rizskorpa hatékonyan csökkenti a szérum lipidszintet és az ízpreferenciát streptozotocin indukálta cukorbeteg patkányokban (Ohara et al. 2000). Ez a módosított rizskorpa potenciális előnye a ciszplatin hányás mellékhatásaihoz viszonyítva. Annak ellenére, hogy nem tudjuk, hogy a módosított rizskorpa hogyan játszhat előnyös szerepet a ciszplatin által kiváltott fogyás elleni védelemben, eredményeink ösztönzik a módosított rizskorpa, mint úgynevezett funkcionális élelmiszer klinikai vizsgálatának elvégzését annak minőségi védőhatásának igazolására. előrehaladott daganatos betegek életében (Harrap 1995). A módosított rizskorpa hatékony összetevőinek további jellemzésére van szükség a legjobb rákellenes hatás, valamint a rákellenes gyógyszerek elleni védőhatás eléréséhez.

Köszönetnyilvánítás

Köszönetet szeretnénk mondani John Bienenstock professzornak a kézirat kritikus olvasatáért.