A tesztoszteronszint meghatározói az emberi elhízásban

Marlies Bekaert

Endentiológiai Osztály, Genti Egyetemi Kórház, De Pintelaan 185, 6. épület K12, 9000 Gent, Belgium

Yves Van Nieuwenhove

Gasztrointesztinális Sebészeti Osztály, Genti Egyetemi Kórház, 9000 Gent, Belgium

Patrick Calders

Hosszabbítási tudomány és fizioterápia, Genti Egyetemi Kórház, 9000 Gent, Belgium

Claude A. Cuvelier

Genti Patológiai Osztály, 9000 Gent, Belgium

Arsène-Hélène Batens

Endentiológiai Osztály, Genti Egyetemi Kórház, De Pintelaan 185, 6. épület K12, 9000 Gent, Belgium

Jean-Marc Kaufman

Endentiológiai Osztály, Genti Egyetemi Kórház, De Pintelaan 185, 6. épület K12, 9000 Gent, Belgium

D. Margriet Ouwens

Genti Egyetemi Kórház Endokrinológiai Osztálya, De Pintelaan 185, 6. épület K12, 9000 Gent, Belgium

Klinikai Biokémiai és Pathobiokémiai Intézet, Német Diabétesz Központ, 40225 Dūsseldorf, Németország

Johannes B. Ruige

Endentiológiai Osztály, Genti Egyetemi Kórház, De Pintelaan 185, 6. épület K12, 9000 Gent, Belgium

Absztrakt

Bevezetés

Ez a keresztmetszeti vizsgálat a (szabad) T-szint lehetséges meghatározóinak feltárását tűzte ki célul olyan kórosan elhízott, 2-es típusú cukorbetegséggel és anélkül, valamint normál testtömegű férfiak csoportjában. Konkrétan a zsírszöveti aromatáz expressziós szintekkel, a szubkután zsírszövet (SAT) sejtmérettel, valamint az inzulinrezisztencia és a triglicerid (TG) szintjeivel (az adipozitás markere) való összefüggéseket vizsgáltuk. Továbbá a gyomor bypass műtétet (GBS) követő súlyvesztés (szabad) T-szintre gyakorolt hatását és annak lehetséges meghatározóit vizsgálták kórosan elhízott férfiaknál a GBS után 2 évvel végzett utóvizsgálaton.

Kutatási tervezés és módszerek

Tárgyak

A kiinduláskor és a nyomon követés során a klinikai és antropometriai paramétereket a korábban leírt módon értékelték [17]. A testtömeg zsírszázalékát (zsír%) bioimpedancia alapján becsültük meg (Bodystat 1500, Bodystat, Ltd, Man-sziget, Egyesült Királyság).

Hormonális és biokémiai vizsgálatok

A szubkután zsírszövet (SAT) paraffin digitális fényképei a kontroll és elhízott alanyokról csúsznak, 2-es típusú cukorbetegség nélkül, illetve 2-es típusú cukorbetegségben. A fényképeket AxioCam ERc 5s kamerával készítették, amelyet Axioskop 20 fénymikroszkópra tettek × 20 nagyítással. Az adipociták átlagos felületét a ZEN 2011 szoftverrel mértük meg, és a tárgylemezeken felvett összes teljes adipocita margóját megadtuk µm 2 -ben kifejezve. A bemutatott képeket véletlenszerűen választottuk ki. A méretarány 100 µm-t jelent

Az aromatáz expressziót 36 alany fagyasztott SAT mintáiban határoztuk meg valós idejű polimeráz láncreakcióval (valós idejű PCR). Először 100 mg fagyasztott zsírbiopsziából RNS-t izoláltunk a Tripure Isolation Reagent kit (Roche Diagnostics) segítségével a gyártó utasításainak megfelelően. A szennyező genomi DNS-t RNáz-mentes DNáz készlettel (Qiagen, Hilden, Németország) távolítottuk el, majd tisztítási lépést követtünk az RNeasy Mini Kit (Qiagen) segítségével. A cDNS szintézist a SuperScript First-Strand Synthesis System for RT-PCR kit (Invitrogen, Ghent, Belgium) alkalmazásával hajtottuk végre a gyártó utasításainak megfelelően. Az aromatáz expressziós szinteket valós idejű PCR-rel számszerűsítettük Quantitect CYP19A1 primer assay (Qiagen) és SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) segítségével StepOne Plus rendszeren (Applied Biosystems). A kapott küszöbérték-ciklus (Ct) értékeket normalizáltuk az RPS18 stabil referenciagén expressziójára (Quantitect RPS18 primer assay; Qiagen) ΔCt-módszerrel.

