Az ultrafinom Angelica gigas por normalizálja a petefészek hormonszintjét és antioszteoporózis tulajdonságokkal rendelkezik a petefészek-eltávolított patkányokban: részecskeméret hatása

Kyeong-Ok Choi

1 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Sejong Egyetem, Szöul, Korea.

Inae Lee

1 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Sejong Egyetem, Szöul, Korea.

Sae-Yeol-Rim Paik

1 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Sejong Egyetem, Szöul, Korea.

Dong Eun Kim

1 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Sejong Egyetem, Szöul, Korea.

Jung Dae Lim

2 Növényi Orvostudományi Tanszék, Kangwon Nemzeti Egyetem, Chuncheon és Samcheok, Gangwon, Korea.

Wie-Soo Kang

3 Orvostudományi Főiskola, Kangwon Nemzeti Egyetem, Chuncheon és Samcheok, Gangwon, Korea.

Sanghoon Ko

1 Élelmiszertudományi és Technológiai Tanszék, Sejong Egyetem, Szöul, Korea.

Absztrakt

Bevezetés

A menopauza idején a petefészek természetes funkciójának elvesztése gyakran endokrin rendellenességek kialakulásához vezet, amelyek végül súlyos egészségügyi következményekkel járnak a nőknél. A menopauzális átmenet során a petefészek hormonok, például az ösztrogén és a progeszteron szintézise fokozatosan csökken, míg a gonadotrop hormonok, köztük a tüszőstimuláló hormon (FSH) és a luteinizáló hormon (LH) szekréciója fokozódik; következésképpen a menopauza tünetei érvényesülnek. 1 A menopauza elsődleges tünetei a hőhullámok, alvászavar, ízületi fájdalom és fáradtság. 2,3 Ezenkívül általában olyan rendellenességeket is megfigyelnek, mint az oszteoporózis, a szív- és érrendszeri betegségek, valamint az érzelmi szorongás. 4,5 A csontritkulás a nőknél különös aggodalomra ad okot a csökkent ösztrogénszint miatt, ami egyensúlyhiányhoz vezet a csontreszorpció és a csontszintézis, majd csontvesztés és törések között. 6 A menopauza tüneteinek csökkentése érdekében a hormonpótló kezelést általában önmagában ösztrogénnel vagy progeszteronnal kombinálva írják fel. Ezeket a hormonokat azonban gyakran mellékhatások kísérik, például endometrium hiperplázia, méhvérzés és emlőrák. 7,8 Ezért a növényi gyógyszerek egyre népszerűbbek, mivel hajlamosak enyhíteni a tüneteket kevesebb mellékhatással.

Az Angelica gigas (Umbelliferae) gyökerét hagyományosan használják a koreai népi gyógyászatban tonikként, valamint vérszegénység és más gyakori betegségek kezelésére. 9 Beszámoltak antibakteriális és antiamnesztikus hatásokról, az acetilkolinészteráz gátlásáról, a szív összehúzódásának depressziójáról, a protein kináz C aktivációjáról és a szarkóma rákos sejtek elleni tumorellenes aktivitásról is. 10 Terápiás potenciálja alapján erőfeszítéseket tettek a hatóanyagok izolálására ebből a növényből, ami több kumarin vegyület izolálását eredményezte. 11 Beszámoltak arról, hogy a kumarinok, például a decursin és a decursinol angelate az A. gigas (koreai angelica) gyökér fő hatóanyagai. A közelmúltban arról is beszámoltak, hogy a dekursinol és a decursin jelentős neuroprotecitve aktivitást mutat a glutamát által kiváltott neurotoxicitással szemben a patkány kérgi sejtek primer tenyészeteiben, és erős új antiandrogén receptor jelátviteli aktivitást mutatnak in vitro. 13 Ezenkívül számos tanulmány foglalkozott a dekursin és származékai krónikus egészségi rendellenességek megelőzésére és enyhítésére gyakorolt hatásával. 14 Köztudott, hogy a kumarin-származékok ösztrogén aktivitással rendelkeznek, mivel kötődnek az ösztradiol és a progeszteron intracelluláris receptoraihoz. 15,16

Ezért értékelni kell a koreai angyalgyök por részecskeméretének hatását. Különösen a petefészkek hormonszintjének változásai és az osteoporosis kockázata in vivo érdekes, ha különböző méretű koreai angyalgyök porokat adnak be orálisan állatoknak. Az ovariectomizált kísérleti menopauza által kiváltott patkány jó állatmodell a koreai angyalgyökpor méretének a petefészek hormonok és a csont jellemzőinek változására gyakorolt hatásának vizsgálatára. Ebben a vizsgálatban az ösztradiol, a progeszteron, az LH és az FSH a vérszérumban és a csont jellemzői, például a szérum teljes lúgos foszfatáz (TALP), a szérum csont-lúgos foszfatáz (BALP), a csont ásványi sűrűsége (BMD), a csont merevsége és a csont szövettanát különféle méretű koreai angyalgyökér-porral etetett petefészek-eltávolított patkányokban értékelték.

