Kolin-kiegészítés a magzati növekedésről a terhességi diabetes mellitusban

kolinpótlás
 A vizsgálat biztonsága és tudományos érvényessége a tanulmány megbízója és a kutatók feladata. Egy tanulmány felsorolása nem jelenti azt, hogy azt az Egyesült Államok szövetségi kormánya értékelte. Ismerje meg a klinikai vizsgálatok kockázatait és lehetséges előnyeit, és a részvétel előtt beszéljen egészségügyi szolgáltatójával. A részletekért olvassa el a felelősség kizárását.
  • Tanulmány részletei
  • Táblázatos nézet
  • Nincs közzétett eredmény
  • Jogi nyilatkozat
  • Hogyan olvassuk el a tanulmányi jegyzőkönyvet

Állapot vagy betegség Beavatkozás/kezelés Fázis
Gesztációs cukorbetegség Étrend-kiegészítő: Kolin-kiegészítő Étrend-kiegészítő: Placebo Nem alkalmazható

TANULMÁNYI CÉLOK 1. specifikus cél: Határozza meg az MCS terhesség alatti hatását a születési súlyra GDM-ben.

2. specifikus cél: Határozza meg az MCS hatását a makrotápanyagok transzportjára és az epigenetikus módosításokra a placentában és a köldökzsinórvérben.

1. cél: A kutatók feltételezik, hogy a kolincsoportnak alacsonyabb a születési súlya és kevesebb az LGA újszülöttje, mint a nem kolin csoportnak.

2. cél: A kutatók feltételezik, hogy a kolincsoport csökkentené a placenta transzportját és fokozná a metabolikus gének DNS-metilációját.

Tárgyak: Kényelmes mintavételi módszert alkalmaznak. A nyomozók gördülékenyen toboroznak terhes nőket, akiknél a terhesség második trimeszterében diagnosztizálták a GDM-et. A blokk randomizálást kezelési módszerek (azaz inzulinkezelés, orális hipoglikémiák vagy csak diéta) alapján hajtják végre, hogy véletlenszerűen hozzárendeljék a résztvevőket az intervenciós és kontrollcsoportokhoz. A toborzást a következő módszerekkel hajtják végre: i. Tanulmányi szórólapokat tesznek fel a prenatális klinikára; (ii) a nyomozók az orvosi dokumentumok áttekintésével azonosítják a potenciálisan alkalmas terhes nőket.

Jogosultsági kritériumok: A felvételi kritériumok magukban foglalják a GDM terhes nőket a 28. terhességi hét előtt. A GDM-et kétlépcsős eljárással diagnosztizálják: a vércukorszint meghaladja a 140 mg/dl határértéket 50 g nem éhező 1 óra és 100 g után. 3 órás orális glükóz kihívások. A terhes nők akkor jogosultak a részvételre, ha angol vagy spanyol anyanyelvűek, 18 éven felüliek, egyedülálló terhességűek, gyermeküket az intézményben kívánják szülni, és nincsenek a kizárási kritériumok között felsorolt ​​feltételek. A kizárási kritériumok közé tartozik a terhesség előtt fennálló hiperglikémia, cukorbetegség, kardiovaszkuláris állapotok és májbetegségek. A betegek dönthetnek úgy, hogy részt vesznek a vizsgálatban, és nem adományozzák a méhlepény vagy a köldökzsinór biopsziáját. Azok a betegek, akik őssejtadományozásra vagy -tárolásra vágynak, nem tudják adományozni a méhlepényük vagy a köldökzsinórjuk biopsziáját. Ezeket a betegeket nem zárják ki az elsődleges elemzésből.

Tervezési és adatgyűjtési eljárások:

A résztvevők a rutin klinikai ellátás során összesen 3 látogatásra jelentkeznek. Az első látogatás a terhesség 28. hetében lesz, amikor a nyomozók felveszik a résztvevőket, a második látogatás a terhesség 32. hetében, a harmadik látogatás pedig 36. héten lesz. Vannak további rutin klinikai látogatások (pl. 32. héten), amelyek során információkat lehet szerezni, ha a beteg elmulasztott egy tanulmányi látogatást. A nyomozók az első látogatáskor (kb. 20 perc alatt) összegyűjtik az alapszintű kérdőívet, az első látogatás után 3 napos étrendi visszahívást hajtanak végre (egyenként körülbelül 20 percet), és minden látogatás alkalmával ellenőrzik az aktuális súlyt és 20 ml-es vérmintákat gyűjtenek. Szállításkor a nyomozók placenta mintákat és nevelőzsinórvéreket gyűjtenek a résztvevőktől.