Statisztikai analízis

Asztal 1

A vizsgálati kohorsz klinikai és laboratóriumi adatai, beleértve a kontroll, elhízott és elhízott egyéneket DM2-vel

Paraméter Vezérlés (N = 25) Elhízott (N = 24) Elhízott + DM2 (N = 33) P P kontroll kontra elhízott P kontroll versus elhízott + DM2 P elhízott versus elhízott + DM2

Klinikai és biokémiai jellemzők

Életkor (év)

49 [43–64]

41 [32–49]

54 [50–61]

0,001

0,015

0,350

24 ± 4

41 ± 6

44 ± 6

a (µm 2)

3346 ± 1494

6370 ± 1009

5765 ± 1192

b (AU)

94,0 [60,0–148,0]

137,0 [70,0–226,0]

92,5 [55,3–244,0]

0,546

0,237

0,702

0,547

Tesztoszteron (nmol/L)

16,36 ± 6,74

10,81 ± 5,09

7,17 ± 2,90

a SAT sejtméretet N = 16 kontrollnál, N = 12 elhízott férfit DM2 nélkül és N = 22 elhízott férfit DM2-vel határoztuk meg

b SAT aromatáz expressziót N = 11 kontrollban, N = 11 elhízott férfiban DM2 nélkül és N = 14 elhízott férfiban DM2

A tesztoszteronszint társulásai

Az elhízott férfiak keringő (szabad) T szintjének csökkenése mögött álló potenciális mechanizmusok azonosításához egyváltozós korrelációs elemzést végeztünk. A SAT aromatáz expresszió nem mutatott összefüggést a nemi szteroidokkal vagy az anyagcsere paramétereivel sem a teljes vizsgálati mintában, sem az alcsoportok elemzésekor (utóbbi adatokat nem mutatunk be). Ezzel szemben a T erősen negatív volt a TG szintekhez társítva (r = −0,390, P 2). Az összes korrelációs elemzést az életkorhoz igazítottuk. Egy további BMI-kiigazítás megtartotta az inverz összefüggést a T-szintek és a TG-szintek között (r = −0,235, P = 0,041), valamint a szabad T szintek és a SAT sejtméret között (r = −0,340, P = 0,020). Ezenkívül az alcsoport elemzések feltárták, hogy az inverz korreláció az összes T szint és a TG között (r = −0,506, P = 0,016), valamint a szabad T szintek és a SAT sejtméret között (r = −0,719, P = 0,019) (ábra 2), jelentős maradt az elhízott, 2-es típusú cukorbetegség nélküli férfiaknál. Végül, ha figyelembe vettük a T/E2 arányt (T/E2 arány), hasonló eredményeket találtunk. Az E2-vel való nyilvánvaló összefüggésen kívül a T/E2 arány negatívan társult a TG-vel (r = −0,388, P 2).

2. táblázat

A nemi szteroidok, az aromatáz és az anyagcsere-paraméterek közötti összefüggések

3. táblázat

A változók többváltozós lineáris regressziós modellje, amelyek szignifikánsan társulnak a teljes és a szabad tesztoszteron szinthez, valamint a tesztoszteron/ösztradiol arányhoz (T/E2 arány) mint függő változók

