A GadX regulon in vitro befolyásolja a sertés enteropatogén Escherichia coli virulencia génexpresszióját és adhézióját

Absztrakt

Savas környezeti körülmények között gátolja az enteropatogén Escherichia coli (EPEC) azon képességét, hogy expresszálja a virulencia faktor génjeit, valamint kötődési és kiürülési (AE) elváltozásokat fejlesszen ki. Ez a gátlás a GadX transzkripciós faktor aktiválódásának köszönhető, amely felfelé szabályozza a glutaminsav-dekarboxiláz (Gad) expresszióját. Gad viszont γ-aminovajsavat (GABA) termel, amelynek a közelmúltban bebizonyosodott, hogy a megnövekedett mucin-1 szint miatt in vitro jótékony hatással van a jejunális hámra.

sertés

Jelen tanulmányban azt próbáltuk tesztelni, hogy a GadX erőltetett aktiválása/túlexpressziója megszünteti-e az EPEC virulenciához kapcsolódó jellemzőit és kiváltja-e a fokozott GABA termelést. EPEC törzseket izoláltunk hasmenéses disznókból, és savasítással, valamint indukálható expressziós vektor plazmidon keresztül GadX túlzott expresszióval aktiváltuk a GadX-et. Meghatároztuk a növekedési közegben a GABA koncentrációt, a sertés bélhámsejtekhez való tapadás képességét (IPEC-J2) és a virulencia gén expresszióját.

A savasított táptalajban a növekedés megnövekedett GABA-szintet, a szabályozott gadA/B-expressziót és a baktérium-adhezin-intimin csökkentett mRNS-szintézisét eredményezte. A gadX génnel transzformált EPEC törzsek 2,1–3,4-szer magasabb GABA-szintet produkáltak, mint az üres vektoros kontrollok, és teljesen elvesztették képességüket az IPEC-J2 sejtekhez tapadni és aktin akkumulációt indukálni.

Arra a következtetésre jutunk, hogy az intenzívebb GadX-aktiváció megszünteti az EPEC azon képességét, hogy a bélhámhoz tapadjon a fő virulencia-gének expressziójának csökkentésével.

Előző kiadott cikk Következő kiadott cikk