Alapszintű kérdőív: A kérdőív olyan demográfiai és orvosi információkat tartalmaz, mint életkor, esedékesség, etnikai hovatartozás, paritás, családi állapot, iskolai végzettség, foglalkozás, háztartási jövedelem, egészségbiztosítás, szerhasználat, gyógyszerhasználat, táplálékkiegészítő, krónikus betegségek családi kórtörténete, és a terhesség előtti, ön által bejelentett súly.

Étrend-értékelés: Három 24 órás étrend-visszahívást, 2 hétköznap és 1 hétvégi napon, minden résztvevő beszerez egy képzett kutatási asszisztens (RA) telefonos hívás útján az első látogatások után az étrendi kolin bevitel számszerűsítésére. Harnack és munkatársai multi-pass módszerét fogják használni. Az RA rögzíti az élelmiszerek azonosítását, mennyiségét, az összetevők specifikációját, az elkészítési módszert, és adatokat visz be a Nutrition Data System for Research (NDSR) szoftverbe a kolinbevitel elemzéséhez. Az RA emellett a PA visszahívó eszközzel megkérdezi a résztvevőket az elmúlt 24 óra fizikai aktivitásáról (PA).

Antropometriai mérések és vérvétel: A kutatók a látogatások során mechanikus magasságú rudakkal ellátott orvosi mérleg segítségével mérik meg a résztvevők súlyát és magasságát. A plazma biomarkerek élelmiszerekkel kapcsolatos koncentráció-különbségeinek minimalizálása érdekében a résztvevőket arra utasítják, hogy ne fogyasszanak ételt legalább 4 órán át a reggeli vérvétel előtt. Ez a szülés előtti látogatások szokásos ajánlása, és biztonságosnak tekinthető. Mintegy 20 ml éhomi éhomi vért vesznek ki minden résztvevőből a nyomozó látogatásai során. A vérmintákat egy EDTA vérgyűjtő csőbe és egy szérum elválasztó csőbe gyűjtjük és centrifugáljuk, hogy plazmát, buffy bevonatot és szérumot kapjunk. A mintákat az analitikai mérésekig történő felhasználásig -80 ° C-on tároljuk a laboratóriumban.

Vércukorszint-szabályozás: A kutatók az éhomi glükózról, a hemoglobin A1C-ről, a gyógyszeres kezelésről és az inzulinkezelésről információkat kapnak a résztvevők orvosi táblázatairól.

Születési információk és mintagyűjtés szállításkor: A résztvevők telefonon értesítik a nyomozókat, amikor felveszik őket a születési központba. A nyomozók emlékeztetőket is küld nekik, mivel közeledik az esedékességük. Ezenkívül a születési központ orvosi személyzete megkapja a résztvevők nevének listáját, így felveszik a kapcsolatot a nyomozókkal is, ha egy résztvevő bejelentkezik, amikor a tanulmányi személyzet egyike sem tartózkodik a helyszínen. Miután a baba megszületett, a kutatók két tubus zsinórvért gyűjtenek a szérum, a plazma és a buffy bevonat megszerzéséhez. A kutatók megmérik a méhlepény méretét és súlyát, és a méhlepényt a következő módszerrel dolgozzák fel: teljes vastagságú méhlepény biopsziákat 6 mm-es Keyes lyukasztóval állítanak elő és RNAlater®-ben (RNS esetén) stabilizálnak, vagy folyékony nitrogénben fagyasztanak be. (más célokra). A mintákat felhasználás előtt a társ-vizsgálati laboratóriumba szállítják -80 ° C-on tartós tárolás céljából.