Változó β SE (β) 95% CI P érték

Teljes tesztoszteron
Elhízottság	−0.153	0,194	–0,546; 0,240	0,435
DM2	−0,617	0,220	-1,061; −0,173	0,008
Kor	−0,171	0,118	-0,410; 0,068	0,157
Trigliceridek	−0.054	0,106	-0,269; 0.160	0,610
HOMA-IR	–0,015	0,168	-0,354; 0,324	0,929
SAT cellaméret	−0.324	0,153	-0,633; –0,015	0,040
Ingyenes tesztoszteron
Elhízottság	0,049	0,218	-0,391; 0,489	0,822
DM2	−0.239	0,246	–0,735; 0,258	0,337
Kor	−0,472	0,132	–0,740; −0.205	0,001
Trigliceridek	0,043	0,119	-0,197; 0,282	0,722
HOMA-IR	−0,077	0,188	–0,457; 0,302	0,683
SAT cellaméret	−0,446	0,171	-0,791; –0,100	0,013
T/E arány 2
Elhízottság	−0.183	0,274	-0,772; 0,357	0,455
DM2	−0,519	0,323	−1,271; 0,061	0,073
Kor	0,089	0.211	-0,325; 0,543	0,610
Trigliceridek	−0.158	0,143	-0,437; 0,153	0,330
HOMA-IR	0,116	0,302	-0,493; 0,750	0.673
SAT cellaméret	−0,391	0,218	–0,897; 0,002	0,051
SAT aromatáz	−0.167	0,184	–0,565; 0,192	0,319

A szignifikáns P-értékeket félkövérrel tüntettük fel

Az összes β együtthatót standardizáltuk. N = 50

Az elhízás és a DM2 bináris változók (igen/nem). DM2 2-es típusú cukorbetegség, HOMA-IR homeosztázis-modell az inzulinrezisztencia értékelésére, SAT szubkután zsírszövet, SE standard hiba, CI konfidencia intervallum

A vizsgálat résztvevőinek jellemzői és nemi szteroid szintje a GBS után

Vita

Jelen tanulmány összefüggést mutatott a megnövekedett SAT-sejtméret és az alacsony T-szint között a férfiak elhízásában, és nem tudta meghatározni a zsírszöveti aromatáz expressziójának és a hipotalamusz – hipofízis-gonadal (HPG) tengelyének meghatározó szerepét. A SAT sejtméret függetlenül fordítottan kapcsolódott mind a teljes, mind a szabad T szinthez, miután a többváltozós regressziós elemzés korrigálva volt az életkor, a csoportosítás (kontroll vs. elhízás/cukorbetegség), a HOMA-IR és a TG szintek után. Összességében a megállapítások azt sugallják, hogy az alacsony T hím elhízás összefüggésben lehet a SAT sejtméret megnövekedésével és a kapcsolódó metabolikus változásokkal.

Jelen tanulmány az LC – MS/MS módszerek előnyével határozza meg a T-szinteket a korábbi kereskedelmi radioimmunassay-készletekhez képest, ami megbízhatóbb eredményekhez vezet, bár nagyobb eredmények szükségesek a megállapítások megerősítéséhez. A vizsgálat másik korlátja, hogy az expressziós elemzés mellett nincs információ a zsírszövet aromatáz aktivitásáról, mivel a SAT mintákat lefagyasztották vagy rögzítették.

Összefoglalva, az elhízott férfiak alacsony T-szintje fordítottan összefügg a SAT sejtmérettel, a HOMA-IR és a TG szinttel, és nem a zsírszöveti aromatáz expresszióval, ami arra utal, hogy az elhízással kapcsolatos anyagcserezavarok fontosabbak az elhízott férfiak T-szintjének magyarázatában. További kutatásokat kell irányítani a here elsődleges T-szekréciós kudarcára.

Köszönetnyilvánítás

Ezúton szeretnénk köszönetet mondani Eric Vandersyptnek az LC – MS/MS technika megvalósításáért, valamint köszönetet mondunk Kaatje Toye-nak és Kathelyne Mertensnek a technikai segítségért. M.B. Ph.D. birtokosa. A Genti Egyetemi Szövetség támogatása.

Összeférhetetlenség

A szerzők kijelentik, hogy nincsenek összeférhetetlenségük.