A tanulmány célja ultrafinom koreai angyalgyökér-por előállítása volt, valamint annak meghatározása, hogy a különböző méretű koreai angyalgyógyászati porok milyen hatással vannak a petefészek hormonok változására, mint például az ösztrogén, a progeszteron, az LH és az FSH, valamint a kísérleti csontritkulás paraméterei, például a szérum TALP, szérum BALP, BMD, csontmerevség és csontszövettan az ovariectomizált patkányokban.

Anyagok és metódusok

Különböző méretű A. gigas gyökérpor elkészítése

Durva marás

A durva maráshoz 30 tűs szitával ellátott tűtörőt (JIC-P10-2; Myungsung Machine, Szöul, Korea) használtunk. A Jin-bu területéről (Korea) gyűjtött szárított A. gigas Nakai gyökereket 112 g-mal őrölték meg a kívánt részecskeméret elérése érdekében. Az őrölt port szitarázógéppel (CG-213, Ro-Top, Chunggye Industrial Mfg. Co., Szöul, Korea) frakcionáltuk, standard szitaszitákkal (~ 20 cm) felszerelve. A porokat átengedtük a szitákon, amelyek szembősége 300 μm volt, és az elutasított részecskéket a tűtörővel újra megőröltük. Ez a porfrakciós eljárás a szitarázó segítségével lehetővé teszi hasonló részecskeméret-eloszlású reprodukálható minták előállítását. A frakcionált porokat exszikkátorban tároltuk 25 ° C-on további ultrafinom őrlés előtt.

Ultrafinom marás

Az ultrafinom por (Turbo Mill, HKP-05; Korea Energy Technology, Szöul, Korea) felhasználásával ultrafinom port kaptunk. A korábban előállított durva porokat ultraméretű porrészecskékké őröltük, amelyek mérete 0,1-50 μm közötti volt az őrlőkamrában hűtőköpennyel (-10 ° C és 25 ° C között). A járókerék előtolási sebességét és kerületi sebességét az őrlési zónában 3 kg/h, illetve 100 m/s értéknél rögzítettük. Ezzel egyidejűleg egy centrifugális levegőosztályozó rendszer osztályozta a porokat a szemcsemérettől függően. Ebben a rendszerben, amikor a porok részecskemérete annyira lecsökken, hogy áthaladjon egy osztályozó lyukon, a részecskéket egy kimenetre szállítják; különben a részecskék az őrlési zónában maradnak. A kapott ultrafinom koreai angyalgyaport felhasználásig exszikkátorban tároltuk.

Kivonatok nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás elemzése különböző méretű A. gigas gyökérporban

Egy gramm különböző méretű koreai angyalgyökér porokat összekevertünk 20 ml desztillált vízzel. Ezt követően az elegyeket 95 ° C hőmérsékletű vízfürdőbe helyeztük 3 órán át keverés közben, így kaptuk a koreai angyalgya por forró vizes kivonatait. Az elegyeket leszűrjük a felülúszók és az üledékek elválasztására. A felülúszókat vákuum-bepárlóban szárítottuk (koreai angyalgyökér-kivonatok).

Nagy teljesítményű folyadékkromatográfiát (HPLC; LC-20AT, Shimadzu Scientific Instruments, Tokió, Japán) alkalmaztunk a koreai angyalgyökér-kivonatok kvantitatív elemzéséhez; a működési körülményeket az 1. táblázat mutatja. Az 5, 10, 20 és 40 μg/ml koncentrációjú decursin és decursinol angelate oldatokat készítettük kalibrációs görbéik ábrázolásához. Mindegyik oldatot injektáltuk, és az azt követő kromatogramot rögzítettük; a decursin és a decursinol angelate csúcsterületeit megfelelő koncentrációkká alakítottuk át.

Asztal 1.

A nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával végzett dekursin- és dekursinol-angyalát-analízis eszközei és működési feltételei