Hipotonikus megoldás

A hipotóniás oldat megduzzasztja a sejtet, míg a hipertóniás oldat zsugorodik.

Kapcsolódó kifejezések:

Decellularizáció
Ozmolaritás
Hypertonikus megoldás
Izotóniás megoldás
Solute
Mutáció
Sejt membrán
Kromoszóma
Extracelluláris mátrix

Letöltés PDF formátumban

Erről az oldalról

Kristályoidok, kolloidok és hemoglobin alapú oxigént szállító oldatok

Debra T. Liu DVM, DACVECC, Deborah C. Silverstein DVM, DACVECC, a kisállatok kritikus gondozásának orvoslásában (második kiadás), 2015

Hypertonikus folyadékok

A hipotonikus oldatokkal ellentétben a hipertóniás oldatok, például 7,5% -os sóoldat magas ozmolaritása és nátrium-koncentrációja szabad vízeltolódást (azaz ozmózist) okoz az intracelluláris térből az extracelluláris térbe, az extracelluláris folyadék térfogatát 3-5-tel bővítve a beadott mennyiség szorzata. Az ozmotikus folyadék az intersticiális térből az intravaszkuláris térbe a hipertóniás oldat intravénás beadása után azonnal megkezdődik, még hamarabb, mint az elektrolitok egyenletes eloszlása az extracelluláris térben. Szabad víz az intracelluláris folyadék rekeszből az extracelluláris folyadék rekeszbe költözik, miközben az intersticiális folyadék ozmolaritása növekszik.

A 3–7,5% közötti hipertóniás sóoldatot használják hipovolémiás sokk, koponyaűri magas vérnyomás és súlyos hyponatremia kezelésére (lásd 50. fejezet). Gyakran alkalmazzák mind hipovolémiás sokkban szenvedő betegeknél, mind pedig koponyaűri magas vérnyomás miatt, például a fejsérüléses betegeknél. Az izotóniás és a hipotonikus kristályoidokhoz hasonlóan a hipertóniás sóoldat intravaszkuláris térfogat-bővítő hatása átmeneti (6 Az ezt követő ozmotikus diurézis megkönnyíti a nátrium felesleges kiválasztását is. A hipertóniás sóoldat intravaszkuláris térfogatnövelő hatásának meghosszabbítása érdekében gyakran kombinálják kolloid oldattal. Gyakran készítenek úgy, hogy 23,4% hipertóniás sóoldatot és 6% hetasztarchát vagy pentasztarchot 1: 2 arányban elegyítünk 3–5 ml/kg össztérfogatig.

Idegi blokád neurolitikus szerekkel

Subhash Jain, Rakesh Gupta, fájdalomkezelés, 2007

Hipertóniás és hipotonikus megoldások

A hipertóniás és hipotonikus oldatok intratekális injekciókban történő alkalmazása a fájdalom kezelésére 44 a 45–47-es neuropathia olyan változásaival társult, amelyeket szövettani bizonyítékok nem támasztottak alá. 48, 49 Az idegköteg ozmotikus duzzanata javasolt az idegvezetési blokád mechanizmusaként. 50 Későbbi kísérletek kimutatták a mielin degenerációját és axonolízisét, miután az idegeket legalább 1 órán át desztillált vízben vagy 1000 mmol/l-nél nagyobb ozmolalitású oldatokban áztatták. Így a korábbi klinikai megfigyelések valószínűleg az endoneuriás ödémának tulajdoníthatók, nem pedig az idegrostok szerkezeti károsodásának.

Ozmózis és ozmotikus nyomás

A sejtek aktívan szabályozzák térfogatukat RVD-k és RVI-k segítségével

Bár egy hipotonikus vagy hipertóniás oldat duzzanatot vagy zsugorodást vált ki, gyakran a térfogatváltozás nem marad fenn. Egy sejt, amely kezdetben megduzzad, ha hipotóniás közegbe kerül, végül elveszítheti megszerzett térfogatának egy részét: átmegy a szabályozási mennyiség csökkenése vagy RVD. A sejt duzzanata aktiválja azokat a kompenzációs mechanizmusokat, amelyek az ozmotikusan aktív oldott anyagok (ozmoliták) transzportját okozzák a sejtből. Hasonlóképpen, a sejtek zsugorodása aktiválhatja az ozmoliták beáramlását egyes sejtekben, ami kompenzációs duzzanathoz vezet, amelyet a szabályozási volumen növekedése vagy RVI. Ezeket az RVD-ket és RVI-ket a sejt ozmoliták tartalmának megváltoztatásával hajtják végre.

