Az étrendi omega-3 többszörösen telítetlen zsírsavak megváltoztatják a máj és a plazma bioaktív lipidek zsírsav-összetételét a C57BL/6 egerekben: lipidómikus megközelítés

Biokémiai Tagozat, Memorial University, St. John's, NL, Kanada

Biokémiai és Molekuláris Biológiai Tagozat és Kardiovaszkuláris Kutatási Központ, Saint Louis Egyetem, St. Louis, Missouri, Amerikai Egyesült Államok

Biokémiai Tagozat, Memorial University, St. John's, NL, Kanada

Kayode A. Balogun,
Carolyn J. Albert,
David A. Ford,
Robert J. Brown,
Sukhinder K. Seema

Ábrák

Absztrakt

Háttér

Az omega (n) -3 többszörösen telítetlen zsírsavak (PUFA) bioaktív lipid komponensekké alakulnak, amelyek fontos közvetítői az anyagcsere és a fiziológiai útvonalaknak; hogy mely bioaktív vegyületek metabolikusan aktívak, és hatásmechanizmusaik még mindig nem tisztázottak. Lipidomiás technikákkal vizsgáltuk az n-3 PUFA-tartalmú étrendek hatását a különféle bioaktív lipidek zsírsavösszetételére a plazmában és a májban.

Módszertan és főbb megállapítások

1. táblázat: A kísérleti étrendek zsírsavösszetétele.

Lipidomikus elemzés

Lipidek extrakciója, standardok és oldószerek.

Elektrospray ionizációs tömegspektrometria (ESI-MS).

A mintákat közvetlen infúziós ESI-MS alkalmazásával elemeztük pozitív vagy negatív ion üzemmódban, Thermo Fisher TSQ Quantum Ultra rendszert használva XCalibur adatgyűjtő szoftverrel [44]. A mintaelemzések dallamparamétereit az alábbiak szerint optimalizáltuk és állítottuk be: permetezési feszültség = 3500 V, áramlási sebesség = 3 µl/perc, ion söpörőgáz nyomása = 0,2 (tetszőleges egységek), köpenygáz = 12 (tetszőleges egységek), segédgáznyomás = 6 (tetszőleges egységek), és a kapilláris hőmérséklet = 270 ° C. Az ütközési energiákat a PC, LPC és a szfingomielin (SM) elemzéséhez 28 eV-ra állítottuk be. A koleszteril-észterek (CE) elemzésének ütközési energiáit 25 eV-ra, a ceramidra (CER) 32 eV-ra állítottuk be. A CE-ket pozitív ion módban detektáltuk a kolesztadán semleges veszteségének (NL) vizsgálatával (m/z 368,5). Az SM, PC és LPC szennyezett fajait pozitív ion módban detektáltuk a kolin NL-értékének vizsgálatával (m/z 59,1). Az FFA-t és a PE-t negatív ion módban azonosítottuk az [MH] felmérésével - m/z 200 és 900 között. A TG szodált fajait pozitív ion módban azonosítottuk [M + Na] + m/z 800 közötti felméréssel. Minden elemzett adatot korrigáltunk a 13 C izotóp hatásokra Han és mtsai. [44].

Statisztikai analízis

Az adatokat elemeztük a GraphPad Prism szoftver segítségével (5.0 verzió). A csoportok közötti különbségek statisztikai szignifikanciáját párosítatlan t-teszttel határoztuk meg. Az eredményeket átlag ± standard deviációval (SD) fejezzük ki. A különbségeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük, ha a társított P érték 1. ábra volt. Foszfatidilkolin (PC) zsíracil-összetétele magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított étrendet fogyasztó egerekben.

A plazma (A) és a máj (B) PC-fajokat úgy számszerűsítettük, hogy a PC szaturált adduktjait ESI-MS alkalmazásával pozitív ion üzemmódban NL szkenneléssel m/z 59,1-re mértük, a „Módszerek” részben leírtak szerint. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotópos hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-teszt alkalmazásával számítva. * P 2. ábra Magas és alacsony n-3 PUFA-val dúsított étrenddel táplált egerek szabad zsírsav (FFA) összetétele.

A plazma (A) és a máj (B) FFA összetételét az [M-H] mérésével számszerűsítettük - ESI-MS alkalmazásával negatív ion üzemmódban m/z 200 és 900 között. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotópos hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-teszt alkalmazásával számítva. * P 3. ábra: Liszofoszfatidilkolin (LPC) zsíracil-összetétele magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított étrendet tápláló egerekben.

A plazma (A) és a máj (B) LPC fajokat úgy számszerűsítettük, hogy a PC szaturált adduktjait ESI-MS alkalmazásával pozitív ion üzemmódban NL szkenneléssel m/z 59,1-re mértük, a „Módszerekben” leírtak szerint. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotópos hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-teszt alkalmazásával számítva. * P 4. ábra Foszfatidil-etanol-amin (PE) zsírsav-acil-összetétele magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított étrendet fogyasztó egereknek.

A PE fajok plazma (A) és máj (B) szintjét az [M-H] mérésével számszerűsítettük - ESI-MS alkalmazásával negatív ion módban m/z 200 és 900 között. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotópos hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-teszt alkalmazásával számítva. * P 5. ábra: Az alacsony és n-3 PUFA-val dúsított étrendet tápláló egerek szfingomielin (SM) zsírsav-acil-összetétele.

Az SM-fajok plazma (A) és máj (B) szintjét úgy számszerűsítettük, hogy a PC szaturált adduktjait ESI-MS alkalmazásával pozitív ion módban mértük NL szkenneléssel m/z 59,1-re, a „Módszerek” részben leírtak szerint. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotópos hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-próba alkalmazásával. * P 6. ábra: Magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított étrendet tápláló egerek ceramid-zsírsav-acil-összetétele.

A plazma (A) és a máj (B) CER fajtákat ESI-MS alkalmazásával, negatív ion módban számszerűsítettük NL szkenneléssel m/z 256,2-re. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotóp hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-próba alkalmazásával. * P 7. ábra: Koleszteril-észter (CE) zsíracil-összetétele magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított táplálékkal táplált egerekben.

A plazma (A) és a máj (B) CE fajtákat ESI-MS alkalmazásával pozitív ion módban számszerűsítettük m/z 368,5 m/z NL szkenneléssel, a „Módszerek” leírás szerint. Az adatokat korrigáltuk a 13 C izotóp hatásokra. Az adatokat átlag (n = 6) ± SD és P-értékként adjuk meg, párosítatlan t-teszt alkalmazásával számítva. * P 8. ábra: magas és alacsony n-3 PUFA-dúsított étrenddel táplált egerek triglicerid (TG) zsírsav-acil-összetétele.