Étrendi bevitel értékelése: Mint fent említettük, a 3 napos étrendi visszahívásokból gyűjtött étrendi beviteli adatokat az NDSR szoftver elemzi. A teljes kolin napi bevitelét úgy kell kiszámítani, hogy a fogyasztás gyakoriságát megszorozzuk a kolinszármazékok összegével, beleértve az egyes élelmiszerek szabad kolint, foszfatidilkolinot (PC), glicerofoszfokolint (GPC), foszfokolint és szfingomielint. A betain (a kolin oxidációs terméke) napi bevitelét kiszámítják az egyes ételek fogyasztási gyakoriságának és betaintartalmának szorzatával. Az átlagos napi bevitelt a teljes kolin és a betain átlagos napi fogyasztásaként kell kiszámítani az étrendi visszahívások 3 napja alatt.

A kolin metabolitjainak mérése: szabad kolin, betain és más kolinszármazékok [pl. A PC, GPC, lizofoszfatidilkolin, dimetil-glicin, trimetil-amin-oxid (TMAO)] mérését az anyai plazmában folyadékkromatográfia (LC) tömegspektrometria (MS)/MS alkalmazásával végezzük, ahogyan azt a korábbi vizsgálatokban elvégeztük. Az adatok pontosságának és megismételhetőségének biztosítása érdekében stabil izotóppal jelölt standardokat használnak az extrakcióban, az összes mintát 6 pontos standard görbe alapján számszerűsítik, és minden mintát két példányban futtatnak. Azokat a mintákat, amelyek variációs együtthatója (CV)% magasabb, mint 5% a futáson belül vagy 10% a menet közben.

2. specifikus cél: Határozzuk meg az MCS hatását a makrotápanyagok transzportjára és az epigenetikus módosításokra a placentában és a köldökzsinórvérben. E cél elérése érdekében a kutatók meghatározzák a zsír- és glükóztranszporterek expresszióját, valamint az AKT/mTOR előtti szabályozó utakat placenta biopsziákban a résztvevőktől. A kutatók megmérik a kulcsnövekedéssel és az anyagcserével kapcsolatos gének helyspecifikus DNS-metilációját a placentában és a köldökzsinórvérben.

A makrotápanyagok transzportmarkereinek elemzése placenta biopsziákban: Annak elemzéséhez, hogy a kolin anyagcsere hogyan kapcsolódhat a placenta zsír- és glükóztranszportjához, a kutatók valós idejű PCR-t használnak az zsír és glükóz metabolikus gének és transzporterek, például glükóz transzporterek GLR1, mRNS-mennyiségének számszerűsítésére és a GLUT3, a zsírsav anyagcseréhez kapcsolódó gének: lipoprotein lipáz (LPL), zsírsav transzlokáz (CD36), FATP és aminosav transzporterek SNAT2 és SNAT4. A megfelelő fehérjék bőségét, valamint az AKT és az mTOR 4EBP1 és S6K (az út aktiválódását jelző) célpontok mennyiségét Western-blot-módszerrel is mérni kell, amelyet rutinszerűen végeznek a társ-vizsgálati laboratóriumban, amely magában foglalja az SDS-PAGE-t, membrántranszfer, inkubálás antitestekkel és vizualizálás kemilumineszcens képalkotó rendszerrel. Használat előtt minden alapozó hatékonyságát és antitestminőségét tesztelni kell. A valós idejű PCR-t és a Western blotot is három példányban kell futtatni.

A növekedés és az anyagcsere epigenetikus szabályozása: A kutatók olyan gének helyspecifikus DNS-metilezését vizsgálják, amelyeket a korábbi vizsgálatok publikáltak a prenatális expozícióra hajlamosakként, és az utódok hosszú távú növekedését és metabolikus programozását közvetítik a korábban elvégzett bi-szulfit szekvenálással. . Röviden, a genomi DNS-t biszulfit reagenssel kezeljük, majd a cél genomi régiót PCR-rel amplifikáljuk. A metilált szekvenciák mennyiségi meghatározásához MassArray EpiTyper rendszert használnak. Az érdekes gének közé tartoznak a LEP, az SREBP1C és a zsíranyagcserét közvetítő PPARG, a növekedést elősegítő IGF2, a kortizol szekréciót elősegítő kortikotropin felszabadító hormon (CRH), valamint a kortizol szignálokat fogadó glükokortikoid receptor (GR).