Humán karcinómák immunhisztokémiai és in situ hibridizációs kézikönyve, 4. kötet

Anyagok

Colcemid-oldat (10 μg/ml) (GIBCO)

Rák hipotonikus oldat: 3,0 g kálium-klorid, 4,8 g HEPES (N-2-hibroxietil-piperazin-N-2-etánszulfonsav) (Sigma, St. Louis, MO), 0,2 g EGTA (etilén-bisz [oxi-etilén-nitrol] tetraecetsav sav) (Sigma). (Oldjon fel 1000 ml desztillált vízben, és állítsa a pH-t 7,0-re 10 N NaOH segítségével. Tárolja 4 ° C-on 2-3 hétig.)

100 ml tripszin-etilén-diamin-tetraecetsav (EDTA) oldat (1x) (GIBCO)

Fixáló: 3 rész metanol (Fisher), 1 rész ecetsav (Fisher)

Vízfürdő 37 ° C-on

Inkubátor 37 ° C-on

10% FBS-t tartalmazó régi táptalaj, vagy készítsen új 1 ml FBS-t 9 ml HBSS-sel (GIBCO)

Veseelégtelenség felnőtteknél

Phuong-Thu T. Pham. Gabriel M. Danovitch, Májtranszplantáció (harmadik kiadás), 2015

Hyponatremia

A májtranszplantációra váró betegek gyakran szenvednek hiponatrémiában, mivel a különböző okok miatt csökkent vese szabad víztisztítás és többféle gyógyszeres hipotonikus oldat infúziója következik be. A legfőbb okok közé tartozik az antidiuretikus hormon (ADH) szekréciójának nem szozmotikus felpörgetése, megváltozott prosztaglandin anyagcsere, a szűrlet csökkent leadása a Henle hurok felemelkedő végtagjába a szabad víztermelés érdekében, a súlyos renovasokonstrikció következtében, és a szoros nátrium és víz proximális visszaszívódása, az elégtelen étrend az oldott anyag mennyisége, amely szükséges a megfelelő szabad vízkiválasztáshoz, és a negatív negatív sómérleg a sóveszteség pótlásának hiánya miatt. 46,47 A hiponatrémiás állapotot a folyamatosan magas szabad vízfogyasztás tartja fenn. Tünetmentes hiponatrémia kezelése (szérum nátriumkoncentráció 48,49

Sikeres májtranszplantációt követően a szérum nátrium-koncentrációjának emelkedése órákon belül bekövetkezhet, 50 feltehetően magas nátriumtartalmú vérkészítmények infúzióival, a nem megfelelő antidiuretikus hormon (SIADH) szekréció szindrómájának enyhülésével és végül a vesefunkció javulása. Számos szerző beszámolt arról, hogy az OLT betegeknél a hyponatremia gyors autokorrekciója összefügg az ozmotikus demyelinációs szindróma (vagy a központi pontine mielinolízis) kialakulásával. 51-53 Mindazonáltal meg kell jegyezni, hogy más tényezők, beleértve az anamnézisben szereplő alkoholizmust, alultápláltságot, hipoxiát és a máj encephalopathiáját, hozzájárulhatnak, mivel az OLT betegeknél a nátrium-korrekció mértéke és a neurológiai szövődmények közötti összefüggést nem figyelik meg egységesen. 54,55

A hematológiai és koagulációs hibák forrásai

Amer Wahed MD, Amitava Dasgupta PhD, DABCC, a hematológiában és a koagulációban, 2015

17.3.5 Hamis pozitív ozmotikus törékenységi teszt

Az ozmotikus törékenységi teszt hasznos örökletes szferocita hemolitikus vérszegénység diagnosztizálására. A szferociták ozmotikusan törékeny sejtek, amelyek hipotóniás oldatban könnyebben felszakadnak, mint a normális vörösvértestek. Mivel ezeknek a sejteknek a felülete: térfogata aránya alacsony, magasabb oldat ozmolaritással lizálnak, mint a normál diszkoid morfológiájú vörösvértestek. Hipotonikus oldatban történő inkubálás után a hemolízis további növekedése jellemzően örökletes szferocitózisban figyelhető meg. A nagyobb felületű sejtek: a térfogat arány, például a célsejtek vagy a hipokróm sejtek, jobban ellenállnak a hipotóniás oldatban történő lizálásnak.

Az immunológia által közvetített hemolitikus vérszegénységekhez kapcsolódó állapotok sok mikrogömböt tartalmazhatnak a perifériás vérben. Következésképpen a törékenységi teszt pozitív lehet immunológiailag közvetített hemolitikus vérszegénységben, az örökletes szferocitózis mellett, de előbbinek közvetlen Coombs-tesztje lenne pozitív, utóbbi pedig nem.

Hematológiai és koagulációs tesztelési hibák forrásai

Hamis-pozitív ozmotikus törékenységi teszt

Az ozmotikus törékenységi teszt hasznos örökletes szferocita hemolitikus vérszegénység diagnosztizálására [27]. A szferociták ozmotikusan törékeny sejtek, amelyek egy hipotonikus oldatban könnyebben szakadnak meg, mint a normális vörösvértestek. Mivel kicsi a felület: térfogat arány, nagyobb oldat ozmolaritással lizálnak, mint a normál diszkoid morfológiájú vörösvértestek. Hipotonikus oldatban történő inkubálás után a hemolízis további növekedése jellemzően örökletes szferocitózisban figyelhető meg. A nagyobb felületű sejtek: a térfogat arány, például a célsejtek vagy a hipokróm sejtek, jobban ellenállnak a hipotóniás oldatban történő lizálásnak.

Az immunológiailag közvetített hemolitikus vérszegénységekhez társuló állapotok számos mikrogömböt tartalmazhatnak a perifériás vérben. Következésképpen a törékenységi teszt pozitív lehet immunológiai úton közvetített hemolitikus vérszegénységben, az örökletes szferocitózis kivételével, de előbbinek közvetlen Coombs-tesztje pozitív lenne, utóbbi pedig nem.

A rágcsáló csontvelő kromoszóma aberrációs tesztje

9.5.4 Csontvelő gyűjtemény

Közvetlenül az egyes állatok eutanáziája után az alábbiakban részletesen feldolgozza az egyes combcsontokat. Megjegyezzük, hogy a hipotonikus oldat hozzáadása előtti kezdeti lépések megegyeznek a patkány mikronukleusz tesztjéhez használt lépésekkel.

Távolítsa el a bőrt és az alatta lévő szövetek nagy részét a hátsó láb hátsó részének felső részéről ollóval, valamint a csonthoz közeli és párhuzamos vágással. Ezután mozdítsa el a térdízületet, miközben az alsó lábat húzza el az állattól. Az ollóval kaparva tisztítsa meg a combcsontot az esetleges megmaradt izomtól, és vágja le az állat testéhez a lehető legközelebb, csontollóval; olló alkalmazható fiatal egereknél. Ily módon a combcsont nagy része kivágódik és a proximális végén nyílik, a disztális epiphysis még mindig érintetlen.

Tolja jól a tű-fecskendő szerelvény tűjét a csont nyílásába, majd nyomja a csontot a megfelelő centrifuga-cső alja felé úgy, hogy az a HBSS alja felé nézzen. A tűvel tartsa a csontot a cső belsejéhez, húzza a HBSS-t a fecskendőbe a combcsont tetején (nyitott végén) keresztül, majd engedje vissza a csőbe. Dobja el az üres combcsontot, majd ismételje meg az eljárást a második combcsontig, mielőtt ismét felszívná és a fecskendőn keresztül kiürítené a szuszpenziót. Ily módon a két combcsont gyakorlatilag az összes sejtje csőben finom szuszpenzióban lesz.

Centrifugáljuk a csöveket 1000 fordulat/perc sebességgel, egy pad tetején lévő centrifugában 5 percig. Ezután dekantáljuk és dobjuk ki a felülúszót. Helyezze vissza a sejteket szuszpenzióba úgy, hogy a csövet „kopogtatja” (kézzel csapkodja meg), vagy használjon örvénykeverőt.

Addig adj hipotóniát, amíg az össztérfogat megközelítőleg 10 ml-re nem csökken. Ezen a ponton a vörösvérsejtek lizálnak; ezért különösen az egerek esetében a sejtek jelenléte a szuszpenzióban és az azt követő pelletek centrifugálásakor nem feltétlenül nyilvánvaló.

Helyezze a csöveket körülbelül 37 ° C-os vízfürdőbe körülbelül 10 percre; ez az idő nem kritikus, mert a sejtek szinte azonnal megduzzadnak.

Fokozatosan adjon hozzá 2 ml fixálószert a sejtszuszpenzióhoz, miközben örvénykeverővel folyamatosan kis sebességgel keveri.

Centrifugáljuk a csöveket 1500 fordulat/perc sebességgel 5 percig. Ezután dekantáljuk és dobjuk ki a felülúszót.

Finoman pöccintve szuszpendálja a sejteket a maradék oldatban. Ezután adjon hozzá kb. 2 ml fixálószert folyamatos keverés közben.

Adjon további javítást a 10 ml-es jelöléshez. Ezután hagyja a csöveket szobahőmérsékleten legalább 30 percig. Alternatív megoldásként tegye a csöveket hűtőszekrénybe és egy éjszakán át tárolja.

Centrifugáljuk a csöveket 1500 fordulat/perc sebességgel 5 percig. Ezután távolítsa el a felülúszó nagy részét, és hagyjon kb. 1 ml maradványt, mielőtt a sejteket újraszuszpendálná, mint korábban, és 10 ml-t feltöltve fixálva.

A sejteket ebben a szakaszban legalább egy éjszakán át hűtött állapotban kell tárolni, de körülbelül 4 ° C-on több hónapig tárolhatók, feltéve, hogy a centrifugacsövek kompatibilisek a rögzítővel.